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目的:本研究以不同等级太子参的水煎液对脾虚型大鼠进行Puromycin NMR给药,探究其对免疫细胞因子和胃肠激素的影响;采用酶法纯化太子参粗多糖;进一步探究不同等级太子参的水煎液和太子参多糖对脾虚型大鼠肠道菌群和短链脂肪酸的影响,为太子参的健脾益气功效提供理论依据。方法:1.苦寒泻下法制备脾虚泄泻模型,三种不同等级太子参的水煎液(PHD)给药,ELISA法检测血样中免疫细胞因子和胃肠激素的含量,计算脾脏及胸腺指数,通过各项指标的分析结果判断造模及给药过程中脾虚型大鼠炎症水平的改变。2.使用水提醇沉法提取太子参粗多糖,蛋白酶法除蛋白,Box-Behnken响应面法筛选最佳酶解温度、酶解时间、溶液p H,得到antibiotic residue removal太子参多糖酶法纯化的最佳条件,对其预测条件进行验证。PMP-HPLC法测定粗多糖中葡萄糖和半乳糖含量。3.对脾虚型大鼠灌胃给予不同等级PHD和太子参多糖(PHP),采集盲肠内容物,16s扩增子高通量测序探究各组大鼠肠道菌群组成的变化,气质联用法检测短链脂肪酸含量。结果:1.造模后脾虚模型组的脾脏指数和胸腺指数显著降低;给药后,PHD在一定程度上提高了脾指数和胸腺指数,其中以一等品效果最佳。三种促炎细胞因子的含量在模型组中含量上升,抗炎因子IL-10的含量则显著降低;给药后,促炎因子含量下降,抗炎因子则显著上升(p<0.05),一等品和二等品对细胞因子的含量影响最显著。2.响应面法预测得到多糖除蛋白的最佳条件为酶解时间2.0 h,温度45°C,溶液p H为6.5,最佳蛋白去除率为73.83%,因素的影响大小依次为酶解温度>酶解时间>溶液p H,三个因素的交互作用显著。酶法和Sevag法纯化的太子参粗多糖中葡萄糖和半乳糖含量之和占58%以上,同时色谱图中可见其他峰面积较小的单糖的峰。3.相似性分析表明组间差异均显著大于组内差异,分组合理。稀释曲线和丰度等级曲线说明测序的数据量渐进合理,样本的物种丰富度和均匀度良好。与空白组比较,模型组α、β-多样性指数均显著降低(p<0.05),给药后,各组中α、β-多样性指数有不同程度的增大,一等品水煎液及多糖组的效果最佳。模型组厚壁菌门/拟杆菌门比值较空白组显著升高,各给药组均显著降低该比值,其中一等品水煎液和多糖组最显著。目、科、属三个分类水平上,模型组与空白组、各给药组体现出了菌种差异;属水平热图亦直观体现出各组的肠道菌群组成差异。线性判CHIR-99021体内实验剂量别效应量分析直观体现出了各组的富集物种,主坐标分析和线性判别分布柱状图则显示出模型组大鼠与空白组、各给药组、阳性组的属水平菌种组间差异。PHP及PHD可显著促进脾虚型大鼠盲肠内容物中乙酸及丁酸的产生,以一等品水煎液组和多糖组最显著。结论:1.脾虚型大鼠在给予不同等级太子参的水煎液后,免疫器官指数、炎性细胞因子含量的变化表明太子参水煎液对于脾虚型大鼠免疫功能的改善、炎症水平的缓解等具有一定的效果,以一等品水煎液最显著。2.响应面模型预测得到酶法除蛋白的最佳条件,通过验证实验表明模型具有良好的可靠性和预测性。太子参粗多糖的单糖组成以葡萄糖和半乳糖为主,同时含有其他种类的单糖。3.脾虚型大鼠在给予不同等级的水煎液和多糖后,群落物种组成、菌群丰富度、物种多样性、短链脂肪酸含量的变化表明太子参多糖和水煎液在一定程度上改善了脾虚型大鼠肠道微生态的失衡,其中一等品水煎液和多糖的效果最佳。

