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目的 观察大黄素（Emodin,ED）对脂多糖（LPS）刺激下肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）表达促凝和纤溶抑制因子的调节作用。方法 将细胞分aquatic antibiotic solution别给予不同剂量ED(0.25、0.5、1μg/mL)处理1https://www.selleck.cn/products/PLX-4720.html h后再给予LPS刺激培养24 h。检测细胞中组织因子途径抑制剂（TFPI）、组织因子（TF）、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的表达和细胞上清液中Ⅲ型前胶原肽BI 10773化学结构（PⅢP）、凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT）、抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）、活化蛋白C(APC)水平。结果 LPS刺激后细胞中TF、PAI-1的表达明显增加，TFPI表达明显减少；同时细胞上清液中PⅢP、TAT水平显著增加，AT-Ⅲ、APC水平显著减少。ED剂量依赖性降低了TF、PAI-1的表达，促进了TFPI表达（均P <0.05）；同时ED也剂量依赖性逆转了细胞上清液中PⅢP、TAT、AT-Ⅲ及APC水平的变化。免疫荧光提示LPS促进细胞核中p65表达，但这一现象被ED明显抑制。结论 ED剂量依赖性地抑制LPS刺激下AECⅡ细胞促凝和纤溶抑制相关因子的表达及分泌，其作用可能与其抑制NF-κB信号通路活化有关。

目的 探讨半胱氨酸蛋白酶抑制剂(CST1)调控Notch信号通路影响非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移和侵袭生物学行为的潜在机制。方法 通过GEPIA分析癌症基因图谱(TCGA)数据库中NSCLC组织的CST1水平。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测NSCLC细胞的CST1水平。向A549细胞转染靶向CST1的小干扰RNA序列si-CST来评估CST1对A549细胞生物MS-275小鼠学行为的影响，后续在转染si-CST基础上给予Notch通路激活剂(VPA-d4)处理来评估CST1调控Notch信号通路对A549细胞生物学行为的影响，单独给予Notch通路抑制剂(IMR-1)处理来验证Notch信号通路对A549细胞生物学行为的促进作用。CCK-8、划痕实验和Transwell小室实验检测细胞增殖、迁移和侵袭情况。qPCR和Western blotting检测Notch1、发状分裂相关增强子1(Hes1)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的水平。结果 CST1在NSCLC组中的水平高于正常组织(P<0.05),且其在H1299、H460、H1975、SPC-A1、H1650和A549细胞中的水平高于BEAS-2B细胞(P<0.05)。A549细胞转染Puromycin molecular weightsi-CST或经IMR-1处理后的增殖活力、划痕愈合率和穿膜数量较对照组细胞降低且伴有Notch1和Hes1的表达下调(P<0.05);A549细胞经si-CST和VPA-d4联Persistent viral infections合处理后的增殖活力、划痕愈合率和穿膜数量较单独转染si-CST的细胞增多且伴有Notch1、Hes1和MMP-9的表达上调(P<0.05)。结论 CST1在NSCLC组织和细胞中上调且可能通过激活Notch信号通路在NSCLC中发挥促癌作用，其有望成为NSCLC治疗的新型生物标志物和潜在治疗靶点。

目的 分析在急诊中接收的冠心病合并高血压患者当中，应用优化护理急救流程的价值。方法 对本院急诊接收的冠心病合并高血压的患者70例，择取时间范围为2021年3月至2022年2月间，开展简单随机分组处理。为对照组所纳入者开展常规护理，给予观察组所纳入者优化护理急救流程管理。将两组急救效率展开比对，同时统计组间血压控制率和血压水平。结果 就急救效率指标展开分析，其中观察组纳入患者的急诊等待、病情评估、总抢救时间均明显短于对照组（P<0.05）；观察组患者的血压控制率同对照组相比对，明显更高（P<0.05）；观察组患者护理后的舒张压指标水平、收缩压指标水平均明显低于对照组（P<0.05）。结论 在急诊冠心病合并高血压患者的护理中运用优化护理急Cobimetinib采购救流程模式所获效果AM symbioses理想，不仅可以有效提高急救效率，且可提高患Fulvestrant者血压水平控制效果。

