akt receptor

[目的]育种是利此网站用不同基因、不同等位基因的组合培育优良新品种的技术。在分子育种过程中，明确供体材料及被改良材料含有的不同功能单倍型基因是背景筛查重要内容。分析中国高粱主产区推广品种已经利用的不同单倍型功能基因对未来分子育种中基因的选择有重要的参考价值。[方法]本研究通过对中国高粱主产区推广的部分高粱品种进行已知重要农艺性状控制基因，包括株高、开花时间、糯性、单宁含量、耐铝毒、籽粒易消化等相关重要基因PEG300作用的等位基因分析，通过重要的功能位点分型，揭示出不同高粱主产区推广品种携带的不同性状控制基因，分析不同基因利用情况，为下一步的分子育种提供有利的等位基因。[结果]中国高粱主产区的22份推广品种中，糯高粱大多携带糯性控制基因wxa,wxc等位基因是西南地方酿酒优质糯高粱青壳洋和红缨子所利用的基因；开花期调控基因Ma1和Ma6的突变型利用较为广泛，所有品种都不携带Ma2和MaToxicogenic fungal populations3基因的突变型；株高控制基因纯合dw2和dw3突变基因、杂合型DW1/dw1是测试品种中常用基因型；仅龙米粱1号携带纯合tan1-b单宁基因型，部分品种为杂合tan1-b基因型；支链淀粉酶SbPUL基因中，仅龙杂17携带纯合RA型基因，通杂136和赤杂109为杂合型GD/RA，其余品种均为GD型；耐铝毒基因SbMate基本没有被利用。[结论]本研究分析了中国高粱主产区部分推广品种重要农艺性状控制基因携带情况，为将来高粱分子育种中不同等位基因的选择提供了重要参考依据。

燕麦β-葡聚糖(OBG)是一种天然的黏性多糖,主要存在于燕麦颗粒的胚乳层和糊粉层细胞壁中,具有降血压、降血脂、预防心血管疾病等多种健康功效。美国食品和药品监督管理局、联合国健康声明等权威机构和专业协会都发表了OBG的健康声明。OBG不仅具有广泛的消费市场,而且原料来源丰富。对OBG的进一步研究有利于促进其在多领域的应用,提高燕麦的附加值。本课题采用张家口燕麦作为原料提Liproxstatin-1分子量取了燕麦β-葡聚糖、对其进行了结构表征、溶液性质测定、凝胶机理探究和乳液的应用研究。主要研究结果如下:首先提取分离出两种不同相对分子量的OBG,重均相对分子量分别为80.73×10~4g/mol和8.05×10~4g/mol,产率分别为4.86%和3.32%,含量分别为94.21%和90.43%;随后对这两种β-葡聚糖的结构进行了比较分析。单糖组成分析的结果显示,二者的分子结构中均仅存在葡萄糖这一种单糖结构;在经过特异性β-(1,3)-(1,4)-葡聚糖酶水解后,两种不同相对分子量的OBG主要的单体结构均是纤维三糖基(DP3)和纤维四糖基(DP4),且结合核磁共振的结果表明纤维三糖与纤维四糖的比值为1.4,β-(1,4)-糖苷键与β-(1,3)-糖苷键的比值为2.3。红外光谱中,在1021 cm~(-1)附近的强吸收源于OBG中不同单位β-(1,3)-葡萄糖残基和β-(1,4)-葡萄糖残基的糖链中C-O-C键的拉伸振动,在895 cm~(-1)处的吸收峰是有典型β-葡萄糖苷键的吸收峰。与OBG-2相比,OBG-1水解所产生的寡糖中,聚合度大于4的低聚物片段明显较多,且两种相对分子量的OBG均呈现纤维状的结构,但是大相对分子量的OBG-VEGFR抑制剂1的表面比较光滑,结构致密,没有细孔,而小相对分子量的OBG-2表面则呈现比较粗糙,多孔的形貌特性。另外,X-衍射结果显示,OBG-1结构中存在晶体和非晶体结构,而OBG-2则呈现有非晶态的弥散峰。其次,通过比较了两种相对分子量OBG的流变学性质,探究了OBG在水溶液中的构象。在一定的浓度范围内,两种相对分子量的OBG都表现出典型的假塑性流体特性,即剪切变稀现象;表观黏度分析显示,OBG-1的浓度在大于8%、OBG-2的浓度在大于24%之后,随着Biosphere genes pool多糖浓度的提高,两种相对分子量的β-葡聚糖的黏度呈现指数型增长,同时,还可以看出OBG-1在水溶液中表现出更高的黏度特性。采用超声法对OBG-1相对分子量行进均一化处理,通过动态/静态光散射结合黏度测定模拟研究OBG的多糖链在水溶液中的构象;确定马克-霍温克方程和R_g与M_w之间的关系为[η]=0.24Mw ~(0.55)和R_g=48 M_w~(0.76);结合构象参数ρ(1.50-1.61)表明OBG在水溶液中呈线性柔顺链构象,原子力显微镜可以得到OBG的链长为200-300 nm,链宽度在5-15 nm,链的高度为0-4.5 nm。然后,根据流变学性质发现,在一定的条件下,OBG-1和OBG-2均能形成凝胶结构,因此探究了OBG的凝胶机理。OBG-1的凝胶共融点在8%,且从凝胶的表观结构可以看出OBG-1在浓度为12%时形成紧实的凝胶结构。然而,OBG-2的凝胶共融点在24%,在浓度为30%时形成表观紧实的凝胶。OBG-1的浓度为10%,OBG-2的浓度为30%时两者形成的典型的凝胶特征,即储能模量(G’)和损耗模量(G″)比值大于1。此外,DSC的结果表明,OBG-1凝胶的焓值为3.84 J/g,而OBG-2凝胶的焓值为4.98 J/g。通过研究多糖相对分子量、氯化钠、p H值、尿素、硼酸和二甲基亚砜等因素对OBG凝胶质构特性的影响得出OBG凝胶形成过程中氢键和静电相互作用起主要作用的结论。最后,对OBG乳液的制备进行了条件的优化。结果表明当OBG的相对分子量在4.04×10~4g/mo L,多糖浓度为1%,油相为0.5%,水相p H为8.3时,可制备出粒径为418 nm和乳化稳定性为100%的均匀纳米乳液,经过了为期15天的储存,还能够保持良好的稳定性,平均粒径为570 nm,乳化稳定性为97%。