目的 应用生物信息Nervous and immune system communication学综合考察氟伐他汀对胰腺癌MiaPaCa-2和PANC-1细胞基因表达谱的影响，并采用分子对接预测关键蛋白靶点。方法 从基因芯片公共数据库中下载氟伐他汀处理胰腺癌MiaPaCa-2和PANC-1细胞的基因表达谱芯片数据，以P<0.05和|logFC|>1为标准，筛选差异表达基因互作关系。采用VennDiagram R包取交集，得到共同差异表达基因；应用clusterProfiler R包，进行GO和KEGG通路富集分析；Cytoscape软件将差异表达基因互作关系可视化并找出潜在的关键基因，采用分子对接软件Bucladesine NMRAutodock Tools-1.5.6将预测得到的关键蛋白靶点与氟伐他汀进行分子对接分析，进一步研究氟伐他汀与靶蛋白的相互作用。结果 20μM氟伐他汀处理48 h后，胰腺癌细胞Mselleck HPLCiaPaCa-2和PANC-1共同差异表达基因共27个，主要涉及DNA复制、DNA错配修复与重组、染色体凝缩以及胞质分裂等作用。KEGG通路富集分析结果显示，共同差异表达基因主要与嘧啶代谢、p53信号通路和细胞周期等相关。分子对接结果显示，氟伐他汀与EXO1、MCM10、CDC45和KIF14这4个蛋白靶点之间具有较低的结合自由能，结合稳定。结论 氟伐他汀能够影响胰腺癌细胞MiaPaCa-2和PANC-1细胞基因表达谱。EXO1、MCM10、CDC45和KIF14可能是氟伐他汀治疗胰腺癌潜在的作用靶点。

【目的】探索生物质炭基尿素和普通尿素的施用对毛竹 Phyllostachys edulis 林土壤氧化亚氮 (N_2O) 通量与环境因子的影响效应与作用机制，为研发减缓土壤 N_2O 排放的施肥技术提供IDN-6556临床试验科学依据。【方法】2018 年 9 月至 2019 年 9 月，在杭州市临安区青山镇亚热带典型毛竹林样地布置野外控制试验。试验设 5 个处理：对照 (不施肥)、低水平尿Universal Immunization Program素(100 kg·hm~(-2))、高水平尿素 (300 kg·hm~(-2))、低水平炭基尿素 (100 kg·hm~(-2)) 和高水平炭基尿素 (300 kg·hm~(-2))。采用静态箱—气相色谱法测定毛竹林土壤 N_2O 排放速率，分析在上述施肥处理下土壤 N_2O 通量、温度、含水量、氮素形态及相关酶活性的动态变化规律。【结果】低水平尿素和高水平尿素处理使毛竹林土壤 N_2O 的年累积排放通量增加了17.3% 和 36.0%，而低水平炭基尿素和高水平炭基尿素处理分别使其降低了 3.1% 和 16.9%。尿素和炭基尿素处理均显著提高土壤铵态氮 (NH_4~+ -N) 和硝态氮 (NO_3~– -N) 质量分数 (P<0.05)；尿素处理显著增加了土壤水溶性有机氮质量分数selleckchem Mirdametinib以及脲酶和蛋白酶活性，而炭基尿素处理显著降低了上述 3 个指标 (P<0.05)。另外，在上述 5 个处理下，毛竹林土壤 N_2O 排放速率与土壤温度、NH_4~+ -N、水溶性有机氮、脲酶活性和蛋白酶活性均存在显著相关性 (P<0.05)。【结论】与尿素相比，炭基尿素对毛竹林土壤 N_2O 具有显著的减排效应，主要机制是其降低了土壤水溶性有机氮质量分数和氮循环相关酶活性。图 5 表 3 参 55