目的：探讨低浓度二硫苏糖醇（DTT）去除CD38单抗对输血相容性检测干扰的有效性和安全性，制定合理的临床输血策略。方法：按照标准方法进行血型表型、直接抗人球蛋白试验及抗体筛查，分别用0.2、0.1、0.05、0.02、0.01和0.005 mol/L的DTT处理抗筛细胞及供者红细胞，用抗人球蛋白卡式法对CD38单抗治疗后血清进KPT-330分子式行抗体筛查及交叉配血。结果：DTT 0.01 mol/L 3Medial orbital wall7℃处理检测红细胞30 min可以去除CD38单抗对抗体筛查及交叉配血的影响，同时保留其对抗-K、抗-LW、抗SB203580采购-JMH、抗-Lu~b、抗-e、抗-Di~a及抗-Jk~a同种抗体检测的有效性。10例患者红细胞输注后均未发生急性或迟发性溶血性输血反应，血常规检测显示红细胞输注有效。结论：0.01 mol/L DTT在去除CD38单抗对输血相容性检测干扰的同时保留了对大多数同种抗体的检测能力，该方法安全有效。

目的 探讨膝关节置换术(KA)后切口愈合不良的危险因素。方法 回顾性分析2019-12—2021-11焦作市第二人民医院行KA治疗的140例患者的临床资料。按照术后切口愈合情况分为愈合良好组(122例)和愈合Laduviglusib半抑制浓度不良组(18例)。收集2组患者的年龄、性别、手术时间、手术入路等信息，对导致KA后切口愈合不良的危险因素进行单因素和多因素分析。结果 2组患者的一般资料差异无统计学意义(P>0.05)。单因素分析结果显示，年龄、止血带压力、术后抗生素使用时间与切口愈合不良相关(P<0.05);多因素Logistic回归分析结更多果显示，年龄>65岁、止血带压CWD infectivity力>55 kPa、术后抗生素使用时间>3 d是KA后切口愈合不良的独立危险因素(P<0.05)。结论 影响KA后切口愈合不良的因素较多，年龄、止血带压力过大、术后抗生素使用时间过长均是导致KA后切口愈合不良的危险因素。年龄>65岁、止血带压力>55 kPa、术后抗生素使用时间>3 d是KA后切口愈合不良的独立危险因素。明确KA后切口愈合不良的因素，采取针对性预防措施，有利于改善患者的预后。

目的：对基于半胱氨酸偶联方式的抗体偶联药物（antibody-drug conjugate，ADC）抗CD79b单抗-vc-MMAE进行一级结构表征。方法：本实验采用超高效液相色谱-串联质谱（ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry， UPLC-MS）对抗CD79b单抗-vc-MMAE的完整分子量、轻重链亚基分子量此网站以及药物抗体偶联比（drug-to-antibody ratio，DAR）进行测定；采用UPLC-MS/MS对抗CD79b单抗-vc-MMAE的序列覆盖度、偶联位点及位点占有率和糖基化位点进行分析，对抗CD79b单抗进行二硫键定位。结果：抗CD79b单抗-vc-MMAE的完整分子量包括：ADC药物的未加药形式的分子量为147.893 kDa、修饰2个小分子药物的分子量为150.527 kDa、修饰4个小分子药物的分子量为153.161 kDa以及修饰6个小分子药物的分子量为155.796 kDa；抗CD79b单抗-vc-MMAE的轻重链亚基分子量包括：轻链的分子量为23.726 kDa、轻链修饰1个小分子药物的分子量为25.043 kDKPT-330 NMRa，重链的分子量为48.778 kDa、重链修饰1个小分子药物的分子量为50.095 kDa、重链修饰2个小分子药物的分子量为51.412 kDa、重链修饰3个小分子药物的分子量为52.728 kDa；抗CD79b单抗-vc-MMAE的DAR为3.60；抗CD79b单抗-vc-MMAE的序列覆盖度为100%；抗CD79b单抗-vc-MMAneuromedical devicesE的药物偶联位点及位点占有率：轻链C218和重链C220、C226和C229的位点占有率分别为80.46%、80.39%、21.85%以及16.98%。抗CD79b单抗-vc-MMAE的糖基化位点为重链N297；抗CD79b单抗的16对二硫键全部检出。结论：表征了抗CD79b单抗-vc-MMAE的一级结构，为该类ADC药物一级结构的研究提供参考依据。

