akt receptor

目的：探讨虎符铜砭刮痧联合疏肝调神针法治疗帕金森病肌强直的临床疗效。方法：选取帕金森病肌强直患者84例，按随机数字表法分为对照组和观察组各42例，对照组口服多巴丝HIF抑制剂肼片，剂LY2835219量随病情变化进行调整；观察组在对照组基础上加用虎符铜砭刮痧和疏肝调神针法治疗，治疗时长12周。分别在治疗前、治疗6周、治疗12周进行统一帕金森评定量表（UPDRSⅢ）评分、UPDRS肌强直评分、肌张力评分、中医颤病功能障碍和中医生存质量量表评分，评价临床疗效。结果：(1)两组治疗后UPDRSⅢ、UPDRS肌强直、肌张力、中医颤证功能障碍、中医生存质量量表评分较治疗前均有改善（P<0.05）。组间比较，观察组各项指标评分均明显优于对照组（P<0.pathology competencies01）。治疗12周与治疗6周的结果比较：对照组肌强直、肌张力评分差异无统计学意义（P>0.05）,UPDRSⅢ、中医颤病功能障碍、中医生存质量量表评分差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）；观察组各项指标与对照组比较，差异均有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。(2)观察组患者总有效率为87.80%，对照组为59.52%，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：虎符铜砭刮痧联合疏肝调神针法治疗帕金森病肌强直临床疗效显著，改善患者生存质量，协同作用明显。

细菌是地球上最古老且数量庞大的生物群体,细菌容易黏附在各种材料表面形成难以清除的生物膜严重危害人类健康和经济发展。近年来,钛基材料因其优异的物理化学性质,被广泛的应用于飞机、船舶、生物医疗等高精尖行业。然而黏附在各种钛基材料表面的细菌,通过自身的生命活动会导致金属腐蚀、饮用水变质、食源性疾病、手术感染等问题,严重的危害着人类的生命健康,并且造成极大的经济损失。因此,钛基材料表面的抗细菌黏附备受关注。研究发现,通过在钛基材料上构筑一层超疏水TiO_2表面,赋予材料主动抗菌性和防御性抗细菌黏附性,被证实是有效的抗细菌黏附策略。然而,其也存在限制如下:(i)TiO_2较宽的禁带宽度,只能被紫外光激发,其只能在紫外光照下发挥高效抗菌性能,而太阳光照下催化杀菌效率低下;(ii)存在于超疏水表面的空气层具有缓释效应,会阻碍抗菌剂释放,导致抗菌性能受限。因此,本研究提出一种增强TiO_2太阳光光催化抗菌活性的策略,实现释放活性氧(ROS)与Ag~+协同增效抗菌,并且成功构筑一种超疏水/超亲水可转化的抗菌抗黏附智能复合表面。通过紫外光照的开关实现材料表面超疏水/超亲水的可逆切换,对两种超润湿状态下复合表面的抗菌性能和抗细菌黏附性能进行测试和分析,并且进一步探究两种润湿状态下复合表面抗菌和抗细菌黏附性之间的差异和关联,揭示复合表面抗菌和抗细菌黏附性的内在机制。主要研究内容如下:(1)抗菌抗黏附智能复合表面的构建:以钛板为基底,通过阳极氧化法构筑TiO_2纳米管阵列(TNTs)表面。通过连续离子吸附反应法(SILAR)在TNTs表面沉积AgCl纳米粒子(NPs),再通过光还原法将部分AgCl还原成Ag NPs,得到Ag/AgCl NPs。然后利用十七氟癸基三甲氧基硅氧烷(PFDTMS)对复合表面进行疏水改性,构筑一系列超疏水的Ag/AgCl/TiO_2抗菌抗黏附复合表面。利用TiO_2光致亲水的D-Lin-MC3-DMA研究购买特性,通过紫外光照和暗储实现复合表面的超疏水/超亲水可逆转换。(2)复合表面抗菌性能测试及其机制的探究:抗菌测试结果表明,复合表面的抗菌性随着Ag/AgCl NPs负载量的增加而增强,且仅负载3.66μg cm~(-2)的Ag/AgCl NPs可使复合表面对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抗菌率分别达到98.65%和99.15%。其抗菌机制的研究表明,太阳光照下,复合表面释放ROS和Ag~+的协同抗菌作用是复合表面高效抗菌的内在机制。(3)表面润湿性对复合表面抗菌性能的影响以及内在机制探究:抗菌测试结果证实,同一系列样品,超亲水状态下复合表面的抗菌性能优于超疏水状态。通过测算两种润湿状态下复合表面释放Ag~+的速度,再结合分子动力学(MD)模拟揭示了超疏水表面的排斥效应是延缓Ag~+放,进而造成两种润湿状态下复合表面的抗菌性能存在差异的内在原因。