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细菌性脑膜炎是一种严重威胁生命的中枢神经系统(Central nervous system,CNS)疾病,它是由周围脑膜组织感染细菌所引起的。细菌性脑膜炎在养殖业多引发经济损失,也对食品安全和公共卫生造成威胁;在人类,其具有较高的发病率和死亡率,在全世界范围内特别在儿童中,是造成死亡或残疾的主要原因之一。大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)是最常见的引起细菌性脑膜炎的革兰氏阴性菌,它也是研究细菌性脑膜炎的常见模式菌株。通常情况下,为了引起脑膜炎,E.coli必须首先在血液中生存,随后接触并穿透血脑屏障(Blood-brain barrier,BBB),引起炎症反应。尽管细菌性脑膜炎的抗生素疗法对于该病的治疗具有较好的效果,但由于人们对于细菌穿透BBB,破坏BBB完整性以及引起中枢炎症反应的分子机制在很大程度上仍不清楚,其综合死亡率仍然较高,且伴有神经后遗症。在以往Vorinostat浓度,长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lnc RNA)通常被认为是转录过程中的垃圾而不发挥作用。但近年越来越多的研究发现lnc RNA是许多感染性疾病中的重要的调控因子,其调控方式也多种多样。然而,在细菌性脑膜炎尤其是大肠杆菌性脑膜炎中,关于lnc RNA的功能研究较少。本研究基于感染致脑膜炎大肠杆菌(Meningitic E.coli,MNEC)的人脑微血管内皮细胞(Human braiFer-1小鼠n microvascular endothelial cells,h BMECs)中差异表达lnc RNA的测序结果,寻找在MNEC突破BBB的各个环节中具有调控功能的lnc RNA并解析其分子机制。根据调控机制的不同,本文的研究内容如下:1、Lnerve biopsync C11orf54-1通过激活核因子κB(Nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路调控中枢炎症。本研究首先在lnc RNA测序结果中鉴定到一条显著下调表达的lnc RNA lnc C11orf54-1,通过Northern blot证实该lnc RNA在MNEC感染过程中被降解产生mg U2-30和mg U2-19,且该降解过程是由易位的RNA酶Coilin蛋白介导的。在功能上,lnc C11orf54-1来源的非编码RNA mg U2-30可以与白介素-1受体相关激酶1(Interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1)相互作用,诱导其寡聚化和自我磷酸化,从而促进NF-κB信号通路的激活。进一步过表达/敲除mg U2-30证实mg U2-30能够在MNEC感染的h BMECs中促进细胞因子的表达,加剧中枢炎症反应。2、Lnc RSPH9-4通过mi R-17-5p/MMP3轴破坏BBB的完整性。本研究发现lnc RSPH9-4在MNEC感染后的h BMECs中显著上调,通过在h BMECs中过表达/敲低lnc RSPH9-4发现它能够介导BBB完整性的破坏。进一步对过表达lnc RSPH9-4的h BMECs进行测序分析,发现总共有639个显著差异表达的m RNA和299个显著差异表达的小RNA(micro RNA,mi RNA)。对这些数据进行生物信息学分析和实验验证,证实lnc RSPH9-4可以通过一种常见的lnc RNA调控方式,即作为分子海绵竞争性结合mi R-17-5p从而上调MMP3表达,而MMP3可以靶向性地降解细胞间紧密连接蛋白(Tight junctions,TJs),进而破坏h BMECs单层细胞的完整性。证明MNEC所诱导的lnc RSPH9-4可以通过mi R-17-5p/MMP3轴加剧h BMECs中TJs的破坏。3、Lnc MOB3A-2编码的细菌入侵调节小肽(Small regulatory polypeptide of bacterial invasion,SPBI)促进MNEC侵入BBB。此外,本研究首次在感染性疾病中研究了宿主lnc RNA的编码潜能,并在细菌性脑膜炎模型中证实了lnc RNA lnc MOB3A-2的开放阅读框(Open reading frame,ORF)能够编码分子量为9.5 k Da的多肽SPBI,该结果也被我们所制备的抗SPBI抗体所验证。通过黏附侵入试验进一步证实SPBI能够促进MNEC侵入h BMECs,而该效应是由SPBI所促进的h BMECs细胞骨架重排所介导的。由此可以认为,lnc MOB3A-2能够编码多肽SPBI,该多肽促进MNEC侵入BBB。本研究通过lnc RNA作为分子支架结合蛋白,lnc RNA作为分子海绵结合mi RNA以及lnc RNA编码多肽这三个维度解析了lnc RNA调控真核表达的分子机制,阐明了lnc C11orf54-1、lnc RSPH9-4和lnc MOB3A-2这三个lnc RNA在调控MNEC突破BBB并最终引起细菌性脑膜炎的各个关键环节中的作用,为未来开发针对细菌性脑膜炎及其神经后遗症的药物提供新的研究视野与治疗靶点。

