PEG联合中药活血通络方促进脊髓融合疗效的实验研究

目的:本课题是PEG联合中药活血通络汤来抑制SCF术后脊髓胶质瘢痕增生来达到促进SCF疗效的实验研究,通过观察新西兰兔SCF术后口服中药活血通络方疗效对比各项数据进行统计,来评价中药活血通络方的临床疗效及其安全性,为SCI的临床治疗提供新的方法和思路。方法:将纳入标准的新西兰兔以手术方式建立脊髓完全横断动物模型,构建模型后随机分成SCI组、SCI+PEG组、SCI+PEG联合活血通络方组,实验组动物术后48h开始喂食活血通络方,固定时间每日一次,一次10ml/kg,连续喂食30天。观察相应指标来明确应用活血通络方抑制胶质瘢痕后是否可以优化PEG-600治疗SCI的效果。采用Tarlov评分方法对两组动物进行术后后肢运动功能的评估。从术后DTI检查中观察脊髓横断面连接情况及信号通路的传导状况,再从动物活动状况评估治疗效果。对新西兰兔的脊髓损伤区组织进行免疫组化对GFAP、MSimilar biotherapeutic productBP、NF-200等指标进行分析。观察脊髓组织中胶质瘢痕的增生和神经纤维的再生状况。结果:1.行为学:SCI空白组术后各时间点评分较稳定,30天后下肢活动能力仍较差,PEG+中药组新西兰兔与空白组组间比较有明显差异(P<0.05)。提示活血通络方对改善新西兰兔脊髓损伤双后肢神经功能,具有一定的抗脊髓损伤作用,PEG组与空白组差异统计学比较有统计学意义p<0.05。PEG+中药组与空白组差异统计学比较,C组活动功能改善明显明显提高p<0.01,差异有统计学意义,说明PEG+中药活血通络方对促进活动功能恢复效果优于单纯PEG组。2.影像学:空白组影像扫描结果显示与其他组相比,空白组可见脊髓损伤区连接中断,PEG组和PEG+中药组移植部位解剖组织连续性重建更加显著Liproxstatin-1。通过观察神经纤维束的完整性,DTI结果表明了PEG和PEG+中药组中横断面的纤维再生明显。相比之下,空白组中的纤维再生不明显。3.组织学:HE染色结果提示脊髓损伤应用PEG及在PEG基础应用中药活血通络方对SCI后神经功能的恢复有明显的促进作用,损伤的胶质瘢痕增生改善情况PEG+中药组较单纯PEG组更为显著。在空白组脊髓病例图片中发现大量的GFAP增生,在PEG组中也存在部分GFAP,但在PEG+中药组中很少见,AIODs的半定量分析显示空白组和PEG+中药组之间存在显着差异(p<0.01)。这说明中药活血通络方对抑制星形胶质细胞是有积极作用的,同时PEG组中桥接组织也存在部分GFAP增生,与空白组比较(p>0.05)。在PEG组和PEG+中药组的桥接组织中观察到大量MBP,在空白组中很少见。半定量分析显示空白组与PEG组、PEG+中药组之间存在显着差异(p<0.01),这说明PEG对横断区脊髓生长起到了积极的促进作用。同时PEG组、PEG+中药组之间OD值相比较存在显著差异(p<0.05),说明PEG+中药活血通络方较PEG组促进神经再生selleck HPLC更为显著。NF-200是轴突细胞骨架的关键组成部分,PEG组、PEG+中药组横切位点有明显的轴突萌芽,但在空白组中没有。在PEG组、PEG+中药组的切片中也存在高密度轴突的区域,这是脊髓移植节段存活的标志。PEG组、PEG+中药组与空白组神经微丝蛋白AIOD的半定量分析都有显著差异,AB组间比较差异有统计学意义(p<0.05)。PEG组、PEG+中药组之间比较差异有统计学差异(p<0.05)。结论:1.PEG联合中药活血通络方治疗SCI,能够抑制胶质瘢痕形成,促进神经纤维修复。2.PEG联合中药活血通络方能够促进SCI运动功能恢复,优化脊髓融合疗效。