(4)复合表面的抗细菌黏附性能测试及其机制的探究:测试结果表明,超疏水状态下,复合表面形成一层肉眼FRET biosensor可见的空气层,能有效的阻隔细菌。此外,复合表面具有超疏水、疏油性,并且表面黏附力极低,导致细菌难以黏附在表面。在主动杀菌机制的协同作用下对大肠杆菌和金葡的抗细菌黏附率达到99.47%和98.50%。超亲水状态下,表面的亲水基团能够快速诱导水分子,形成的水化层屏障,能够起到阻隔细菌的作用。Panobinostat配制同样在主动杀菌机制的协同作用下,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗细菌黏附率也分别达到97.86%和90.42%。(5)复合表面的耐久性研究:通过耐磨擦测试和耐酸(p H=1)、碱(p H=14)和盐(Na Cl:1mol L~(-1))测试对复合表面的机械耐磨擦性和耐化学腐蚀性进行研究。上述测试前后复合表面的接触角(WCA)变化范围均在143°～158°,表明在测试前后复合表面依然维持良好的疏水性。除此之外,循环抗菌测试结果表明,经过14次的循环后,复合表面的抗菌率仍然能达到74%以上;循环抗细菌黏附测试结果表明,经过12次的循环后,复合表面的抗细菌黏附率仍然能达到78%以上。

目的：分析重症肌无力患者给予糖皮质激素联合硫唑嘌呤或环孢素A治疗的效果。方法：选取2020年7月至2022年5月安阳市第三人民医院收治的80例重症肌无力患者，根据随Lapatinib机数表法分为对照组和观察组，各40例。两组均采用糖皮质激素治疗，同时对照组另予以硫唑嘌呤治疗，观察组另予以环孢素A治疗。比较两组患者肌肉功能、临床症状评分、免疫功能指标、临床疗效、不良反应发生情况。结果：治疗3个月后，两组患者重症肌无力定量评分（QMGS）Hospital acquired infection、重症肌无力复合量表（MGC）评分低于治疗前，肌无力肌肉量表（MMS）评分高于治疗前，且观察组患者各项肌肉功能评分均优于对照组，差异具有统计学意义（P <0.05）。治疗3个月后，两组患者临床症状评分低于治疗前，且观察组低于对照组，差异具有统计学意义（P <0.05）。治疗3个月后，两组患者白细胞介素（IL）–JAK抑制剂6、乙酰胆碱受体抗体（AchR–Ab）、免疫球蛋白（Ig）E水平低于治疗前，且观察组低于对照组，差异具有统计学意义（P <0.05）。两组患者临床总有效率比较，差异无统计学意义（P> 0.05）。两组患者不良反应发生率比较，差异无统计学意义（P> 0.05）。结论：无论采取糖皮质激素联合硫唑嘌呤治疗，还是糖皮质激素联合环孢素A治疗，均具有良好的治疗效果和安全性，但相对比而言，糖皮质激素联合环孢素A治疗更能有效恢复肌肉功能，缓解临床症状，调节免疫功能。

疥螨病是一种分布广泛的体外寄生虫病,其地理分布和寄生的宿主种类数量均呈持续增长趋势,该病影响经济动物生长发育,严重时会导致动物死亡。同时,疥螨病也是重要的人兽共患寄生虫病,并于2017年被列入易被忽视的热带病名单,每年全球约有3亿人受到疥螨病的影响。精氨酸激酶参与寄生虫-宿主相互作用,引起宿主免疫应答,被认为是促炎细胞因子的免疫调节器和效应器。目前,疥螨致病机制尚不完全明确,疥螨精氨酸激酶在疥螨—宿主相互作用中的功能尚缺乏研究。本研究对疥螨精氨酸激酶家族中两个不同的精氨酸激酶进行了生物信息学分析和原核表达;分析了其反应原性、酶活性以及在疥螨虫体和宿主皮肤中的定位;使用4个不同浓度梯度的两个重组蛋白分别刺激宿主的外周血单个核细胞(PBMCs),观察重组蛋白对细胞增殖、凋亡、迁移的影响,并检测凋亡相关因子和NF-κB的m RNA转录水平以及Th1/Th2、Treg/Th17相关细胞因子的分泌水平。主要的研究结果如下:一、疥螨精氨酸激酶Ss AK-1、Ss AK-2原核表达及蛋白特性分析成功克隆获得Ss AK-1、Ss AK-2基因,其均具有典型的ADP结合位点、精氨酸结合位点及底物特异性环;通过原核表达成功获得r Ss AK-1、r Ss AK-2,免疫印迹和酶活性测定发现r Ss AKselleckchem Cobimetinib-1、r Sselleck PD0325901s AK-2均具有良好的反应原性和一定的催化活性;免疫荧光定位结果表明,Ss AK-1广泛分布于疥螨全身,尤其是胃部和外骨骼区域,Ss AK-2广泛分布于疥螨口器、胃部和外骨骼区域,天然Ss AK-1蛋白和Ss AK-2蛋白均能被分泌或排泄至疥螨寄生部位周围的水池(寄生于皮肤上的疥螨在其身体周围分泌的透明液体)和皮肤表皮层中,可能参与到宿主-疥螨相互作用中,调节宿主免疫功能。