拟南芥(Arab点击此处idopsis thaliana) ATLP-3 (AT1G75030)基因编码蛋白是类甜蛋白家族(Thaumatin-Like Protein SupRepSox体内实验剂量erfamily)成员之一。目前对于类甜蛋白功能的研究主要集中于抗病和环境胁迫响应两方面，而对于蛋白的基础功能解析和调控机理研究较少。本实验通过分析转录组数据发现ATLP-3基因在花器官发育过程中高量表达，通过构建ATLP-3启动子连接GUS的转基因植株，染色并进行石蜡切片分析发现该基因在花药发育的第5期到第10期绒毡层中特异表达，说明该蛋白可能参与调控绒毡层的功能。进一步分析发现花药发育过程中发挥调控功能的转录因子TDF1、AMS和MS188在ATLP-3启动子区均有结合位点，高通量测序结果显示ATLP-3表达量在以上转录因子的突变体中相比于野生型显著下调。进一步实验发现，将ProATLP-3:GUS引入AMS功能缺失的突变体背景中，GUS信号相比于野生型明显下降，说明ATLP-3children with medical complexity的表达受到AMS的正向调控。本实验还获得了ATLP-3基因功能缺失突变体并分析其花粉表型。以上研究结果将为深入探究ATLP-3基因的功能提供依据，为更多类甜蛋白家族成员功能的解析提供参考。

