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目的：研究八角枫药材中的主要活性成分八角枫碱对神经细胞增殖、分化及细ICU acquired Infection胞外信号调节激酶（ERK）通路的影响，探讨其神经毒性及毒性机制。方法：采用人神经母selleck抑制剂细胞瘤SH-SY5Y和人神经胶质瘤U251细胞作为体外评价模型，通过CCK-8和中性红摄取实验测定细胞毒性；Hoechst 33342核酸染色法检测染色质凝集情况；MitoTracker Red CMXRos线粒体红色荧光探针染色法检测线粒体膜电位的变化；分光光度法检测半胱氨酸蛋白酶Caspase-3、Caspase-9的水平；蛋白印迹（Western Blot）法检测胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、波形蛋白（VIMENTIN）及BCL2相关X蛋白（BAX）、B淋巴细胞瘤-2（BCL2）、聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶（PARP）、磷酸化的细胞外信号调节激酶（P-ERK）和细胞外信号调节激酶（ERK）的蛋白表达；采用维甲酸诱导神经元分化，检测分化的SH-SY5Y细胞神经突生长和退化的情况。结果：与空白对照组相比，50 μg/mL～2 000 μg/mL八角枫碱能明显抑制U251和SH-SY5Y的细胞生长(P<0.05或P<0.01)，作用呈剂量和时间依赖性；八角枫碱作用于U251细胞24 h后，显著抑制胶质细胞标志物GFAP、VIMENTIN蛋白的表达；八角枫碱处理24 h后，U251细胞和SH-SY5Y细胞出现明显凋亡形态学改变，表现为细胞核或细胞质内可见浓染致密的颗粒块状荧光及线粒体膜电位降低，线粒体活性减弱；八角枫碱可剂量依赖性抑制分化的SH-SY5Y神经突的生长及诱导其神经突退PLX4032分子式化，表现为神经突数量减少，神经突的长度变短；与空白对照组相比，八角枫碱能剂量依赖性明显增加Caspase-3和Caspase-9的酶活性(P<0.05或P<0.01)，上调BAX表达，下调BCL2表达，促进PARP切割，明显抑制ERK蛋白的磷酸化水平。结论：八角枫碱能抑制神经细胞及神经胶质细胞的增殖，并抑制神经元轴突的生长。其作用机制可能通过抑制ERK通路，上调BAX表达，下调BCL2表达，促进PARP切割，增加Caspase-3、Caspase-9活性，从而促进线粒体依赖性细胞凋亡。

目的：探究叉头框蛋白（Fox）O1在糖尿病心肌缺血再灌注（DM-MIR）损伤中的作用，并分析FoxO1对糖尿病心肌七氟烷后处理敏感性的调节作用。方法：采用链脲佐菌素（STZ）联合冠状动脉左前降支（LAD）结扎法建立DM-MIR大鼠模型，随机分为DM-MIR模型组（DM-MIR组）、DM-MIR模型+七氟烷后处理组（DM-MIR+Sevo-PostC组）、DM-MIR模型+七氟烷后处理+沉默对照组[DM-MIR+Sevo-PostC+绿色荧光蛋白标记的腺相关病毒9(AAV9-GFP)组]、DM-MIR模型+七氟烷后处理+FoxO1沉默组[DM-MIR+Sevo-PostC+AAV9-FoxO1小干扰RNA(siRNA)组]，另设正常-假手术组（N-S组）和糖尿病假手术组（DM-S组），每组18只。采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色检测心肌梗死比例；采用苏木素-伊红染色、TUNEL染色和透射电镜观察心肌损伤情况；检测各组大鼠的血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶（CK-MB）水平；采用蛋白免疫印迹法检测心肌中信号传导及转录激活因子3(STAT3)/FoxO1通路及下游蛋白的表达情况。结果：N-S组和DM-S组大鼠心肌无明显损伤和梗死；DM-MIR组、DM-MIR+Sevo-PostC组、DM-MIR+SevoPostC+AAV9-GFP组大鼠心肌呈现纤维断裂、细胞凋亡、核变形等损伤；DM-MIR+Sevo-PostC+AAV9-FoxO1 siRNA组心肌损伤减轻。与N-S组相比，DM-S组大鼠血糖、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)、葡萄糖-6-磷酸酶（G6Pase）、FoxO1此网站蛋白水平均升高，Pidnarulex临床试验磷酸化STAT3(p-STAT3)/STAT3比值降低（P均<0.05）。与DM-S组相比，DM-MIR组cTnI、CK-MB水平及凋亡相关蛋白（Fas）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase3)、FoxO1蛋白水平均升高，p-STAT3/STAT3比值降低（P均<0.05）；与DM-MIR组相比，DM-MIR+Sevo-PostC组、DMMIR+Sevo-PostC+AAV9-GFP组c TnI、CK-MB、血糖cross-level moderated mediation水平、心肌梗死比例、Fas、cleaved-caspase3、PCK1、G6Pase、FoxO1蛋白水平差异均无统计学意义（P均> 0.05），而DM-MIR+Sevo-PostC+AAV9-FoxO1 siRNA组上述指标均降低（P均<0.05）。结论：FoxO1在DM-MIR大鼠心肌中高表达，当其被抑制后可恢复糖尿病心肌对七氟烷后处理的敏感性，减轻DM-MIR损伤。