二、疥螨精氨酸激酶r Ss AK-1、r Ss AK-2对宿主PBMCs增殖、凋亡、迁移的影响本研究对健康新西兰大白兔进行耳缘静脉采血以分离PBMCs,分别使用10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml的r Ss AK-1和r Ss AK-2刺激细胞,使用CCK-8法检测r Ss AK-1和r Ss AK-2对细胞增殖的影响,利用流式细胞术和q RT-PCR检测重组蛋白对细胞凋亡以及凋亡因子(Fas、Bax、Bcl-2、Bcl-xl)和NF-κB(p65)m RNA转录水平的影响,使用Traswell小室检测r Ss AK-1和r Ss AK-2对细胞迁移的影响。结果显示,r Ss AK-1、r Ss AK-2显Burn wound infection著促进PBMCs增殖、抑制细胞凋亡、诱导细胞迁移,并呈浓度依赖性。其中,r Ss AK-1促增殖和凋亡的效果比r Ss AK-2更明显,而r Ss AK-2促迁移的效果比r Ss AK-1更明显。r Ss AK-1、r Ss AK-2均提高抗凋亡因子(Bcl-2、Bcl-xl)及NF-κB(P65)的转录水平,并呈浓度依赖性。三、疥螨精氨酸激酶r Ss AK-1、r Ss AK-2对宿主PBMCs Th1/Th2、Treg/Th17平衡的影响本研究分别使用10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml的r Ss AK-1和r Ss AK-2刺激细胞,采用ELISA检测PBMCs中Th1细胞因子(IL-2、IFN-γ)、Th2细胞因子(IL-4)、Treg细胞因子(IL-10、TGF-β1)和Th17细胞因子(IL-17)分泌的变化。结果显示,随着r Ss AK-1、r Ss AK-2浓度升高,Th1型细胞因子(IL-2、IFN-γ)分泌减少,Th2型细胞因子(IL-4)分泌增多,IL-10分泌减少,IL-17分泌增加,这表明Th1/Th2平衡向Th2方向移动,改变Th17/Treg平衡。

背景:幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染是人类最常见的细菌感染之一,据统计,全球约一半的人口感染Hp。Hp是一种革兰阴性微需氧菌,这种细菌通过改变环境,降低酸度而专门寄生于人类胃中。Hp感染不但可以导致慢性活胃炎、胃十二指肠溃疡、腺癌等胃良恶性疾病,而且还可引起胃以外的众多疾病。另外,Hp感染与胃食管反流、功能性消化不良、胃排空障碍等功能性胃肠病相关性的研究亦不断报道。Hp感染对胃排空功能影响的研究争论己久,但仍未得到确切结论。Hp感染对胃排空功能的影响及相关机制的研究,对于Hp感染患者手术后发生胃排空延迟(delayed gastric emptying,DGE)的预测及治疗,以及Hp相关胃肠动力障碍性疾病的研究均具有重要意义。既往的研究多为临床实验,仅阐明了Hp感染对胃排空功能的影响,对其相关机制研究甚少。且临床实验影响因素复杂,研究对象存在不可预知的个体差异,因此动物实验是更为理想的选择。胰十二指肠切除术(Pancreatoduodenectomy,PD)是肝胆外科用于治疗胰头及壶腹周围良恶性疾病的重要手术方式。DGE是PD术后最常见的并发症之一。PD术后DGE的危险因素除了术后胰瘘、腹腔内感染等相关因素外,Hp感染是否为DGE的新的危险因素呢?胃肠的正常运动功能有赖于胃肠激素、内源性和外源性肠神经系统、卡哈尔间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)以及胃肠平滑肌之间的相互协调作用。当胃肠激素水平的改变、内源性或外源性肠神经系统的病变,卡哈尔间质细胞的数量或功能的改变,以及胃肠平滑肌疾病均可导致胃排空障碍。ICCs被认为是胃肠道运动的起搏器,在胃肠道运动中发挥重要的作用。而平滑肌被认为是胃肠道运动的最终效应器。因此,本课题中我们构建了 Hp感染的小鼠模型,明确了 Hp感染对胃排空功能的影响,并从胃肠道ICCs和胃肠平滑肌这两方面探究Hp感染影响胃排空功能的相关机制,同时通过对胰十二指肠切除术患者的临床病例进行分析研究,探索本课题在临床工作中的意义。