目的:研究白皮杉醇对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,进一步探究白皮杉醇是否通过Nrf-2途径调控心肌细胞铁代谢以及降低胞内游离态亚铁离子水平从而抑制心肌细胞铁死亡,阐明其对心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制。该研究力图从新的视角探讨白皮杉醇抑制心肌细胞铁死亡介导心脏缺血再灌注损伤的保护作用及其分子机制,对临床上防治心肌缺血再灌注损伤提供理论与实验依据。方法:1.取C57B/L6雄性小鼠,分为Sham组、I/R组、I/R+PCT 10(mg/kg)组、I/R+PCT 20(mg/kg)组、I/R+PCT 40(mg/kg)组,白皮杉醇在术前3小时腹腔注射给药。给小鼠腹腔注射1.2%三溴乙醇(0.2 ml/10 g)麻醉,并在气管插管后用动物呼吸机通气。连接Ⅱ导联心电图(ECG),观察心电图ST段变化。在左侧肋骨第四肋间隙钝性分离皮肤及肌肉组织组织,使心脏暴露。结扎左冠状动脉前降支(LAD),0.5小时后解开结扎线,再灌注2小时。假手术组行同样Redox mediator的手术,不结扎LAD。超声心动图检测心功能变化;H&E及普鲁士蓝染色检测心肌组织病理损伤和铁离子水平;透射电镜观察线粒体变化;免疫组化检测Tf R-1及FPN1蛋白表达;蛋白免疫印迹检测Tf R-1、FPN1、GPX4等蛋白的表达。2.细胞随机分为以下实验组:(1)Control、(2)H/R组、(3)H/R+PCT-10μM组、(4)H/R+PCT-20μM组、(5)H/R+PCT-40μM组。为了探索Nrf-2在H/R中的作用及PCT抗心肌缺血再RSL3灌注损伤的作用机制,我们使用Nrf-2抑制剂ML385在下面的实验中进一步考察了PCT介导铁代谢抑制心肌细胞铁死亡的分子机制,具体实验如下:(1)Control、(2)H/R组、(3)H/R+PCT-40μM组、(4)H/R+ML385(1μM)组、(5)H/R+ML385+PCT组。对照组AC16细胞在正常大气条件下(37℃,21%O_2,5%CO_2)在正常培养基中培养。在H/R组中,将AC16细胞培养基替换为Krebs-Ringer碳酸氢盐缓冲液(KRB),置于缺氧培养箱(37°C,1%O_2,5%CO_2)中培养5个小时,后其中KRB缓冲液用普通培养基代替,在常氧条件下再孵育2小时。CCK-8、LDH检测细胞活力和损伤情况;荧光显微镜及流式细胞术检测细胞脂质过氧化产物和ROS水平;免疫荧光检测关键蛋白的表达水平;高分辨透射电镜拍摄非游离态铁晶格及晶格衍射条纹;蛋白免疫印迹检测Nrf-2、Tf R-1、FPN1等蛋白的表达水平。结果:1.与假手术组相比,I/R处理后小鼠心电图ST段显著抬高,小鼠心脏LVEF及LVFS值显著降低,PCT处理组可抑制I/R后小鼠心电图ST段抬高,小鼠心脏LVEF及LVFS值较I/R组升高。小鼠血清LDH、MDA检测结果显示,与Sham组相比,I/R组小鼠血清中LDH及MDA水平显著增加,SOD活性显著降低,与I/R组相比,PCT处理组小鼠血清中LDH释放量显著减少,MDA水平降低,SOD活性显著升高。小鼠心脏组织HE染色结果显示,I/R组小鼠心肌细胞出现空泡和大量炎性细胞浸润,PCT处理组小鼠心肌细胞空泡较少,炎性细胞浸润较轻,提示PCT干预可改善I/R后心肌病理性损伤。普鲁士蓝染色结果显示,PCT能够显著降低I/R后心肌组织中的铁离子。免疫组化结果显示,I/R组小鼠心肌组织中Tf R-1蛋白表达显著升高,FPN1表达显著降低,PCT处理组小鼠心肌组织中Tf R-1表达受抑制,FPN1表达上调。Westren Blot结果显示,I/R组小鼠心脏组织中Nrf-2、HO-1,FPN1表达显著下调,Tf R-1、ACSL4表达升高,PCT处理组小鼠心肌组织中Nrf-2、HO-1,FPN1蛋白表达显著上调,Tf R-1、ACSL4表达下调。2.CCK-8和LDH检测结果显示,PCT可显著增加H/R后AC16心肌细胞的活力,抑制LDH的释放,提示PCT对H/R后的AC16心肌细胞有保护作用。ROS及脂质过氧化产物的荧光拍摄和流式细胞仪检测结果显示,PCT可显著降低AC16细胞H/R后的过氧化产物。Fe~(2+)荧光试剂盒检测结果显示,PCT处理后AC16细胞中游离Fe~(2+)水平显著下降。PCT与Fe~(2+)反应产物吸光度、磁性检测、AM-2282 NMR及晶格衍射条纹结果表明PCT能够将游离Fe~(2+)转化为非游离的Fe_3O_4。免疫荧光结果显示,相对于H/R组,PCT能够上调AC16细胞H/R后Nrf-2和FPN1的表达,下调Tf R-1的表达。Westren Blot结果显示,与H/R组相比,PCT处理组AC16细胞中Nrf-2、FPN1、HO-1表达水平显著上调,Tf R-1、ACSL4的表达水平显著下调。结论:上述研究结果表明,白皮杉醇可通过Nrf-2途径调控心肌细胞铁代谢,并且将游离铁转化为非游离铁,从而减少细胞内游离态铁离子水平,减轻MIRI诱导的心肌细胞铁死亡。