全球气候的不断变化导致厂频繁的降水不均,区域性干旱的情况愈发严重。目前,干旱胁迫已成为粮食减产的要因。而在农作物中,水稻对干旱尤为敏感,提高水稻耐旱性已成为水稻研究的重要目标。Di19(Drought induced 19)蛋白家族是一类在植物中广泛存在、受干旱诱导的锌指转录因子,具有很高的保守性,并被发现对植物适应干旱胁Mediator of paramutation1 (MOP1)迫起到促进作用。本文对水稻Di19进行了研究以期为水稻抗旱提供新的思路。本研究以中花11(ZH11)为野生型进行研究。首先,本研究通过qRT-PCR验证了野生型水稻中Di19基因的表达会受到干旱胁迫诱导,暗示了该基因可能参与植物耐旱的一系列机制。为了深入探究OsDi19的生物学功能,本研究创制了 OsDi19的过表达水稻,通过表达量鉴定选择了两个表达量较高的株系Di19OE6和Di1PI3K/Akt/mTOR抑制剂90E10进行后续的研究。对土壤中生长的野生型和过表达水稻进行干旱处理发现过表达体水稻对干旱有更强的耐受性。此外,失水处理后的水稻叶片在电镜下观察发现过表达体水稻的气孔开度低于野生型,闭合气孔的比例高于野生型,这与离体失水率的测定结果相符合。为了探讨OsDi19参与响应干旱胁Navitoclax NMR迫分子机理,我们应用酵母双杂、Co-IP以及双分子荧光互补等实验手段筛选并验证到两个与其互作的激酶蛋白OsCCPK和OsNEK,为分子机制的深入研究提供了思路。此外,为了研究OsDi19所调控的下游信号通路,本研究以野生型水稻为对照对过表达水稻进行了转录组分析。结果显示,log2(OE/WT)>1(p<0.05)的转录本中,上调的有224个,下调的有167个,其中包括许多耐逆相关基因。另外,我们在转录组测序的基础上.发掘差异表达基因启动子区可被Di19结合的顺式作用元件,之后利用ChIP-PCR技术进行了验证,发现了 OsDi19直接调控的5个靶基因,包括2个耐逆相关的基因。这些结果在一定程度上解释了OsDi19的对耐旱的调控机制。

