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目的探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase 3)在增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)经光敏剂血卟啉单甲醚(HVX-661临床试验MME)诱导的凋亡效应中的作用。方法将原代培养的HSF分为对照组、HMME-光动力疗法(PDT)组和caspase 3抑制剂(Z-DEVD-FMK)组,经caspase 3-异硫氰酸荧光素(FITC)-碘化丙啶(PI)染色后在荧光显微镜下观察各组细胞内caspase 3的荧光强度。收集各组细胞,在活性caspase 3-FITC单染后,经流式细胞术检测活性caspase 3阳性细胞百分率;在PI单染后,经流式细胞术检测细胞凋亡率。结果对照组和caspase 3抑制剂组HSF胞质中caspase 3-FITC荧光微弱,PDT组荧光显著增强;对照组活性casimmune systempaStaurosporine化学结构se 3阳性细胞百分率低,HMME-PDT组(30.86%±1.21%)上升,caspase 3抑制剂组(2.46%±0.18%)降低,后两组间比较,t=21.76,P<0.05。PI染色分析表明,对照组凋亡率(2.45%±0.22%)低,PDT组(30.54%±3.78%)显著升高,两组比较,t=35.90,P<0.05;caspase 3抑制剂组凋亡率(10.46%±2.15%)低于PDT组,但显著高于对照组(t=27.97,P<0.05)。结论 HMME-PDT诱导HSF发生的凋亡效应与caspase 3的激活密切相关,但该凋亡效应并不依赖于caspase 3。

目的：探讨归芪白术方联合奥沙利铂通过血管活性肠肽（VIP）/环磷酸腺苷（cAMP）/蛋白激酶A（PKA）信号通路调控下游水通道蛋白3（AQP3）和水通道蛋白4（AQP4）从而保护胃癌荷瘤小鼠肠道屏障的作用。方法：将密度为1×10~(7)个/mL的胃癌细胞株MFC制成细胞悬液，经荷瘤小鼠右腋下接种0.2 mL的细胞悬液，构建胃癌荷瘤小鼠模型，造模成功后将小鼠随机分为5组，模型组、奥沙利铂组（10 mg·kg~(-1)）、奥沙利Dibutyryl-cAMP铂加归芪白术方高、中、低剂量组（17.68、8.84、4.42 g·kg~(-1)），每组10只，另外余10只作为空白组。各组小鼠经灌胃或腹腔注射中药、奥沙利铂或生理盐水，治疗14 d。末次给药后，次日眼球取血分离血清并取其结肠样本。苏木素-伊红（HE）染色观察组织形态的变化。ELISA法检测血清中D-乳酸（D-LA）、二胺氧化酶（DAO）含量；实时荧光定量聚合酶Repeat fine-needle aspiration biopsy链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测各组小鼠结肠组织中VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4 mRNA及蛋白的表达。结果：与正常组比较，模型组黏膜下层水肿，黏膜层中肠腺排列紊乱，杯状细胞缺失，可见大量炎性细胞浸润及绒毛脱落的现象。而各给药组均有不同程度的改善；与正常组比较，模型组血清中DAO和D-LA水平均明显上升（P<0.01），与模型组比较，联合用药高剂量组DAO和D-LA水平及联合用药中剂量组D-LA水平均有所下降（P<0.05，P<0.01），与奥沙利铂组比较，联合用药高、中剂量组D-LA水平有所下降（P<0.05），其余组DAO和D-LA表达水平也有所下降，但差异无统计学意义；与正常组比较，模型组小鼠的VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4 mRNA及蛋白表达水平显著降低（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，各给药组小鼠的VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4 mRNA及蛋白表达水平均有所升高，其中联合用药高剂量组VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4 mRNA及蛋白表达水平明显升selleck INCB28060高（P<0.05，P<0.01），联合用药中剂量组cAMP蛋白表达水平升高（P<0.05）；与奥沙利铂组比较，联合用药高剂量组cAMP蛋白表达水平升高（P<0.05），其余组基因mRNA及蛋白表达也有所升高，但差异无统计学意义。结论：归芪白术方联合奥沙利铂通过VIP-cAMP-PKA信号通路调节AQP3和AQP4达到保护胃癌荷瘤小鼠肠道屏障的作用。