木聚糖酶在造纸、饲料、能源、食品和医药等行业广泛应用，利用基因工程技术快速挖掘适用于工业生产需求的木聚糖酶资源具有重要意义。该文基于生物信息学分析，针对木聚糖酶XynH的C/N端及“Thumb”结构进行分子改造，成功构建突变体X-N、X-C、X-f。各突变体与原酶XynH相比，X-N的最适pH为5.5，其他酶均是在pH 5.0时表现出最高酶活力；各突变体与XynH在pH 4.0～6.Extra-hepatic portal vein obstruction0的残余酶活力均在60%左右，具有良好的耐酸性。X-N的最适温度（60 ℃）与其他酶相比提高了5 ℃；在55 ℃下保温1 h后，X-N和X-f的残余酶活力高于XynH，X-N的耐热性表现更好。各突变体对榉木木聚糖的亲和力较弱，但表现出更高的转化率。该论文利用基因工程手段对木聚糖酶进行分子改造，构建了3PLX-4720体内实验剂量个突变体，均表现出较好的耐酸性，X-N的最适pH略高于原酶，而且在高温下稳定性更好。N端替换改善了木聚糖酶的热稳定性，C端替换可能涉及到催化结构域的一部分，从而导致酶活性的变化。而“Thumb”末端的改造可能使活性位点的裂缝变窄，阻止了底物的进入，导致酶的催Talazoparib研究购买化效率降低。突变体凸显出的与原酶酶学性质的差异，从中展现出的结构与功能的关系，为木聚糖酶的改良和应用提供了一定的思路和策略。

目的:检测久居高海拔地区人群血常规和血生化指标情况，并探讨其与慢性高原病(skin microbiomeCMS)之间的关系，为常驻高原人群健康研究提供参考。方法:选取在2 880～5 400 m海拔生活1个月以上的252例男性受试者为研究对象，对受试者静脉血进行血常规和血生化指标检测，并通过血细胞分析参考区间和临床常用生化检验项目参考区间判断血常规和血生化指标异常情况；应用CMS量表调查CMS患病情况，并比较血常规和血生化指标在CMS患病人群和非患病人群之间的差异；分析血常规及血生化指标与CMS的关系。结果:(1)多项血液指标在常驻高原人群中存在异常，其中红细胞数量、血红蛋白浓度(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均血小板体积以及尿酸(UA)水平高于正常参考值上限的人群分别占比71.0%、75.8%、96.4%、82.1%和72.1%;血小板分布宽度低于正常参考值下限的人群占比76.3%。(2)与非CMS患病人群相比，CMS患病人群的HGB、HCT、总蛋白、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇水平显著增高；(3)与非CMS患病人群相比PF-02341066，CMS患病人群的血小板计量和总胆汁酸水平的异常率显著增高；(4)嗜酸性粒细胞百分比增加(EOS%)、HGB升高和TG增高是CMS患病的主要危险因素；(5)TG的受试者工作特征曲线(ROC曲selleckchem线)预测CMS的ROC曲线下的面积(AUC)为0.710。结论:EOS%、HGB和TG增高是CMS患病的主要危险因素，其中TG水平增高可用于CMS早期预警，值得重点关注。

目的 观察穴位贴敷对哮喘小鼠皮肤及肺组织的瞬时受体电位香草酸亚型1 (transient receptor potential vanilloid subtype1,TRPV1)表达的影响,探讨穴位贴敷治疗哮喘潜在的作用机制,并为“肺主皮毛”理论提供实验依据。方法 将75只BALB/c小鼠分为空白组、模型组、穴位贴敷组、假贴敷组与地塞米松组,采用屋尘螨(dermatophagoides pteronyssinuus,HDM)滴鼻方法制备小鼠哮喘模型,穴位贴敷组小鼠选取双侧“肺俞”“心俞”“膈俞”进行穴位贴敷,假贴敷组小鼠以凡士林代替中药贴敷相同穴位,地塞米松组小鼠给予0.1 m L/10g地塞米松灌胃。14 d后采用EMKA-WBP肺功能检测系统检测各组小鼠气道阻力,天狼星红染色法观察肺组织胶原纤维增生,HE染色法观察肺、皮肤组VEGFR抑制剂织炎性浸润,免疫组化法检测肺、皮肤组织TRPV1的表达情况。结果 与空白组比较,模型组、假贴敷组小鼠气道阻力明显升高,胶原纤维异常增生、肺组织炎性浸润明显,肺组织TRPV1表达明显增加(P<0.05),皮肤组织TR获悉更多PV1表达与空白组比较差异无统计学意义。与模型组比较,穴位贴敷组和地塞米松组小鼠气道阻力降低,胶原纤维异常增生及炎性浸润情况明显改善,肺组织TRPV1表达显著降低(P<0.05);穴位贴敷组小鼠皮肤组织TRPV1表达明显升高(P<0.05);地塞米松组小鼠皮肤组织TRPV1表达与模型组比较差异无统计学意义Flexible biosensor。结论 穴位贴敷治疗哮喘的机制与其通过刺激局部皮肤中TRPV1的表达来影响哮喘的进程有关,TRPV1可能为“肺主皮毛”理论的物质基础之一。