第一部分:Hp感染对胃排空功能的影响研究目的:明确Hp感染对胃排空功能的影响。研究方法:1.微需氧环境下培养Hp悉尼株(HpSS1)。2.购买70只SPF级雌性C57BL/6小鼠。随机选取40只小鼠,通过灌胃的方法建立Hp感染的小鼠模型,建模成功的小鼠作为实验组(Hp+组)。另外30只小鼠作为对照组(Hp-组)。3.6w后,用灌胃针将40粒直径0.4mm胶珠送入小鼠胃中,1小时后处死小鼠,留取胃组织,清点胃内胶珠数目,计算胃排空率:胃排空(%)=(40-胃内胶珠数)/40×100。4.建模成功的鉴定方法:1.胃粘膜快速尿素酶实验2.胃粘膜细菌培养行生化实验鉴定(尿素酶试验、触酶试验、氧化酶试验)3.胃组织免疫组化(抗Hp抗体)5.在建模成功且灌胃针内没有胶珠的小鼠中随机选取12只作为实验组(HP+组),另外30只小鼠灌胃针内没有胶珠的小鼠中随机选取12只作为对照组(HP-组),用于计算胃排空及后续实验。研究结果:1.用于建模的40小鼠,有2只在第1次灌注幽门螺杆菌时死亡,余小鼠均存活至实验结束,有35只小鼠建模成功,建模成功率约为92%。另外30只对照组小鼠均存活至实验结束。2.Hp+组小鼠胃排空率为65.8±5.6%,Hp-组小鼠胃排空率为83.8±6.4%。Hp+组小鼠的胃排空率低于Hp-组,差异具有统计学意义(p<0.05)。研究结论:通过灌胃的方法建立Hp感染的小鼠模型方法可行。Hp感染影响胃排空功能,使胃排空减慢。第二部分:Hp感染通过减少ICCs引起DGE的机制研究目的:Hp感染通过减少ICCs引起DGE的机制。研究方法:1.通过HE染色观察两组小鼠胃粘膜炎症情况。2.应用qPCR检测两组小鼠胃组织中miR-222的表达水平。3.应用免疫组化分别测定两组小鼠胃组织中平滑肌层和粘膜下层的ICCs的数目。4.应用western blot测定两组小鼠胃组织中干细胞因子(stem cell factor,SCF)的蛋白表达情况,并与内参GAPDH做标准化对比。研究结果:1.两组小鼠胃粘膜未见明显差异。2.两组小鼠胃组织中miR-222的表达具有显著差异。与Hp-组小鼠相比,Hp+组小鼠胃组织中miR-222的表达显著上调,差异具有统计学意义(P<0.05)3.Hp感染后,小鼠胃组织平滑肌层及粘膜下层ICCs数目均明显减少。Hp+组和Hp-组小鼠胃组织平滑肌层ICCs数目分别为3.32±1.60 vs 5.52±2.17(P<0.05)。Hp+组和Hp-组小鼠胃组织粘膜下层ICCs数目分别为6.29±2.46 vs 14.00±5.18(P<0.05)。4.Hp+组小鼠胃组织SCF/GAPDH 比值为0.52±0.19,Hp-组小鼠胃组织SCF/GAPDH比值为0.69±0.19。Hp+组小鼠胃组织SCF的表达水平显著低于HP-组小鼠(P<0.05)。研究结论:Hp除了通过上调小鼠胃组织中miR-222导致胃组织中ICCs数目减少外,还可通过使小鼠胃组织中SCF蛋白表达下降导致胃组织中ICCs数目减少,从而引起 DGE。第三部分:Hp感染通过影响胃平滑肌引起DGE的机制研究目的:Hp感染通过影响胃平滑肌引起DGE的机制。研究方法:1.随机抽取Hp+组和Hp-组小鼠胃组织标本各4例,应用蛋白组学筛选出差异表达的蛋白。应用microRNA(miRNA)芯片筛选出差异表达的miRNA,在差异表达的蛋白中查找与胃排空功能相关蛋白的基因作为靶基因,应用靶基因预测软件(Targetscan)在差异表达的miRNA中筛选出与靶基因具有负调控关系的miRNA作为目标miRNA。2.应用qPCR检测两组小鼠胃组织中目标miRNA及靶基因mRNA的CH-223191纯度表达水平。应用Western blot检测两组小鼠胃组织中靶基因的蛋白表达水平。3.应用荧光素酶报告基因检测验证目标miRNA对靶基因具有直接调控关系。4.应用Western blot检测两组小鼠胃组织中靶基因表达蛋白下游因子的蛋白表达水平。研究结果:1.通过蛋白组学及miRNA芯片的检测,应用靶基因预测软件(Targetscan)筛选出与胃排空功能相关的蛋白,其基因即靶基因为肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK/MYLK),调控 MLCK 的 miRNA 有 miR-1894-3p,miR-24-3p,miR-365-3p,miR-7018-5p。2.两组小鼠胃组织中miR-1894-3p,miR-365-3p的表达均无显著差异(P>0.05)。