目的:探索艳山姜挥发油Immune composition对LPS诱导的视网膜Müller细胞炎症反应的保护作用及其作用机制。方法:采用LPS诱导视网膜Müller细胞发生炎症反应,给予低、高剂量艳山姜挥发油进行干预,分组为空白对照组、模型组、艳山姜挥发油低剂量组(1μg/L)、艳山姜挥发油高剂量组(5μg/L)。Western Blot法检测炎症因子和ELISA法检测Müller细胞中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的表达和分泌。Western Blot法检测NFDolutegravir价格-κB信号分子TLR4、IκBα、pIλBα、P65、p-P65蛋白表达,IF法观察P65入核情况。进一步采用NF-κB特异性抑制剂PDTC处理Mhttps://www.selleck.cn/products/liproxstatin-1.htmlüller细胞后,检测IκBα、p-IκBα、P65、p-P65、TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白表达水平。结果:艳山姜挥发油抑制LPS诱导Müller细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的合成与释放,抑制IκBα、p-IκBα、P65、p-P65蛋白表达,改善炎症反应。采用NF-κB特异性抑制剂PDTC干预后可抑制上述蛋白表达,且艳山姜挥发油+PDTC组与PDTC组比较无明显差异。结论:艳山姜挥发油可抑制LPS诱导的大鼠视网膜Müller细胞炎症反应,其作用机制与NF-κB信号的激活相关。

目的 基于中药系统药理学探讨达原饮治疗新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19,新冠肺炎)的药效成分、靶点及其作用，并阐释其科学内涵。方法 通过中药综合数据库(TCMID)检索达原饮中已知化合物(药效成分);使用中医药分子机制生物信息学分析工具预测药效成分作用靶点；使用DrugBank数据库等获取COVID-19相关靶点；采用Cytoscape 3.7.2IACS-010759 IC50软件及其插件对相关靶点进行富集分析，并绘制达原饮-化合物-靶点网络关系图。结果 在达原饮7味中药中检索已知结构和可信靶点的药效成分，共197个化合物；共鉴定到1602个可信靶点；达原饮靶点涵盖CTrichostatin A体外OVID-19的新冠状病毒进入细胞的关键基因ACE2,参与3061种生物学过程，经MCODE聚类后归为20种主要生物学过程，涵盖以与共生体、宿主相互作用、初始病毒感染等与COVID-19高度相关的生物学过程；234种细胞作用位点，经MCODE聚类主要位于顶端膜、细胞内小管、DNA聚合酶引物酶复合物、细胞质囊；具有648种分子功能，MCODE聚类显示主要为乙酰胆碱受体的活性、细胞内配Autoimmune Addison’s disease体门控离子通道活性和钙释放通道活性三类；KEGG代谢通路富集分析显示，共132个信号通路被显著富集，其中，与COVID-19密切相关的疟疾和人T细胞白血病1型病毒感染信号通路被显著富集，且各个信号通路间相互联系；达原饮中黄芩可靶向ACE2,与西药及靶点对比，达原饮中7味草药通过其化合物靶向多个靶点抗病毒。结论 (1)初步明确了达原饮多靶点、多系统相互协同治疗COVID-19的基础和数据，分析了达原饮君臣佐使配伍组方特点及开达膜原，辟秽化浊的分子机制，为后期深入的基础实验和临床抗病毒药物研究提供了明确的研究方向。(2)达原饮多组分协同，驱邪扶正，标本兼治。