油菜根肿病是由原生动物芸薹根肿菌(Plasmodiophora brassicae)侵染引起的重要土传病害,主要为害十字花科的蔬菜和作物。由于根肿菌是活体营养专性寄生的病原物,没有建立稳定的遗传转化体系,致病机制尚不清楚,因此,全面了解根肿菌的生物学特性,特别是其致病机制对研发新的防控技术具有重要意义。实验室前期对根肿菌单孢分离菌株ZJ-1的基因组进行de novo测序,结合基因组学、转录组学和分泌蛋白组学的方法鉴定出两个肽酶抑制剂PbPI16-1和PbPI16点击此处-2,本研究对这两个蛋白的生物学功能进行了初步探索,取得的阶段性进展如下:1.PbPI16-1的生物学功能的初步探索:全长的PbPI1Alpelisib溶解度6-1基因由1206个核苷酸组成,蛋白由402个氨基酸残基组成,分子量约为44 kD,含有一个信号肽和一个肽酶抑制剂结构域。PbPI16-1蛋白具有类似效应子的功能,能够抑制由促凋亡蛋白Bax引起的烟草细胞坏死。亚细胞定位发现PbPI16-1定位于细胞膜、细胞质、细胞核以及质外体空间,去信号肽后,失去分泌功能并且在细胞质中聚集成团。利用qPCR技术对其侵染阶段的表达特征分析表明PbPI16-1在根肿菌各个侵染阶段都有表达,其中在皮层侵染阶段表达量最高。通过蘸花法获得3株超表达PbPI16-1的转基因植株,其中L18、L19和L21对根肿菌的生防效果分别为38.45%、32.10%和24.55%,表明超表达PbPI16-1的转基因植株提高了防御根肿菌的能力。对PbPI16-1转基因株系进行用flg22处理,qPCR检测结果表明SA信号途径的抗性基因表达水平显著增高。这些结果表明PbPI16-1可能在根肿菌侵染过程中发Median survival time挥作用。2.PbPI16-2的生物学功能的初步探索:全长的PbPI16-2基因由1038个核苷酸组成,蛋白由345个氨基酸残基组成,分子量约为38 kD,含有一个信号肽和一个肽酶抑制剂结构域。PbPI16-2能够抑制由促凋亡蛋白Bax引起的烟草细胞坏死。亚细胞定位于细胞膜、细胞质、细胞核以及质外体空间,去除信号后失去分泌功能及在细胞质中聚集成团。PbPI16-2基因在根肿菌各个侵染阶段都有表达,其中在皮层侵染阶段表达量最高。通过蘸花法获得2株超表达PbPI16-2的转基因植株,其中L26和L27对根肿菌的生防效果分别为39.02%和32.35%,超表达PbPI16-2可以提高植物抗根肿的能力。用flg22诱导转基因植株抗性基因的表达,qPCR检测结果表明SA信号途径相关的抗性基因显著上调表达;同时Western blot检测结果表明转基因植株的MAPK磷酸化激活水平比野生型拟南芥Col-0高。通过IP-MS技术筛选出322个与PbPI16-2互作的候选蛋白,筛选出33个蛋白和PbPI16-2共转化酵母细胞,利用酵母双杂交技术验证了33个候选蛋白与PbPI16-2的互作,结果仅有GLL23和JAL23能与PbPI16-2在酵母体内互作。荧光素酶互补实验结果表明GLL23和JAL23能与PbPI16-2在烟草细胞内互作。