而两组小鼠胃组织中miR-24-3p,miR-7018-5p的表达具有显著差异。与Hp-组小鼠相比,Hp+组小鼠胃组织中miR-24-3p,miR-7018-5p的表达显著上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组小鼠胃组织中MLCK mRNA水平无显著差异(P>0.05)。而两组小鼠胃组织MLCK蛋白水平有显著差异。与Hp-组小鼠相比,Hp+组小鼠胃组织中MLCK的表达显著下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.双荧光素酶报告基因检测显示:miR-7018-5p与MLCK不具有直接调控关系,而miR-24-3p与MLCK具有直接调控关系。4.两组小鼠胃组织中肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化水平具有显著差异。与Hpinsect microbiota-组小鼠相比,Hp+组小鼠胃组织中MLC20磷酸化水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。研究结论:Hp感染通过上调小鼠胃组织中miR-24-3p,致MLCK蛋白表达下调,MLC20磷酸化水平降低,使胃排空减慢。第四部分:Hp感染对PD术后胃排空功能影响的临床病例分析研究目的:1.Hp感染是否为PD术后DGE的危险因素。2.Hp感染影响胃排空功能相关机制的临床病例验证。研究方法:1.收集134例PD患者的临床病理资料,分为非DGE组和DGE组。应用胃组织免疫组化确定患者幽门螺杆菌的感染情况,分析非DGE组和DGE组患者的临床病理特征。2.采用Logistic回归分析影响PD术后发生DGE的危险因素。3.随机选取Hp+组及Hp-组患者胃组织石蜡标本各12例,应用qPCR检测两组患者胃组织中miR-222及miR-24-3p的表达水平。应用免疫组化测定两组患者胃组织中平滑肌层和粘膜下层的ICCs的数目以及MLCK蛋白的表达。研究结果:1.本研究134例PD患者中,34例(约25%)术后发生DGE。DGE组患者临床资料与非DGE组患者比较发现,两组在基线资料如年龄、性别等方面差异无统计学意义。但DGE组患者Hp感染及腹腔感染比例明显增高。2.单因素分析结果显示,Hp感染及腹腔感染是PD术后发生DGE的潜在危险因素。将上述因素纳入多因素分析结果显示,除腹腔感染这一手术相关因素外,Hp感染亦是PD术后发生DGE的独立危险因素。3.Hp+组与Hp-组患者胃组织中miR-222,miR-24-3p的表达具有显著差异。与Hp-组相比,Hp+组患者胃组织中miR-222,miR-24-3p的表达显著上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。与Hp-组相比,Hp+组患者胃组织平滑肌层及粘膜下层ICCs数目均明显减少。Hp+组和Hp-组患者胃组织平滑肌层ICCs数目分别为 33.3±14.5 vs 55.0±16.4(P<0.05)。Hp+组和 Hp-组患者胃组织粘膜下层 ICCs数目分别为20.9±10.0 vs 30.2±9.2(P<0.05)。与Hp-组相比,Hp+组患者胃组织MLCK的表达明显减少。Hp+组和Hp-组患者胃组织MLCK免疫组化染色评分分别为5.1±1.9 vs 8.9±1.7(P<0.05)研究结论:Hp感染是PD术后发生DGE的独立危险因素。与动物实验一致,Hp可通过上调miR-222导致胃组织中ICCs减少,从而增加了 PD术后DGE的发生风险。另外,Regorafenib IC50Hp可通过上调miR-24-3p致胃组织中MLCK表达下调,从而增加了 PD术后DGE的发生风险。