目的：分析西藏拉萨糖尿病患者合并高血压对血清白蛋白的影响。方法：采用回顾性的病例对照研究，纳入八廓街道常住居民中2型糖尿病患者149例。将76例糖尿病合并高血压患者归为病例组，73例糖尿病不合并高血压患者归为对照组。采用二元Logistic回归分析研究2型糖尿病合并高血压对血清白蛋白的影响。结果：2组患者的4个指标差异存在统计学medicinal marine organisms意义，包括年龄（60.8±8.0岁vs 57.3±11.4岁，P<0.05MS-275临床试验）、平均收缩压（147±16mmHg vs 117±13mmHg,P<0.01）、平均舒张压（95±10mmHg vs 77±9mmHg,P<0.01）和平均血清白蛋白水平（27.7±7.4g/L vs 32.2±9.1g/L,P<0.01）。与不合并高血压的患者相比较，糖尿病合并高血压患者年龄相对较大，平均血清白蛋白水平较低。单因素分析结果显示，2个相关指标，包括年龄（OR值1.038,95%可信区间1.003～1.075,P=0.033）和血清白蛋白（OR值0.936,95%可信区间0.899～0.975,P=0.002）。多因素分析的结果显示，血清白蛋白是唯一相关指标（OR值0.938,95%可信区间0.900～0.978,P获悉更多=0.002）。结论：西藏拉萨2型糖尿病合并高血压患者较不合并高血压的患者血清白蛋白水平降低。

【背景】副溶血弧菌是南美白对虾养殖中常见的致病菌，传统的抗生素防治办法不仅低效，而且越来越难以满足食品安全和绿色环保及可持续发展的要求。副溶血弧菌的生物防治是南美白对虾养殖业可持续发展的必由之路。噬菌体是天然安全的活体抗菌剂，因其对特定细菌的专一性感染和高效性裂解而备受关注。【目的】分离一株能高效裂解副溶血弧菌的烈性噬菌体，为探索副溶血弧菌的噬菌体防治方法提供基础研究。【方法】以28株病虾来源的副溶血弧菌为宿主菌，用双层琼脂平板法从海鲜市场污水中分离副溶血弧菌噬菌体；点斑法测定噬菌体的裂解谱，并对筛选到的宽裂解谱噬菌体进行透射电镜(transmission electron mGSI-IX采购icroscopy,TEM)观察、生物学特性测定和全基因组序列分析。【结果】分离筛选到一株副溶血弧菌烈性噬菌体，命名为Vpas＿PP24。透射电镜观察显示该噬菌体头部为二十面体，有一长尾，头部长约92 nm，宽约46 nm，尾部长约147 nm，属于有尾噬菌体目长尾噬菌体科。其基因组全长83 482 bp，预测有118个开放阅读框(open reading frames,ORFs)，具有已知功能的有13个，不含非编码RNA、毒力基因及抗生素抗性基因。基因组一致性对比显示噬菌体Vpas＿PP24可能为弧菌噬菌体的一个新种。Vpas＿https://www.selleck.cn/products/kd025-(slx-2119).htmlPP24对28株副溶血弧菌的裂解率为54%，对其他种属的116株弧菌的总裂解率为16%；最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)为0.000 1，效价可达3.0×10~(10) PFU/mL。一步生长曲线显示Vpas＿PP24的潜伏期为10 min，暴发期为150 min，暴发量为30 PFU/cell。该噬菌体在温度<50℃、pH 4.0-11.0范围内活性稳定，对糜蛋白酶、木瓜蛋白酶和对虾肝胰腺酶提取液的水解作用不敏感，但蛋白酶K可快速Classical chinese medicine使其失活，紫外辐照也能使Vpas＿PP24失活。宿主菌对该噬菌体的不敏感突变频率为2×10~(-5)。【结论】分离筛选到一株裂解谱较宽、基因型较新、生物学性质较稳定的副溶血弧菌噬菌体，该噬菌体具有进一步开发成为新型副溶血弧菌抗菌剂的潜力。