本文旨在研究药食同源AMG510研究购买组方联合益生菌对环磷酰胺（CTX）诱导免疫低下小鼠免疫功能的调节作用。除空白对照组用生理盐水灌胃外，其余各组小鼠腹腔注射环磷酰胺（CTX）,100 mg/kg bw，连续腹腔注射4 d。将建模成功体重相近的小鼠随机分为6组：正常对照组、免疫抑制组、药食同源组方Ⅲ号、药食同源改良组（Ⅳ号）、益生菌组（Ⅴ号）和Ⅳ和Ⅴ联用组（Ⅵ号）。连续灌胃给药14 d，观察Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ对小鼠胸腺指数、脾脏指数、吞噬能力、脾淋巴细胞增殖、NK细胞活性以及血清中IgG、IgA和IgM生成水平的影响。结果显示：Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组均能显著提高模型小鼠胸腺指数（1.46、1.67、1.50、1.92 g/kg）、脾脏指数（2.32、2.54、2.52、2.82 g/kg）、吞噬能力（0.43、0.45、0.44、0.62）、脾淋巴细胞增殖作用（1.39、1.45、1.42、1.Crizotinib临床试验43）、NK细胞活性（0.35、0.43、0.36、0.71）(P<0.05)；Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ均能促使Ig G(224.21、163.21、253.35 mg/L)、Ig A(34.86、22.09、41.17 mg/L)和Ig M(84.01、78.23、100.28 mg/L)生成水平均明显提高（P<0.05）。研究结果表明，药食同源改良组方与益生菌联用组对环磷酰胺致免疫低下Genetic database小鼠的免疫能力具有显著增强作用。

目的 探究持续局部氧疗联合负压封闭引流对下肢慢性静脉性溃疡患者创面恢复、血清炎症因子水平及生活质量的影响，以期为临床治疗下肢慢性静脉性溃疡提供参考依据。方法 将东莞市洪梅医院2020年9月至2021年11月收治的50例下肢慢性静脉性溃疡患者按照随机数字表法分为两组。对照组（25例）患者实施负压封闭引流治疗，研究组（25例）患者实施持续局部氧疗联合负压封闭引流，均治疗2周，并于治疗后随访3个月。比较两组患者治疗后临床疗效，治疗后5、10、15 d创面肉芽组织覆盖率，治疗前与治疗后2、4周创周经皮氧分压与血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，以及治疗前与治疗后3个月下肢慢性静脉性溃疡患者生活质量问卷（VLU-QoL）评分。结果 与治疗后5 d比，治疗后10、15 d两组患者创面肉芽组织覆盖率呈Open hepatectomy升高趋势，且治疗后10、15 d研究组较对照组显著升高；与治疗前比，治疗Colforsin使用方法后2、4周两组患者创周经皮氧分压均呈升高趋势，血清TNF-α水平均呈降低趋势，且治疗后2、4周研究组患者创周经皮氧分压显著高于对照组，血清TNF-α水平显著低于对照组；治疗后3个月两组患者VLU-QoL评分中主观感受、局部症状、日常生活与总分均显著降低，且研究组较对照组显著降低（均P<0.05）；研究组患者治疗后临床总有selleckchem PUN30119效率（96.00%）较对照组（76.00%）升高，但组间比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 持续局部氧疗联合负压封闭引流治疗可有效改善下肢慢性静脉性溃疡患者的创面恢复情况，促进肉芽组织生长，增加创面氧分压，提高患者生活质量，在一定程度上提高治疗效果。

目的：探讨不稳定型心绞痛（UAP）患者介入术后发生冠状动脉（冠脉）微循环损伤的影响因素。方法：选取105例UAP患者为研究对象，均接受经皮冠脉介入术治疗，统计患者术后冠脉微循环损伤发生情况，依据术后是否发生冠脉微循环损伤分为发生组与未发生组，统计两组基线资料，分析UAP患者介入术后发生冠脉微循环损伤的影响因素。结果：105例UAP患者中，51例介入术后购买Emricasan发生冠脉微循环损伤，发生率为48.57%(51/105)；发生组合并高血压、球囊预扩张时间≥6 s、血清同型半胱氨酸（Hcy）≥6.3μmol/L、D-二聚体≥0.2 mg/L占比均高于未发生组，差异有统计学意义（P<0.05）；两组性别、年龄、病程、心绞痛类型、美国纽约心脏病协会（NYHA）心功能分级、球囊预扩张次数、预扩张球囊直径以及总胆固醇<6 mmol/L、三酰甘油<1.7 mmol/L、低密度脂蛋白胆固醇<3.37 mmol/L、高密度脂蛋白胆固醇>1.04 mmol/L占比比较，差异均无统计学意义（P>0.05）;Logistic回归分析结果显示，合并高血压、球囊预扩张时间≥6 s、Hcy≥6.3μmol/L、D-二聚体≥0.2 mg/L均为影响UAP患者介入术后发生冠脉微循环损伤的危险因素（OR>1,P<0.寻找更多05）。结论：合并高血压、球囊预扩张时间≥6 s、HcyCloning Services≥6.3μmol/L、D-二聚体≥0.2 mg/L均为影响UAP患者介入术后发生冠脉微循环损伤的危险因素。