背景与目的：中国女性乳腺癌发病年龄早，保乳手术和乳腺切除术后乳房重建是避免乳腺癌患者selleckchem PLX3397失去乳房的合理选择。近年来保乳整形术式的推广使得小乳房患者保乳术后仍能维持较好外形。使用假体联合钛网补片(TiLoop Bra)的乳房重建技术相对简单，便于推广，也能在乳房全切后较好重塑乳房外形。本研究通过回Decitabine供应商顾性分析评估两种方法在手术效果与满足患者术后美观需求方面的优劣，以期为临床决策提供参考。方法：回顾性分析2019年1月—2021年10月在中南大学湘雅医院乳腺外科接受以上两种手术的早期乳腺癌患者资料，其中接受保乳整形手术(保乳组)与保留乳头乳晕皮下腺体切除加假体联合补片一期乳房重建手术(乳房重建组)的患者各40例。收集患者的基本临床病理特征信息，两组的手术时间、术后留置引流管时间、术后住院时间、住院费用以及手术相关并发症等信息，使用Brgenetic variabilityeast-Q量表评估患者术后满意度。结果：保乳组在手术时间、术后留置引流管时间、术后住院时间以及住院费用上均明显优于乳房重建组(均P<0.001)。乳房重建组乳头麻木的发生率明显高于保乳组(P<0.001)；乳房重建组发生皮瓣坏死4例，保乳组无皮瓣坏死发生，但差异无统计学意义(P=0.079)；两组间血肿、切口感染、脂肪坏死和组织挛缩的发生率差异均无统计学意义(均P>0.05)。两组患者的心理健康、身体健康、性健康及对乳房外形的满意度差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论：两种手术方式的美学效果相似。皮瓣坏死为假体联合补片一期乳房重建中的严重并发症，背阔肌肌皮瓣覆盖创面可作为补救治疗手段。满足保乳手术适应证的患者，应优先考虑保乳整形的手术方式；存在保乳手术禁忌证的患者，但有乳房外形要求的，合理评估后实施保留乳头乳晕腺体切除加假体联合补片一期乳房重建也是一个可选方案。

目的 探索瑞芬太尼后处理对心肌缺血再灌注(IR)损伤保护作用的机制。方法 用结扎大鼠冠状动脉左前降支的方法建立心肌IR损伤模型。将成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组。假手术组只穿线不结扎；模型组，缺血30 min,再灌注30 min;实验组从大鼠缺血25 min至再灌注前5 min,连续输注瑞芬太尼10μg·kg~(-1)·min~(-1)。用试剂盒法检测丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽/L-谷胱甘肽(氧化)(GSH/GSSG)的含量，用实时荧光定量聚合酶链反应检测NEtoposide MWrf2E-616452、血红素氧化酶1(HO-1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)的变化。结果 实验组、模型组与假手术组的MDA浓度分别为(4.61±2.04),(8.02±2.12)和(3.78±1.63)nmol·mg~(-1),SOD活性分别为(86.49±15.53),(60.43±24.71)和(100.42±16.47)U·mg~(-1),GSH/GSSG比值分别为8.23±3.68,2.59±0.88和9.21±4.08,Nrf2表达水平分别为3.11±histopathologic classification0.78,2.08±1.06和1.00±0.09,HO-1表达水平分别为3.29±1.20,2.23±0.87和1.00±0.09,NQO1表达水平分别为3.35±1.08,2.29±0.94和1.00±0.12。实验组的上述指标与模型组比较，差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 瑞芬太尼后处理可能通过Nrf2通路激活自噬，保护心肌IR损伤。

关于中药的抗衰老功效,已经有许多相关报道,但是对于其物质基础及作用机制尚未明确阐明。腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)是能量代谢的感受器,能够延长寿命这一效应,在不同实验中都得到相应的证实。过表达或用二甲双胍激活AAK-2/AMPK均有延长线虫、果蝇寿命的功效。AMPK抗衰老的可能下游通路包括TOR/S6k途径、FOXOs途径、CRTC途径等。中医药核心理念之一为治未病,其表现之一即Compound C小鼠是以药食同源方式改善机体,由此达到长寿的目的。部分药食同源药物有可能通过激活AMPK以达到养生,延长寿命的目的。经过总结发现,相关中药复方中丹参、黄芪、黄连、茯苓、白术、大黄、人参使用频率较高,并且补虚活血类药物占主导。采用ingenuity pathway analysiNavitoclax molecular weights(IPA)网络药理学软件分析,间接作用于AMPK靶蛋白而非其上下游通路的单体药物有黄连素、大黄素、姜黄素、白藜芦醇、虫草素、牛蒡子苷元等6个,在一定程度上说明药食同源药物通过AMPK通路延长寿命的可行性。该文综合数据库查询和IPA网络药理学软件分析对具有激活AMPK通路来延缓衰老功能的中药单体及组分进行了归纳和总结,并基于中医药”药食同源”的理念routine immunization将这些药物可能通过改善能量代谢对于延缓衰老的影响进行了展望。