目的 分析妊娠期高血压患者采用硫酸镁联合拉贝洛尔的临床疗效及对妊娠结局的影响。方法https://www.selleck.cn/products/gsk126.html 选取2020年1月—2021年12月郑州市第一人民医院妇产科收治的妊娠期高血压150例患者，根据用药的不同，将单用硫酸镁治疗的50例作为对照1组，将单用拉贝洛尔治疗的50例作为对照2组，将联合使用硫酸镁与拉贝洛尔治疗的50例作为观察组。比较3组疗效、血液黏度、蛋白尿量、血清炎性因子水平、妊娠不良结局。结果 观察组治疗总有效率96.00%,高于对照1组(76.00%)与对照2组(74.00%),差异有统计学意义(P<0.05);2组治疗前差异无统计学意义，P>0.05,治疗后观察组舒张压及收缩压分别为(78.15±6.04BMS-354825配制)mm Hg及(117.03±13.12)mm Hg,均低于对照1组[(87.15±6.14)mm Hg及(139.22±16.83)mm Hg]与对照2组[(88.05±6.43)mm Hg及(138.96±16.54)mm Hg],均P<0.05,对照1组与对照2组无差异，P>0.05;两组治疗前无差异，P>0.05,治疗后观察组患者血液黏度、蛋白尿量分别为(2.23±0.98)mPa·s及(1.01±0.19)g/24 h,均低于对照1组与对照2组，均P<0.05,对照1组与对照2无差异，P>0.05;观察组治疗后血清胱抑素、血清同型半胱氨酸及Biomarkers (tumour)血清白细胞介素等炎性因子水平低于对照1组与对照2组，均P<0.05;观察组妊娠不良结局发生率(2%),显著低于对照1组(24%)与对照2组(18%),P<0.05。结论 妊娠期高血压患者硫酸镁与拉贝洛尔联合治疗不仅能够控制血压、降低患者血液黏度、蛋白尿量与血清炎性因子水平，同时有利于改善妊娠结局。

目的：研究熊果酸（Ursolicacid）对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响及具体的分子机制。方法：选用人源selleck HPLC结直肠癌细胞RKO为研究对象，用细胞增殖检测（CCK-8）法检测不同浓度的熊果酸（0、5、10、15、20、25、30μmol·L~(-1)）处理RKO细胞的增殖抑制率，计算出24h、48h的半抑制浓度值（IC_(50)）。后续实验根据熊果酸处理RKO细胞24h的IC_(50)值，选用两个浓度开展。集落形成实验检测细胞增殖能力，流式细胞术检测熊果酸处理RKO细胞后的凋亡率及细胞周期阻滞情况，蛋白免疫印迹法（WesternBlot）检测熊果酸作用RKO细胞24h后，RKO细胞中B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白（Bax）、Raji细胞中B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、人T淋巴细胞白血病PMA反应基因（NoxCompound 3半抑制浓度a）凋亡蛋白表达情况，细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A（p21）、周期蛋白依赖激酶抑制因子1B（p27）、细胞周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）周期相关的蛋白表达情况，以及蛋白激酶B（Akt）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、叉头盒蛋白3a（FoxO3a）、磷酸化叉头盒蛋白3a（p-FoxO3a）通路蛋白表达情况。结果：与空白组比较，熊果酸处理组能够显著抑制RKO细胞的活力（P<0.05，P<0.01）；与空白组相比较，熊果酸处理组RKO细胞biological optimisation的克隆形成率显著降低，呈现剂量依赖性（P<0.05，P<0.01）；与空白组比较，熊果酸处理组细胞发生了周期阻滞，在合成前期即G_(0)/G_(1)期的百分比相比对照组显著升高（P<0.05）；与空白组比较，p21、p27蛋白表达增加，CDK4蛋白表达降低（P<0.05，P<0.01）；与空白组相比较，熊果酸处理组细胞凋亡率相比对照组显著升高，凋亡相关蛋白Bax、Noxa表达升高，Bcl-2表达降低，具有统计学差异（P<0.05，P<0.01）。机制上，熊果酸处理组显著下调磷酸化Akt蛋白的表达，且上调磷酸化FoxO3a的表达，而Akt和FoxO3a总蛋白无明显变化。结论：熊果酸能够有效抑制结直肠癌细胞RKO的增殖，促进细胞凋亡，其机制可能与Akt/FoxO途径有关。