Characellide B是爱尔兰科学家Thomas组于2019年从大西洋Characella pachastrelloides海绵中分离出的脂糖三肽类化合物。其结构特点为:一个糖单元,连接了一个三肽片段和一个具有2,3-二甲基四氢吡喃环的长链烷烃。生物活性评价显示其具有较好的抗炎活性。该化合物含有十三个手性中心,全合成具有一定的挑战性。鉴于其独特的结构及良好的生物活性,我们对Characellide B(CB)进行了全合成研究,本论文首先探讨了糖基三肽片段的合成,以不对称的α糖苷化为关键反应顺利完成了糖基三肽片段的构建。接下来,selleck将此片段与本课题组王勇师兄合成的长链片段进行缩合,最后脱除保护基完成了 CB的首次全合成。通过与天然产物报道的数据进行比对,我们发现合成的CB核磁数据中苏氨酸和天冬氨酸片段的数据与文献报道的数据不一致,提示我们该天然产物结构中苏氨酸和天冬氨酸片段的构型确定可能有误。为了进一步揭示其正确结构,本论文将CB中的D-Asp-D-allo-Thr 二肽片段分别替换为 D-Asp-L-allo-Thr 和 L-Asp-L-allo-Thr 片段,继续完成了两个异构体的合成,通过数据比对发现用L-Asp-L-allo-Thr片段代替D-Asp-D-allo-Thr片段得到的异构体,其氨基酸片段部分核磁数据和天然产物的核磁数据相吻合,提示我们其D-Asp-D-allo-Thr片段应为L-Asp-L-allo-Thr片段。然而,该异构体其它位置的核磁数据与天然产物核磁数据仍有差异,其正确结构有待进一步确定。本论文对进一步揭示CB的正确结构具有一定的借鉴意义。PladienolideB(PB)是Sakai等人于2VX-445分子量004年从链霉菌Mer-11107发酵液中分离出来的十二元大环内酯类化合物,其能够靶向结合剪接因子SF3B1抑制pre-mRNA剪接发挥抗肿瘤作用,该聚酮类化合物是目前已知SF3B1剪接体抑制剂中最有效的天然产物之一。本论文对PB衍生物中间体的合成路线进行了探索。首先对β羰基磷酸酯片段的合成进行了尝试,通过三条路线探索最L02 hepatocytes终以廉价的2-甲基烯丙醇为起始原料,经过不对称aldol缩合,Sharpless双羟基化、DMP氧化等反应顺利完成β羰基磷酸酯的制备。接下来借鉴了 Maier的合成方案,利用β羰基磷酸酯与β羟基醛片段的HWE烯烃化,立体选择性的羰基还原完成了 PB衍生物中间体的合成,为后续相关PB衍生物的合成提供了参考。