目的 分析影响老年2型糖尿病患者非创伤性骨折发生的危险因素，构建列线图预测模型并给予评估。方法 收集278例老年2型糖尿病患者的临床资料作为建模组，另收集109例老年2型糖尿病患者的临床资料作为验证组，均根据患者患2型糖尿病后是否发生非创伤性骨折将其分为骨折组及无骨折组。以多因素Logistic回归分析老年2型糖尿病发生非创伤性骨折风险的影响因素，使用R软件构建列线图预测模型，再评估该列线图的准确性及临床有效性（ROC曲线下面积、H-L拟合度曲线及校准曲线）。结果 建模组中老年2型糖尿病患者非创伤性骨折发生率为24.46%(68/278selleck)，两组患者年龄、糖尿病周围神经病变、吸烟史、饮酒史BioMonitor 2、血清甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、糖化血红蛋白（HbA1c）、高血压病史比较，差异有统计学意义（P<0.05）。年龄、糖尿病周围神经病变、HbA1c、高血压病史为老年2型糖尿病患者发生非创伤性骨折的独立危险因素（P<0.05）。据此构建的列线图预测模型内部验证结果显示：ROC曲线下面积为0.774，校准曲线斜率接近1，且H-L拟合度曲线χ~2=12.643,P=0.125。以验证组患者进行外部验证，结果显示ROC曲线下面积为0.780，校准曲线的预测概率与实际概率相近，提示该模型区分度、准确度较好。结论 年龄、糖尿病周围神经病变、HbA1c、高血压病史为老年2型糖尿病患者发生非创伤性骨折的独立危险因素GSKJ4核磁，以此建立的预测模型具有较高的准确度及区分度，医护人员可根据患者个体化因素采取针对性措施进行预防，进而减少老年2型糖尿病患者发生非创伤性骨折的可能性。

嗜盐古菌胞外蛋白酶通常具有嗜盐碱、耐高温、耐有机溶剂等特征,在工业上具有巨大应用潜力。本研究以低盐适应性嗜盐古菌Halococcus salifodinae的胞外蛋白酶Hly A为研究对象,探究Hly A在不同温度、盐度、p H下的稳定性及降解产物,比较Hly A和C端延伸区(C-terminal extension,CTE)缺失突变体Hly A△CTE的酶学性质,初步研究具有优良催化性能的Hly A△CTE作为外加酶对鱼露发酵的影响。Hly A在高温或低盐条件下自加工降解成稳定的产物。采用Escherichia coli异源表达、镍柱亲和层析、体外复性及凝胶过滤层析,获得了纯度较高的Hly A。Hly A在低温、高盐、p H 6.0-10.0下均具有良好的稳定性,但是,在40℃以上的高温或2 M Na Cl以下的低盐环境中会自加工降解成稳定的产物。蛋白质C端测序结果表明降解产物是CTE缺失、仅含催化结构域的Hly A△CTE。纯化的重组Hly A△CTE前体未能复性获得成熟酶,表明CTE在自催化成熟过程中发挥着重要作用。自剪切位点(P1和P1’)定点突变Hly AE421A和Hly AE421A+T422A对重组菌株Haloferax volcanii胞外上清液酶活没有显著影响,但是,成熟酶仍然会发生自剪切。Hly A△CTE是高稳定性、高活性的广适性蛋白酶。Hly A的降解产物Hly A△CTE在广泛的温度(-20-60℃)、盐度(0.5-4 M Na Cl)和p H(6.0-10.0)范围内均具有良好的稳定性。Hly A的最适反应条件为40-45℃、p H 8.5,Hly A△CTE的最适反应条件为60℃、p H 7.0。Hly A和Hly A△CTE在低盐条件(0.5-1.5 M Na Cl)下活性较高。与Hly A相比,Hly A△CTE的温度耐受性更好,在高温下具有更高的活性。K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)和Sr更多~(2+)促进Hly A和Hly A△CTE的酶活。Hly A和Hly A△CTE能够水解多种蛋白质底物,对DMSO、吐温20有较好的耐受性。Hly A△CTE最大反应速率V_(max)是Hly A的2.1Orthopedic oncology倍。Hly A△CTE能够促进鱼蛋白水解,提高鱼露游离氨基酸含量。模拟鱼露发酵过程中,外加Hly A△CTE的鱼露氨基酸态氮含量、TCA-多肽含量和蛋白酶活性均高于外加碱性蛋白酶、外加中性蛋白酶和未加酶的鱼露。外加Hly A△CTE的鱼露人体必需氨基酸和鲜味氨基酸含量最高,其游离氨基酸总量分别是外加碱性蛋白酶、外加中性蛋白酶及未加酶鱼露的1.4倍、1.9倍和3.0倍。综上,Hly A在高温或低盐环境中会自加工降解,降解产物Hly AIACS-10759价格△CTE具有优良的酶学性质,能够促进鱼露发酵中蛋白质的水解。本研究将为嗜盐古菌胞外蛋白酶应用于高盐发酵食品工业提供重要的理论依据。