目的探讨超声弹性弥散定量技术genetic risk评价兔跟腱病的转归与演变,评价其间接反映跟腱生物力学特征的应用价值。方法选用雄性新西兰兔75只,随机分为3组,每组25只,分别于兔后肢跟腱处注射0.1 ml(轻度跟腱病组,M组)和0.3 ml(重度跟腱病组,S组)胶原酶建立模型,注射0.2mlLaduviglusib使用方法生理盐水作为假手术组(C组)。同时于造模前、造模后1 d、3 d、7 d及14 d行超声弹性检查并运用弥散定量技术分析不同时间点,以注射点为中心,相同感兴趣区域面积内的蓝色像素所占百分比(%AREA);兔处死后取跟腱组织行病理检查观察胶原变化;应用万用材料试验机测试不同组跟腱最大拉力载荷,并与%AREA行相关性分析。结果①M组和S组在造模后1 d、3d、7 d时%AREA均小于C组(P<0.05),而在3d时%AREA最低。S组%AREA在3 d、7 d与M组差异有统计学意义(P<0.05)。②M组在造模后1d、3d、7 d时最大拉力载荷均较C组小(P<0.05),而在14 d时与C组无明显差别(P>0.05)。S组在造模1d后最大拉力载荷均低于M组和C组,差异有统计学意义(P<0.05)。M组和S组在3d时最大拉力载荷最低。③跟腱%AREA与最大拉力载荷呈正相关(r=0.87,P<0.001)。结论超声弹性成像能动态VX-661监测跟腱病的演变转归,能间接反映跟腱的生物力学状态。

目的 肠道菌群代谢物4-甲酚可通过增强β细胞功能改善糖尿病。然而，4-甲酚是否在糖尿病心肌保护中发挥作用尚不清楚。本研究旨在研究4-甲酚对糖尿病(diabetic mellitus, DM)大鼠心肌缺血/再灌注（myocardial ischemia-reperfusion, MI/R）损伤的保护作用，并初步探讨其机制。方法 取雄性SD大鼠，分为正常对照组和糖尿病组。利用高脂饲料联合链脲霉素诱导2型糖尿病大鼠模型。造模成功后，随即分为3组：糖尿病假手术组（DM+Sham）、糖尿病心肌缺selleck合成血/再灌注组（DM+MI/R）和糖尿病心肌缺血/再灌注+4-甲酚组（DM+MI/R+4-cresol）。4-cresol组采用植入式胶囊渗透压泵给药（5.5 mmol/L 4-cresol,0.15μl/h），其余给予生理盐水。6周后，采用结扎冠状动脉左前降支30 min再灌注3 h的方法建立心肌缺血/再灌注模型。再灌注结束处死大鼠，检测心肌梗死和细胞凋亡。检测心肌氧化应激程度。测定心肌双底物特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1a(dual specificity tyrosinephosphorylation-regulated kinase 1A, Dyrk1A)表达以及细胞凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase,ASK1)磷酸化水平。结果 4-甲酚可有效减轻糖尿病大鼠心肌损伤，表现为心肌梗死面积下降、血清肌酸激酶（Ccreatine kinase, CK）及乳酸脱氢酶（Llactic dehydrogenase, LDH）活性降低、心肌细胞凋亡减少（P<0.01），同时4-甲酚显著抑制心肌丙二醛（malonic dialdehyde, Mselleck NMRDA）含量，增加超氧化物歧化酶（superoxide Dismutase, SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathProtein Analysisione peroxidase, GSH-Px）含量含量（P<0.01），表明4-甲酚可以有效减轻氧化应激。此外，4-甲酚处理后，心肌Dyrk1A表达以及ASK1的磷酸化水平显著降低（P<0.01）。结论 4-甲酚可显著减轻糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤，其具体机制与激活Dyrk1A信号，抑制氧化应激，减轻细胞凋亡相关。