目的：探讨长链非编码RNA(lncRNA)前列腺癌相关ncRNA转录本1(PCAT1)对乳腺癌细胞增殖、凋亡和放射敏感性的影响，并分析其分子机制。方法：实时定量PCR分析lncRNA PCAT1和miR-329-3p在乳腺癌细胞系（MCF-7、T47D、Bcap-37）以及正常乳腺上皮细胞（MCF-10A）中表达水平。转染lncRNA PCAT1小干扰RNA、miR-329-3p模拟物至T47D细胞，采用噻唑蓝（MTT）实验、流式细胞术、细胞克隆实验分析干扰ln点击此处cRNA PCAT1表达或过表达miR-329-3p对T47D细胞增殖活力、凋亡和放射敏感性的影响。双荧光素酶实验验证lncRNA PCAT1与miR-329-3p之间的关系。免疫印迹法检测细胞周期素D1(CyclinD1)、磷酸化组蛋白（γ-H2AX）、切割的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)以及β-连环蛋白（β-Catenin）表达。结果：与MCF-10A细胞比较，MCF-7、T47D、Bcap-37细胞中lncRNA PCAT1表达量显著升高（P<0.05）,miR-329-3p表达量显著降低（P<0.05）。干扰lncRNA PCAT1表达或过表达miR-329-3p显著下调CyclinD1表达（P<0.05），上调Cleaved-caspase-3表达（P<0.05），降低T47D细胞活力（P<0.05），促进细胞凋亡（P<0.05），并增加细胞的放射敏感性Medicaid prescription spending（P<0.05）。miR-329-3p与lncRNA PCAT1序列直接结合，干扰lncRNA PCAT1后miR-329-3p的表达显著升高（P<0.05），过表达lncRNA PCAT1后miR-329-3p的表达显著降低（P<0.05）。干扰lnBLZ945生产商cRNA PCAT1表达显著抑制β-Catenin蛋白表达（P<0.05）。抑制miR-329-3p表达可减弱干扰lncRNA PCAT1对T47D细胞增殖活力、凋亡、放射敏感性以及β-Catenin蛋白表达的影响（P<0.05）。结论：干扰lncRNA PCAT1可抑制乳腺癌细胞增殖，诱导细胞凋亡，增加细胞放射敏感性，其机制可能与靶向miR-329-3p调控Wnt/β-Catenin信号通路相关。

免疫球蛋白A(IgA)是最常见抗体之一，并在黏膜表面提供第一道免疫保护。IgA~+B细胞是IgA产生的主要来源细胞。近年来的研究表明，IgA在肿瘤发生发展中呈现双向作用，在不同的肿瘤类型及免疫微环境中发挥不同的作用，尤其是IgA~+B细胞和IgA的促肿瘤和免疫抑制作用成为目前关注的热点及研究的难点。肿瘤微环境（TME）中IgA~+B细胞可通过分泌免疫抑制因子，如IL-10、TGF-β、PD-L1、FASL、IL-35和Tim1发挥免疫抑制作用。免疫抑制性IgA在多种肿瘤组织中高表达，并selleck NMR与恶性肿瘤预后差密切相关。本文总结了IgA~+B细胞和IgA的免疫抑制和促肿瘤作用及其机制，讨论了肿瘤免疫抑制微环境中细胞因子和bio-inspired sensor代谢产物等在调控IgA类转换重组（CSR）中所起的作用，以及IgA免疫抑制作用的临床意义，为肿瘤免疫治疗提供新的思路和治疗策selleckchem Fulvestrant略。