目的 探讨合并H型高血压的急性脑梗死患者心率变异性与临床特征的关系。方法 选择西安医学院第三附属医院神经内科门诊及住院部收治的原发性高血压合并急性脑梗死患者79例，并根据患者入院时血浆同型半胱氨酸水平分为研究组(H型高血压，同型半胱氨酸≥10 mmol/L)和对照组(非H型高血压，同型半胱氨酸<10 mmol/L),观察两组患者心率变异性，同时分析心率变异性与美国国transformed high-grade lymphoma立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、肾小球滤过率、颈动脉内膜中层厚度(IMT)、左心室质量指数等PCI-32765分子量的相关性。结果 与对照组比较，研究组NIHSS评分升高，24 h全部窦性R-R间期标准差(SDNN)降低，每5分钟窦性R-R间期均值的标准差(SDANN)降低，24 h连续5 min窦性R-R间期标准差的均值(SDNN-Index)降低，所有临近窦性R-R间期差值的均方根(rMSSD)降低，所有相邻两个窦性R-R间期差值大于50 ms的心搏数占全部心搏数的百分比(PNN50%)降低，肾小球滤过率降低，IMT显著增厚，左心室质量指数增加，差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示，SDNN与IMT呈负相关(r=-0.175,P<0.05);SDNN-Index与NIHSS评分、IMT和左心室质量指数呈负相关，与肾小球滤过率呈正相关(r分别为-0.186、-0.205、-0.217、0.187,P<0.05)。rMSSD与IMT呈负相关(r=-0.1https://www.selleck.cn/products/pexidartinib-plx3397.html72,P<0.05)。结论 合并H型高血压的急性脑梗死患者心率变异性显著降低，且与靶器官功能损伤有关。

目的 探讨健康体检人群的甲状腺结节检出情况及影响因素，为甲状腺疾病防治提供参考依据。方法 选取2021年郑州市某医院行甲状腺超声检查且一般资料齐全的3 272名体检者为研究对象。分析不同年龄组的甲状腺结节检出率及结节性质、大小等检出情况，并采用Logistic回归分析其影响因素。结果 甲状腺结节的总体检出率34.32%，男性和女性的检出率分别为30.78%和41.12%，女性高于男性（P<0.05）；随年龄增加，检出率呈ABT-199增高趋势（P<0.05）,60岁以上年龄组检出率高于其他年龄组（P<0.05）；囊性结节占62.15%，实性结节占31.26%，囊实性结节占6.59%；小结节占比达93.94%,50岁上年龄组大结节明显增多（P<0.05）。多因素Logistic回归分PI3K抑制剂析显示，女性和高龄是甲状腺结节发生的危险因素。与18～39岁组比较，50～59岁组(OR=2.111,95%CI:1.159～2.936),60～69岁组(OR=7.017,95%CI:3.907～12.606)piezoelectric biomaterials患甲状腺结节风险高；与男性相比，女性(OR=1.515,95%CI:1.295～1.772)患甲状腺结节风险高。高血压、高空腹血糖、高胆固醇血症与甲状腺结节发生无相关(P>0.05)。结论 临床工作中应注重女性和高龄人群的甲状腺结节筛查与管理。