目的:无花果是一种具有丰富食用和药用价值的古老植物。通过理论研究总结中医对结直肠癌的认识,了解无花果的古今应用。通过实验研究观察无花果主要抗肿瘤成分之一补骨脂素的抗结肠癌作用及其作用机制。最后,基于肿瘤类器官培养技术探讨补骨脂素对肿瘤生长的影响。方法:1.理论研究:通过查阅古籍和现代文献,总结传统中医和现代中医对结直肠癌的认识,如病因病机和辨证治疗等;并对无花果(如无花果果实、叶和乳胶等)的古今应用进行了汇总,特别是无花果的有效成分及其药理作用。2.实验研究:(1)选取HCT116和HT29结肠癌细胞系。使用DMSO配制补骨脂素母液。(2)使用不同浓度补骨脂素(5μM、10μM、20μM、40μM、80μM)作用于结肠癌HCT116和HT29细胞24h、48h、72h。CCK-8法检测补骨脂素对结肠癌细胞存活率的影响。基于CCK-8实验结果,选择合适SARS-CoV-2 infection的浓度进行后续实验。(3)使用不同浓度补骨脂素(10μM、20μM、40μM)作用于结肠癌HCT116和HT29细胞24h,通过平板细胞克隆形成实验和Ed U实验观察补骨脂素对结肠癌细胞增殖的影响。(4)使用不同浓度补骨脂素(10μM、20μM、40μM)作用于结肠癌HCT116和HT29细胞24h,通过划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验检测补骨脂素对结肠癌细胞迁移和侵袭能力的影响。(5)使用不同浓度补骨脂素(10μM、20μM、40μM)处理结肠癌HCT116和HT29细胞24h,流式细胞术检测补骨脂素对结肠癌细胞凋亡和线粒体膜电位的影响。(6)结肠癌HCT116和HT29细胞经过不同浓度补骨脂素(10μM、20μM、40μM)处理24h。通过蛋白印迹实验检测补骨脂素对结肠癌细胞侵袭迁移(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP2、MMP9)和凋亡(Bcl-2、Bax、PARP、Caspase-3、cleaved Caspase-3、Caspase-9、cleaved Caspase-9)等蛋白表达的影响。(7)使用Swiss Target Prediction网站得到补骨脂素直接作用的靶蛋白,使用TCGA-COAD数据进行GSEA信号通路富集,分析得到补骨脂素在结直肠癌中可以靶向作用的信号通路。从中选取TNF-α/NF-κB信号通路进行下一步的机制研究。(8)将不同浓度补骨脂素(10μM、20μM、40μM)作用于结肠癌HCT116和HT29细胞24h,通过蛋白印迹实验检测TNF-α/NF-κB信号通路关键蛋白TNF-α、P65和p-P65的表达。(9)基于课题组前期工作,选用实验室稳定建系的肿瘤类器官作为实验模型。将不同浓度补骨脂素(80μM、160μM、320μM)作用于多种患者来源肿瘤类器官,进行药物敏感性实验,计算肿瘤类器官生长抑制率。结果:1.理论研究:(1)传统中医学中没有结直肠癌这一具体病名,根据症状大概属于“肠积”、“积聚”、“肠覃”、“肠癖”、“肠结”、“肠游”、“肠风”、“下痢”、“下血”、“锁肛痨”及“脏毒”等病的范畴。在病因病机和辨证论治上,传统中医和现代中医持有相似的观点,大都认为由于正气亏虚,外感寒邪,损伤脾胃运化功能,蕴湿化热,湿热之邪下注大肠,气血运行不畅,湿热瘀阻日久而形成顽固瘤体。证型上大概可以分为湿热蕴肠、瘀毒内结、气血亏虚、脾肾两亏及肝肾亏虚五个证型。治疗上,早期多邪实以祛邪为主,后期多虚证或虚实夹杂,因此以扶正为主。(2)无花果是一种历史悠久的传统桑科植物,传统医学中认为它甘、平、无毒,可以用来治疗消渴、咳嗽、哮喘、痔疮等疾病。现代研究表明无花果的果肉、果皮、整果、叶和根等部位含有多种生物活性成分,如黄酮类、有机酸、酚类、酶类、氨基酸、脂肪酸、可溶性纤维和微量元素等,具有抗炎、抗氧化、调节免疫、抗肿瘤、促消化、抗微生物和寄生虫等作用,是一种安全的、极具食用和药用价值的食物。无花果提取物对恶性肿瘤增殖、侵袭迁移和凋亡等均具有抑制作用,但关于无花果生物活性成分抗肿瘤机制研究的少之又少,未来应着重于对无花果生物活性成分抗肿瘤机制的研究。2.实验研究:(1)不同浓度补骨脂素(5μM、10μM、2selleck0μM、40μM、80μM)作用于结肠癌HCT116和HT29细胞,实验结果表明补骨脂素呈浓度依赖性方式抑制结肠癌细胞的存活(P<0.05),处理24h的IC50值分别为60.3μM、31.8μM、21.3μM和52.4μM、32.2μM、23.4μM。因此,后续实验采用10μM、20μM、40μM浓度梯度。(2)平板细胞克隆形成实验和Ed U实验结果表明补骨脂素显著抑制结肠癌HCT116和HT29细胞的克隆形成能力和DNA复制能力(P<0.05)。(3)划痕实验和Transwell实验结果表明随着浓度的升高,补骨脂素显著抑制结肠癌HCT116和HT29细胞的迁移(P<0.01)和侵袭能力(P<0.0001)。(4)流式细胞术结果显示补骨脂素可以诱导结肠癌HCT116和HT29细胞凋亡(P<0.05),当补骨脂素浓度为20μM、40μM时可显著降低线粒体膜电位(P<0.05)。