慢性肾脏病(Chronic Kidney Disease，CKD)作为泌尿系统疾病，目前临床较为常见，其病机复杂，病程冗长，病症繁多。致病原因包括原发和继发两方面，以肾小球、肾小管及肾血管炎症、损伤为主。病程持续进展可增加死亡风险。近年随着CKD患病率的PUN30119纯度上升，死亡率也随之增加。因治疗难度大、患病率高及预后不良等因素，CKD已成为引发世界重视的公共卫生问题。现代医学在对症治疗的同时可有效缓解临床症状，但对控制病程进展效果不佳，无法满足医生及患者对疗效的要求。中医药治疗肾脏疾病历史悠久，理论及实践经验丰富，可多途径、多靶点起效，在延缓肾脏衰竭方面优势显著，效果力专。穿山龙性温，善祛风湿，通筋络，活血止痛。MG132生产商依托现代药理学及临床实践深入对穿山龙的研究，积累丰富的理论基础及实践经验，不仅证明其对CKD的确Invasion biology切疗效，也展现了穿山龙在肾脏病领域的应用前景。本文通过查阅和研究国内外相关文献，对穿山龙在CKD治疗中的药理学功效（抗氧化应激、降血糖、抗炎、降低尿酸等）、临床应用研究进行总结，通过对整理分析，以期寻找改善肾功能，有效治疗CKD的新的组方用药思路。

去除荧光标记后残余荧光染料可以提高荧光颗粒检测的灵敏度、准确度和效率。该文发展了一种原位电泳洗脱(electrophoretic elution, EE)模型，用于在荧光标记后快速去除多余的荧光探针，实现荧光颗粒的灵敏检测。将牛血清蛋白(BSA)和磁珠(MBs)作为模式蛋白和微颗粒，混合孵育获得MBs-BSA,用异硫氰酸荧光素(FITC)对MBs-BSA标记，得到MBs-BSA_(FItransboundary infectious diseasesTC)复合物。将含有多余FITC的MBs-BSA_(FITC)溶液与低凝聚温度琼脂糖凝胶溶液按1∶5的体积比混合，并将混合物凝胶和纯琼脂糖凝胶分段填充到电泳通道中。电泳过程中，利用颗粒尺寸与凝胶孔径的差异来保留MBs-BSA_(FITC),同时将游离的FITCPEG300供应商洗脱。经过30 min的电泳洗脱，通道内多余的FITC清除率达到97.6%,同时目标颗粒荧光信号保留了27.8%。成像系统曝光时间为1.35 s时，电泳洗脱将颗粒与背景的荧光信号比(P/B ratio, PBr)从1.08增加到12.2。CCD相机的曝光时间增加到2.35 s,可以将PBr提高到15.5,可进一步实现对微弱荧光亮点的高灵敏检测。该模型有以下优点：(1)能对颗粒表面非特异性吸附的FITC实现有效洗脱，提高了检测的特异性；(2)能够将97%以上的游离FITC清除；(3) 30 min内能够使凝胶内的背景荧光大幅降Docetaxel低，提高了PBr和检测灵敏度。因此，该方法具有在凝胶中进行基于磁珠/荧光颗粒点的免疫检测、在免疫电泳或凝胶电泳中对蛋白质/核酸条带进行荧光染色等领域的应用潜力。

目的 研究内生场热疗联合肝脾双介入治疗中晚期肝癌的临床效果。方法 40例中晚期肝癌患者,通过计算机随机分组法分为对照组及观察组,每组20例。对照组采用单纯肝动脉化疗栓塞术治疗,观察组实施内生场热疗联合肝脾双介入治疗。比较两组患者临床疗效、生存情况[无进展生存期(PFS)、6个月生存率]、肝纤四项指标[血清透明质酸(HImported infectious diseasesA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)]、卡氏(KPS)评分、不良反应及并发症发生情况。结果 观察组的客观缓解率(ORR)为65.00%,与对照组的40.00%比较,差异无统计学意义(P>0.05)；观察组的疾病总控制率90.00%高于对照组的55.00%,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者的HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平均低于本组治疗前,且观察组的HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平分别为(74.65±10.03)ng/ml、(65.84±7.26)ng/ml、(79.90±10.01)μg/L、(78.63±9.34)μg/L,均低于对照组的(103.37±20.16)ng/ml、(93.20±11.53)ng/ml、(110.84±14.36)μg/L、(111.18±13.62)μg/L,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组恶心呕吐、腹胀、白细胞下降、发热、肝功能改变及肝区疼痛发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者的KPS评分均高于本组治疗前,且观察Cobimetinib MW组患者的KPS评分(80.55±6.30)分高于对照组的(74.02±5.19)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。ZD1839分子式观察组的PFS(4.48±0.79)个月长于对照组的(3.85±0.45)个月, 6个月生存率90.00%高于对照组的60.00%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 对中晚期肝癌患者实施内生场热疗联合肝脾双介入治疗安全有效,可提升生存率且有利于肝纤维化、生存质量的改善。

