目的selleck Nirogacestat:构建大鼠心肌缺血再灌注模型,探究盐诱导激酶2(SIK2)对大鼠心肌线粒体能量代谢的影响及其机制。方法:选用成年Sprague-Dawley雄性大鼠(200-220g),通过结扎大鼠心脏冠脉左前降支建立急性心肌梗死模型,在结扎30min后松开结扎线再灌注2h。于大鼠造模24h之前通过左侧股静脉注射博舒替尼(Bosutinib)(10mg/kg)建立SIK2抑制组模型,实验分为手术对照组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、SIK2抑制组(I/R+Bosutinib组)(10mg/kg处理24h),每组5只。心电图检测大鼠心肌缺血情况;心脏超声检测各组大鼠心脏结构和功能变化;苏木精伊红(HE)染色观察各组大鼠心肌细胞病理学变化;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组大鼠心肌组织中乳酸(LA)及腺苷三磷酸(ATP)的含量变化;蛋白印迹法(WB)检测各组大鼠心肌组织中SIK2、p-DRP1(Ser616)、DRP1、p-AKT(Ser413)、AKT、p-m TOR、m TOR蛋白表达水平;透射电镜观察线粒体的形态学Gefitinib-based PROTAC 3体内实验剂量变化。结果:1.检测心肌缺血模型的建立:心电图结果显示,与对照组相比,冠脉结扎组ST段显著抬高。2.SIK2抑制组模型构建及鉴定:通过左侧股静脉分别注射0mg/kg、5mg/kg、10mg/kg Bosutinib抑制正常大鼠心脏组织中SIK2蛋白的表达,24h后建立心肌缺血再灌注模型。通过WB实验,结果发现10mg/kg Bosutinib组心脏组织SIK2蛋白表达降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。3.心肌组织病理学改变:HE结果显示,与Sham组相比,I/R组心肌细胞病理损伤加重且SIK2蛋白表达增加(P<0.05);与I/R组相比,I/R+Bosutinib组心肌病理损伤减轻且SIK2蛋白表达降低(P<0.05)。4.心脏功能及结构的改变:超声心动图结果显示,与Sham组相比,I/R组左室射血分数(LVEF)、缩短分数(FS)降低(P<0.05);与I/R组相比,I/R+Bosutinib组LVEF、FS增高(P<0.05),各组间室间隔厚度(IVS)、左室后壁厚度(LVPW)无明显差别(P>0.05)。5.心肌组织中ATP与乳酸含量的改变:通过ELISA检测结果显示,与Sham组相比,I/R组ATP含量减少,乳酸含量增加(P<0.05);与I/R组相比,I/R+Bosutinib组ATP含量增加,乳酸含量减少(P<0.05)。6.心脏组织中与能量代谢相关蛋白的改变:WB结果显示,与Sham组相比,I/R组p-DRP1(Ser616)表达增多,p-AKT(Ser413)、p-m TOR蛋白表达减少(P<0.05);与I/R组相比,I/R+Bosutinib组p-DRP1(Ser616)蛋白表达减少,p-AKT(Ser413)、p-m TOR蛋白表达增多(P<0.05);各组AKT、m TOR、DRP1蛋白表达无明显差异(P>0.05)。7.心肌细胞内线粒体超微结构变化:透射电镜观察到Sham组线粒体形态正常,线粒体嵴走行清晰,线粒体整体结构完整;I/R组线粒体体积增大、线粒体整体严重肿胀呈空泡状,线粒体内部结构未见显示、嵴溶解;I/R+Bosutinib组线粒体肿胀较轻微,部分线粒体嵴显示不清。结论:SIK2通过AKT/m TOR信号通路及促进线粒体裂变抑制能量代谢,抑制SIK2表达提高能immune modulating activity量代谢水平可以减轻心肌缺血再灌注损伤。