(5)蛋白印迹实验结果显示补骨脂素显著抑制结肠癌HCT116和HT29细胞N-cadherin、Vimentin、MMP2和MMP9的表达,增强E-cadherin的表达,P<0.05。此外,补骨脂素还显著抑制Bcl-2抗凋亡蛋白的表达,增强Bax、PARP、cleaved Caspase-3和cleaved Caspase-9凋亡蛋白的表达,P<0.05。(6)网络药理学结果显示补骨脂素抗结直肠癌的作用与多个信Pexidartinib体内号通路有关,如炎症反应、干扰素γ反应、低氧、上皮-间质转化、P53、TNF-α/NF-κB等信号通路。(7)根据网络药理学分析结果,选取TNF-α/NF-κB信号通路作为下一步的机制研究。蛋白印迹实验结果表明补骨脂素显著抑制结肠癌HCT116和HT29细胞TNF-α和p-P65的表达(P<0.05),这表明补骨脂素可以通过抑制TNF-α/NF-κB信号通路来达到抗肿瘤作用。(8)补骨脂素对237#直肠癌、244#乙状结肠癌、325#胃癌、346#胃癌、386#肺癌、407#升结肠癌、413#胆管癌、421#乳腺癌类器官的生长具有不同程度的抑制作用。320μM浓度时肿瘤类器官生长抑制率分别为:98.2%、-81.5%、55.0%、-19.7%、-3.4%、19.7%、-197.5%、-3.0%。237#直肠癌、325#胃癌和407#升结肠癌在该浓度梯度下表现出正向的抑制作用。244#乙状结肠癌、346#胃癌、386#肺癌、413#胆管癌、421#乳腺癌类器官则表现为负向抑制作用。但是根据动态观察来看,随着补骨脂素浓度的升高,类器官生长速度减慢。结论:根据症状结直肠癌大概属于传统中医中“肠积”、“积聚”、“肠覃”、“肠癖”等病的范畴。传统中医和现代中医大都认为结直肠癌是由于正气亏虚,外感寒邪,损伤脾胃运化功能,蕴湿化热,湿热之邪下注大肠,气血运行不畅,湿热瘀阻日久而形成顽固瘤体。可以分为湿热蕴肠、瘀毒内结、气血亏虚、脾肾两亏及肝肾亏虚五个证型。早期多邪实以祛邪为主,后期多虚证或虚实夹杂以扶正为主。传统中医和现代药理学研究均表明无花果是一种极具食用和药用价值的植物。本研究表明无花果主要抗肿瘤成分补骨脂素可以抑制TNF-α/NF-κB信号通路,对结肠癌HCT116和HT29细胞的增殖、侵袭、迁移能力具有抑制作用,并诱导肿瘤细胞凋亡。此外,不同瘤种类器官或同一瘤种不同个体来源的类器官对补骨脂素的药物敏感性不同,这可能是由于患者肿瘤异质性而导致的。在未来的研究中,影响肿瘤类器官对补骨脂素敏感性的因素还需要进一步深入剖析。

本研究旨在探讨植物源性白桦脂醇(BET)与抗阻运动合并应用对高脂饮食(HFD)导致的大鼠认知障碍selleck合成的改善作用及其潜在机制。通过使用HFD饲料建立大鼠认知障碍模型，分为七组实验：正常Hydroxyapatite bioactive matrix对照组(Con组)、HFD组、HFD+RE组、HFD+L-BET组、HFD+M-BET组、HFD+H-BET组和HFD+RE+H-BET组。其中，HFD+RE组及HFD+RE+H-BET组的大鼠进行了抗阻运动，而HFD+L/M/H-BET组则分别给予不同剂量的白桦脂醇处理。经过六周的干预，通过Morris水迷宫系统对大鼠的认知功能进行评估，同时检测海马神经元形态、氧化应激指标、炎症指标及关键蛋白和基因的表达水平。结果显示，HFD+RE+H-BET组相较于HFD+RE组和HFD+H-BET组，有明显的认知功能改善，海马神经元结构恢复、抗氧化指标提高、炎症水SB203580研究购买平降低，以及关键蛋白和基因的表达水平发生改变。这暗示白桦脂醇结合抗阻运动可以有效改善HFD导致的大鼠认知障碍，其作用机制可能与调节Nrf2介导的氧化应激反应、NF-κB介导的炎症反应和脂代谢基因的表达有关。