目的：探讨增殖期婴幼儿血管瘤患儿口服普萘洛尔前、后2个月尿液中bFGF、MMP-2和MMP-9的表达水平变化，初步探索普萘洛尔治疗婴幼儿血管瘤的作用机制。方法：收集2018年6月—2019年6月在中国医科大学附属口腔医院口腔颌面外科genetic stability病区住院的增殖期血管瘤患儿34例。分别在患儿口服普萘PLX-4720洛尔前、后2个月留取清selleckchem Dibutyryl-cAMP晨无菌中段尿10 mL，另外收集21例正常婴幼儿（年龄<12个月）的清晨无菌中段尿10 mL作为对照组，采用酶联免疫吸附法检测3组尿液样本中bFGF的表达水平，采用明胶酶谱法检测3组尿液样本中MMP-2和MMP-9的表达水平。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果：口服普萘洛尔后2个月，患儿尿液中bFGF的表达水平显著低于治疗前（P<0.01），但仍显著高于对照组（P<0.05）;MMP-2和MMP-9的表达水平显著低于治疗前（P<0.01），但仍高于对照组（P<0.05）。结论：普萘洛尔治疗增殖期血管瘤患儿的作用机制之一，可能是通过抑制患儿体内bFGF、MMP-2和MMP-9的表达水平，进而抑制血管瘤中血管内皮细胞的增殖与血管生成，达到治疗血管瘤的目的。检测尿液中b FGF、MMP-2和MMP-9的表达水平，可作为患儿口服普萘洛尔用药过程中的评价指标。

目的：分析整合素连接激酶（integrin-linked kinase,ILK）基因在食管癌组织表达情况及其与患者临床病理特征之间的关系，探讨其对食管癌细胞（KYSE-150）增殖、凋亡和裸鼠皮下移植瘤的影响。方法:选取2012年1月至2014年12月手术切除并经病理证实的75例食管鳞癌患者的癌及癌旁组织标本，利用组织芯片技术，用免疫组织化学染色方法检测食管癌组织和癌旁组织中ILK的表达情况；qPCR检测食管癌细胞系Eca109、TE-1、EC9706、KYSE-150中ILK的表达，选用ILK表达最高的KYSE-150执行后续细胞功能学研究。使用ILK干扰慢病毒感染KYSE-150细胞下调ILK的表达，qPCR和WB方法检测ILK基因敲降效率；MTT实验、克隆形成实验和FACS检测干扰ILK表达对KYSE-150细胞增殖能力和凋亡水平的影响；裸鼠皮下成瘤实验检测干扰ILK对移植瘤生长的影响。结果:食管癌组织中ILK阳性率高于癌旁组织（P<0.05），且ILK高表达与淋巴结转移有关联（P<0.05）。qPCRImmune adjuvants实验结果显示，感染shILK的KYSE-150细胞中ILK的mRNA表达明显受到抑制（P<0.05）;WB结果显示shILK组ILK蛋白水平表达显著下调，以上结果提示ILK敲降成功。shILK组KYSE-150细胞的增殖能力、克隆形成数均显著低于shCtrl组（均P<0.05），但细胞凋更多亡率高于shCtrl组（P<0.05）。与NC组相比，KD组裸鼠肿瘤生长缓慢，肿瘤的重量及体积均偏小（均P<0.05）。结论:ESCC组织中ILK的表达高于癌旁组织，且ILK高表达与淋巴结转移有关联；抑制ILK基因可造成抑制食管癌细胞增殖能力降低，促进细胞凋亡，并抑Tezacaftor采购制裸鼠成瘤能力。