目的建立有效的细菌性角膜炎体外细胞模型,探讨其对角膜基质细胞的影响。方法采用贴壁法分离培养SD大鼠角膜基质细胞,以1 000Trichostatin A化学结构细胞·100 μl-1·孔-1接种并使用CCK8测定不同浓度(0.4、2、10、50、250、1 250 mg/L)脂多糖(LPS)对细胞1、2、3、4、5 d内的量效作用曲线,对照组使用PBS(n=3)。根据量效曲线选定建模浓度后,分别设置模型组与对照组(n=3)。光镜观察培养5 d角膜基质细胞形态变化。以5 000细胞·100 μl-1·孔-1接种,使用CCK8测定LPS作用6、12 h对角膜基质细胞短期活性影响。划痕实验检测LPS作用6、12 h角膜基质细胞迁移率;ELISA检测角膜基质细胞炎症因子TNF-α、IL-6分泌水平;免疫荧光染色鉴定胶原分泌水平;免疫印迹检测基质金属蛋白酶9(MMP9)表达变化。结果与对照组比较,自LPS作用1 d开始,相同时间点时10、50、250、1 250 mg/L角膜基质细胞活性均降低(均P0.05)。为满足细胞炎症诱导的需要,选用出现细胞增殖抑制效应的低药物浓度10 mg/L LPS建立体外炎症细胞模型。细胞体外培养5 d时,与对照组比较,模型组角膜基质细胞形态由梭形变为多边形。调整细胞种植密度后,短期的体外活性检测表明,与对照组比较,模型组角膜基质细胞在LPS作用6 h和12 h后出现细胞活性抑制现象[6 SCH772984h:0.036±0.006比0.061±0.006,12 h:0.033±0.004比0.053±0.005,均P0.05]。6 h和12 h时模型组角膜基质细胞的体外迁移速率明显低于对照组[6 h:(6.77±3.22)Pixel/h比(16.52±1.18)Pixel/h,12 h:(8.41±1.45)Pixel/h比(17.09±0.75)Pixel/h,均P0.05]。LPS作用48 h后,与对照组比较,模型组角膜基质细胞炎症因子分泌水平升高[TNF-α:(446.71±20.59)pg/ml比(289.27±26.44)pg/ml,IL-6:(146.26±17.34)pg/ml比(65.94±10.11)pg/ml,均P0.05];MMP9表达量增加[0.884±0.052比0.385±0.036,P0.05];Ⅰ、Ⅵ型胶原含量降低[Ⅰ型:(0.46±0.15)×105 Pixel2比(1.21±0.53)×105 Pixel2,Ⅵ型:(2.63±2.07)×106 Pixel2比(7.08±1.52)×106 Pixel2,均P0.05],Ⅲ型Laboratory biomarkers胶原含量升高[(3.69±0.73)×105 Pixel2比(1.12±0.40)×105 Pixel2,P0.05]。结论 LPS诱导角膜基质细胞可模拟角膜炎中细胞炎症反应及变化,为研究细菌性角膜炎的机制和治疗方法提供有效的体外细胞模型。

目的 通过达格列净对预混胰岛素治疗血糖控制不达标的2型糖尿病患者进行治疗,评估其治疗效果。方法 5Indirect immunofluorescence0例使用门冬胰岛素30控制血糖不达标的2型糖尿病患者,随机分为观察组和对照组,各25例。对照组给予二甲双胍和阿卡波糖治疗,观察组在对照组的基础上给予达格列净治疗。比较两组患者治疗后的空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素剂量、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。结果 观察组患者FBG(6.5±2.4)GNE-140体内mmol/L、2 h PBG(10.2±3.4)mmol/L、HbA1c(7.2±0.9)%、胰岛素剂量(34.9±5.9)U/d均低于对照组Baf-A1溶解度的(8.3±3.1)mmol/L、(13.7±4.7)mmol/L、(8.5±1.0)%、(44.8±6.5)U/d,差异均具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者TC(4.2±1.5)mmol/L、TG(1.7±0.4)mmol/L、LDL-C(2.8±0.9)mmol/L均低于对照组的(5.2±1.3)、(2.1±0.5)、(3.5±1.0)mmol/L, HDL-C(1.4±0.3)mmol/L高于对照组的(1.1±0.2)mmol/L,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 达格列净对预混胰岛素治疗血糖控制不达标的2型糖尿病患者,可有效降低血糖水平,显著改善患者的血脂指标,值得临床推广应用。