本研究旨在探讨白术多糖（PAMK）对环磷酰胺（CTX）诱导的小鼠肾脏损伤的影响及潜在的作用机制。选用100只42-43日龄雄性C57BL/6小鼠随机分为四组，白术多糖（PAMK）组和白术多糖+环磷酰胺（PAMK+CTX）组灌胃200 mg/kg PAMK，1次/天；对照（Control）组和环磷酰胺（CTX）组给予等量的生理盐水。实验第25-27天，CTX组和PAMK+CGNE-140 NMRTX组腹腔注射1Genetic reassortment00 mg/kg CTX，1次/天；Control组和PAMK组注射等量生理盐水。实验第35天采集肾脏进行组织学观察，氧化应激检测和转录组测序。结果显示：与CTX组相比，PAMK+CTX组肾脏损伤有所缓解；肾脏中丙二醛量显著下降（P<0.05）、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性和总抗氧化能力显著升高（P<0.05）。为了进一步探究PAMK缓解CTX诱导肾损伤的调控机制，本实验进行了肾脏转录组测序。结果显示，在Control组vs CTX组和CTX组vs PAMK+CTX组分别鉴定到493个和333个差异表达基因（DEGs）。两组DEGs功能富集分析结果发现DEGs显著富集在花生四烯酸代谢等信号通路。花生四烯酸通路相关基因检测结果显示：与Control组相比，CTX组Cyp2b9 、PTGS1、NF-κB和Mfsd2a mRNA表达量显著升高（P<0.05）；与CTX组相比，PAMK+CTX组Cyp2c65 、BCL6 mRNA表达量显著升高（P<0.05），Cyp2b9 、PTGS1 和Mfsd2a m购买AZD1152-HQPARNA表达量显著降低（P<0.05）。综上所述，PAMK可能通过花生四烯酸代谢通路缓解小鼠肾脏氧化应激，从而降低CTX诱导的小鼠肾脏损伤。

目的：利用泛癌分析法初步探讨WASH2P、WASH3P、WASH4P、WASH6P、WASH7P、WASH8P、WASH9P在33种癌症中的意义。方法：从TCGA数据库下载33种癌症的转录组数据，利用Perl软件提取WASH2P、WASH3P、WASH4P、WASH6P、WASH7P、WASH8P、WASH9P在33种癌症中的表达水平。采用R软件的limma包鉴定部分肿瘤类型（癌旁样本≥5）中的差异基因，结合TCGA的临床信息，利用Kaplan-Meier和Cox分析WASH亚型的临床预后意义。通过ESTIMATE包探讨WASH与肿瘤免疫浸润微环境的相关性，结合TCGA数据，分析WASH亚型与干细胞指数、免疫亚型间的相关性Immune enhancement。最后，分析WASH亚型与单个肿瘤的免疫亚型、干细胞指数、临床分期及肿瘤免疫浸润微环境间的关系。结果：WASH3P和WASH8P在33种癌症类型中总体表达水平相对其他亚型呈高表达。WASH基因亚型在大部分肿瘤中（癌旁样本≥5）显Stem Cells & Wnt抑制剂著差异表达，共同协作影响肿瘤进展。生存分析显示其与多种癌症的预后相关（P<0.05）。在大部分肿瘤中，WASH基因亚型与肿瘤干细胞指数呈正相关。WASH基因亚型在C6免疫亚型中低表达，在C1～C4中等水平表达，在C5中高表达。WASH基因亚型表达水平越高，免疫成分、基质成分越少。单肿瘤分析结果显示，在部分单个肿瘤中，WASH基因亚型与TNM分期、免疫亚型、肿瘤微环境、干细胞指数存在相关性。selleckchem PS-341结论：WASH在肿瘤发生发展中扮演重要角色，有望成为多种类型癌症的临床评估标志物。

目的 为了提高深度模型对电子显微镜图像中肾小球超微结构的分割性能，提出了一种基于超微结构语义相似性的区域级自监督对比学习方法USRegCon。方法 USRegCon使用大量无标记数据对模型进行预训练，该预训练过程包括3个步骤：（1）模型对图像中超微结构信息进行编码和解码，并根据超微结构的语Sports biomechanics义相似性自适应地将图像划分为多个区域；（2）依据所划分的区域，使用区域池化操作提取出每个区域的一阶灰度区域表示和深度语义区域表示；（3）对于一阶灰度区域表示，构建了灰度损失函数，目标为最小化区域内的灰度差异和最大化区域间的灰度差异。对于深度语义区域表示，构建了语义损失函数，目标为最大化表示空间中正区域对的相似性和负区域对的差异性。这两个损失函数www.selleck.cn/products/cb-839将联合对PCI-32765纯度模型进行预训练。结果 基于私有数据集GlomEM,USRegCon在肾小球滤过屏障三层超微结构的分割任务中，对基底膜、内皮细胞和足细胞均获得了良好的分割结果，Dice系数分别为85.69±0.13%、74.59±0.13%和78.57±0.16%。该结果优于现有的多种图像级、像素级和区域级自监督对比学习方法，并逼近基于大规模标记数据集ImageNet的全监督预训练方法。结论 USRegCon促进模型从大量无标记数据中学习有益的区域表示，弥补了标记数据不足的缺陷，提升了模型对肾小球超微结构的识别和边缘分割能力。