目的 开发候选的呼吸道合胞病毒融合蛋白(Respiratory syncytial virus MK-2206溶解度fusion protein, RSV-F)信使核糖核酸(Messenger ribonucleic acid,Co-infection risk assessment mRNA)疫苗，初步评价在小鼠中的细胞和体液免疫应答。方法 选择4个编码RSV A2毒株全长F蛋白的基因序列，在体外设计RSV_(A2)-F突变体(WT_(A2)-F、DS-CAV1-Tric、SC-DM和DS2)mRNA疫苗，利用免疫印迹法鉴定在人胚肾(HEK-293)细胞中的PLX3397纯度表达；在采用该4种mRNA疫苗和RSV-F疫苗免疫小鼠2剂次(间隔2周)后12d检测血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、特异性免疫球蛋白(IgG)抗体和中和抗体水平。结果 4种RSV_(A2) F突变体mRNA疫苗均在HEK-293细胞中检测到表达。在小鼠免疫2剂次后，WT_(A2)-F mRNA疫苗组IFN-γ和IL-4水平显著高于RSV-F疫苗组；WT_(A2)-F mRNA疫苗组和RSV-F疫苗组均诱导特异性IgG且抗体水平无显著性差异，但前者诱导的中和抗体水平显著高于后者；post-F构象的WT_(A2)-F mRNA疫苗组与pre-F构象的mRNA疫苗组(DS-CAV1-Tric、SC-DM和DS2)均诱导特异性IgG抗体，但各mRNA疫苗组IFN-γ、IL-4和中和抗体水平均无显著性差异。结论 RSV_(A2) F突变体mRNA疫苗在小鼠体内可诱导强烈的细胞和体液免疫应答，可作为潜在的RSV候选疫苗进一步研究。

目的:探讨他汀类和抗血小板聚集药物联合应用于缺血性脑更多血管疾病(ICVD)患者中的应用价值。方法:选择2020年3月至2021年2月在本医院接受治疗的168 ICVD患者为研究对象，患者采用随机分配原则分为两组，各84例；对照组选择辛伐他汀治疗，观察组选择辛伐他汀联合阿司匹林治疗；对两组患者的临床疗效、血脂水平、内皮祖细胞(EPCs)数量以及不良反bio distribution应情况进行比较分析。结果:观察组临床疗效显著高于对照组(P<0.05);两组患者治疗前的血脂水平、EPCs数量无显著差异(P>0.05),治疗后，观察组总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)水平和下肢动脉MT、斑块积分显著低于对照组，低密度ABT-199分子量脂蛋白(LDL-C)水平、EPCs数量显著高于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率比较无显著差异(P>0.05)。结论:辛伐他汀联合阿司匹林治疗ICVD患者，能够显著提高临床效果，改善血脂水平，加强EPCs数量增殖与分化，对保护心脑血管具有极大的促进作用，且具有较高的安全性，值得推广。

目的 探讨舒筋活血汤结合低分子肝素在髋关节置换术患者中的应用。方法 选取2019年2月～2022年11月期间医院行髋关节置换术患者101例，根据治疗方式不同，分别设为实验组（舒筋活血汤结合低分子肝素治疗）和对照组（低分子肝素治疗），其中实验组51例，对照组50例。比较两组治疗后临床疗效、治疗前后血浆凝血酶原时间（prothrombin timeSB203580研究购买,PT）、部分凝血酶活化时间（Activated Partial Thromboplastin Time,APTT）水平、治疗后不良反应发生情况。结果治疗后，实验组总有效率高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗后，两组PT、APTT水平均下降，且实验组PT、APTT水平低于对照组，差异具有统计学Next Gen Sequencing意义（P<0.05）。治疗后，实验组与对照组不良反应比较diABZI STING agonist浓度，差异不具有统计学意义（P>0.05）。结论 在髋关节置换术患者中使用舒筋活血汤结合低分子肝素治疗，能提高临床疗效，改善凝血功能水平，且安全性较高。