目的探索乳腺癌细胞来源的外泌体搭载平阳霉RAD001半抑制浓度素对乳腺癌肿瘤Pathologic nystagmus干细胞恶性生物学行为的影响。方法用流式细胞术从MDA-MB-231乳腺癌细胞中筛选出CD133阳性乳腺癌肿瘤干细胞,用差速离心法分离外泌体,并将15,30和60 mg·mL~(-1)平阳霉素搭载到外泌体。将肿瘤干细胞分为空白组、对照组和低、中、高剂量实验组。空白组置于DMEM培养基进行常规培养;对照组用4 Gy X射线进行照射1次,照射时间20 min,而后置于DMEM培养基进行常规培养;低、中、高剂量实验组置于含300μg·mL~(-1)外泌体(载药量分别为15,30和60 mg·mL~(-1)平阳霉素)的DMEM培养基进行常规培养。用Transwell法检测细胞侵袭能力,用肿瘤球形成实验检测乳腺癌细胞体外肿瘤形成能力。结果低、高剂量实验组和对照组、空白组的Transwell穿越细胞数分别为(54.32±4.67),(38.75±4.33),(68.67±4.67)和(107.65±8.37)个,肿瘤球个数分别为(118.29±13.21),(46.27±9.93),(132.01±10.15)和(153.25±16.54)个,肿瘤球体积分别为(124.05±19.56),(64.68±17.72),(156.64±34.42)和(215.25±27.64)μm~3。高剂量实验组的上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论外泌体搭载平阳霉素较单用平CP-456773阳霉素更能显著抑制乳腺癌肿瘤干细胞的增殖和侵袭能力。

目的 MLN8237浓度探讨非体外循环冠状动脉搭桥(OPCAB)后发生心搏骤停(CA)的危险因素，为临床治疗提供参考。方法 采用回顾性研究，选取2018年1月至2020年12月于该院心脏大血管外科接受OPCAB治疗且在术后发生CA的患者25例为研究组，另选取同期接受OPCAB治疗购买Cobimetinib未发生CA的患者100例为对照组(性别相同，年龄±2岁)。比较两组病例临床资料，采用单因素及logistic多元回归模型分析OPCAB后发生CA的危险因素。Myoglobin immunohistochemistry结果 研究组室壁运动障碍发生率、术前左心房直径(LAD)及左心室舒张末期直径(LVDd)均高于对照组，术前左心室射血分数(LVEF)低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。logistic多元回归分析结果显示，LVDd高[OR=1.141,95%CI(1.017,1.280),P=0.025]是OPCAB术后发生CA的独立危险因素，而LVEF高[OR=0.942,95%CI(0.890,0.998),P=0.043]是保护因素。结论 接受OPCAB患者应严格进行术前评估，对于低LVEF合并LVDd增加的患者更应重视术后监护管理，及时采取干预治疗措施，降低CA的发生率。

患者自身T细胞经过嵌合抗原受体（CAR）基因修饰后，不再受主要组织相容性复合物限制，因而可实现对肿瘤靶标高效应答。目前CAR-T细胞BLZ945分子量治疗已在部分血液系统恶性肿瘤中显示出了较好的RP56976疗效，但在实体瘤中的疗效却差强人意，其主要原因包括实体瘤缺乏特异性强的抗原靶标、经过基因工程改造后的T细胞归巢能力不确定以及抑制性肿瘤免immune phenotype疫微环境。临床试验中，研究较多的实体瘤CAR-T细胞治疗靶点有双唾液酸神经节苷脂（GD2）、紧密连接蛋白18亚型2(CLDN18.2)、间皮素、B7同源性3(B7H3)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖（GPC）3、表皮生长因子受体变异体（EGFRv）Ⅲ等。CAR-T细胞与溶瘤病毒、酪氨酸激酶抑制剂、程序性死亡蛋白-1单抗等联合治疗可增加其疗效。本文总结了针对CAR-T细胞治疗实体瘤的优化策略，如通过基因编辑增强其活性；添加相应元件的调控使CAR-T细胞的激活更加安全可控；增强CAR-T细胞的持久性等。通过综述CAR-T细胞治疗实体瘤的最新研究进展，以期为实体瘤的临床治疗提供新思路。