研究背景:膀胱癌(Bladder cancer,BC)是全球范围内十大最常见的恶性肿瘤之一,具有高发病率、高复发率以及高死亡率的特点。根据肿瘤浸润深度,BC可分为非肌层浸润性膀胱癌(non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC)和肌层浸润性膀胱癌(muscle-invasive bladder cancer,MIBC)。虽然根治性膀胱切除术、全身化疗、靶向治疗和免疫治疗已经显著提高了BC的治疗效果,但由于高复发率和远处转移,患者总生存率仍不能令人满意。因此,探究并开发治疗BC的辅助性药物迫在眉睫。越来越多的证据表明天然化合物在治疗BC方面的潜力,穿心莲内酯(Andrographolide,Andro)是植物穿心莲中提取的二萜类内酯化合物。作为穿心莲的主要活性成分之一,它具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤等多种药理学活性。然而,Andro在BC治疗中的应用及其潜在的分子机制有待进一步研究。方法:1.通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)筛选穿心莲的有效成分及其作用靶点。同时从Gene Cards,OMIM,Pharm Gkb,TTD,Drug Bank共5个数据库检索BC相关基因。然后,将穿心莲药物靶点与BC相关基因取交集,获得交集基因,并构建蛋白互作(Protein-Protein interaction,PPI)网络,进一步筛选出核心基因。并对交集基因进行GO生物过程及KEGG信号通路富集分析。最后,利用Vina软件进行模拟使化合物Andro与核心基因AKT以最低https://www.selleck.cn/products/BafilomycinA1.html自由能结合并获得分子对接的结果。2.利用人膀胱癌细胞系(5637和T24)探究Andro单药治疗对膀胱癌细胞的作用及相关机制。体外实验利用了细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK8)实验、成克隆实验检测细胞增殖情况,流式细胞术(Annexin-V/PI双染法)检测细胞凋亡情况,细胞划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力,JC-1染色测定线粒体膜电位,蛋白印迹(Western blotting)检测PI3K/AKT信号通路关键蛋白。体内实验构建皮下荷瘤(5637细胞)裸鼠模型,6只BALB/c裸鼠被随机分为2组,分别命名为对照组及Andro治疗组。在肿瘤生长过程中给予治疗并监测肿瘤体积,对小鼠实施安乐死后剥离肿瘤并称量重量。3.利用人膀胱癌细胞BIU87与BIU87顺铂耐药株(BIU87-Cis R)探究Andro联合顺铂(Cisplatin)对BIU87-Cis R细胞株的作用及潜在分子机制。体外实验部分涉及CCK8实验、成克隆实验、流式细胞术、细胞划痕实验、Transwell实验、Western blotting以及免疫荧光染色等方法。体内实验部分构建皮下荷瘤(BIU87-Cis R细胞)小鼠模型,12只BALB/c裸鼠被随机分为4组,分别为对照组、Cisplatin治疗组、Andro治疗组以及Cisplatin+Andro治疗组,同样在肿瘤生长过程中给予对应治疗并监测肿瘤体积,对小鼠实施安乐死后剥离肿瘤并称量重量。结果:1.TCMSP数据库中符合筛选标准的穿心莲活性成分共24种,穿心莲相关靶基因共440个,符合筛选条件的有68个。从数据库Gene Cards,OMIM,Pharm Gkb,TTD,Drug Bank中得到8517个与膀胱癌有关的差异表达基因,取交集后得到58个基因。经过筛选后得到5个核心基因分别是:CDKN1A、TP53、JUN、ESR1及AKT1。选取穿心莲活性成分Andro与兴趣靶基因AKT进行分子对接,结果表明,Andro可以通过5个氢键与AKT蛋白结合口袋的LYS-276、LEU-295、SER-7、LYS-179、PHE-161氨基酸以最小自由能良好结合。2.体外实验表明,Andro预处理抑制了T24和5637细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导T24和5637细胞的内源性凋亡。并且,Andro预处理抑制了膀胱癌细胞核内p65的表达。Andro抑制T24和5637细胞中的p-AKT、p-PI3K和pm TOR水平,表明Andro通过抑制PI3K/AKTNew Metabolite Biomarkers信号传导对膀胱癌细胞发挥抗肿瘤作用。体内实验结果表明,Andro治疗抑制了裸鼠皮下膀胱肿瘤的生长,且抑制了肿瘤组织中p-AKT和p65的表达。上述结果表明Andro通过在体外和体内抑制PI3K/AKT信号通路来抑制膀胱癌进展。3.与BIU87细胞相比,BIU87-Cis R细胞的E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平下调并伴有波形蛋白(vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平的上调。对于BIU87-Cis R细胞株,相较于Cisplatin或者Andro单独治疗,联合用药能显著抑制BIU87-Cis R细胞的增殖、迁移和侵袭。Andro治疗上调了BIU87-Cis R细胞E-cadherin的表达并下调了N-cadherin以及vimentin的表达,缓解了BIU87-Cis R细胞的上皮间质转化(Epithelial-to-mesenchymal transition,EMT),这种效应在联合顺铂用药的情况下最为明显。同时,联合用药增强了Andro对BIU87-Cis R细胞内p-AKT、p-PI3K和p-m TOR的抑制作用。体内实验中,与CisplaPARP抑制剂tin单独用药相比,与Andro联合用药更能抑制顺铂耐药性膀胱肿瘤的增殖,且明显抑制了瘤组织内EMT相关蛋白及PI3K通路蛋白的表达。结论:通过网络药理学及分子对接研究我们猜测AKT基因可能是Andro治疗BC的靶基因。体内及体外实验表明,Andro通过调节PI3K/AKT信号通路抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移及侵袭,诱导其通过线粒体内源途径凋亡,减轻顺铂耐药膀胱癌细胞的EMT从而对顺铂的治疗产生协同作用。本研究为临床应用Andro作为辅助性药物治疗BC提供了一定的理论依据。

目的 分析EGLN3在肺腺癌(lung adenocarcinoma, LUAnnual risk of tuberculosis infectionAD)中的作用。方法 (1)通过癌症基因组图谱(the cancer genome atlas, TCGA)数据库下载535例肺腺癌样本和59例正常样本，分析EGLN3在肺腺癌和正常肺组织中的表达差异；(2)使用R语言分析EGLN3的表达水平及其在肺腺癌中的临床意义；(3)通过Kaplan-Meier方法、单因素和多因素COX回归分析和生存预测列线图确定EGLN3的表达水平与肺腺癌预后的关系；(4)通过基因集富集分析(GSEA)筛选EGLN3相关的生物学途径；(5)细胞实验：通过蛋白质印迹法(WB)验证EGLN3在肺腺癌细胞中是否存在差异表达；对EGLN3基因进行过表达和干扰表达，采用CCK-8增殖实验、划痕实验和Transwell侵袭实验，明确表达水平对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果 (1)EGLN3在肺腺癌组织中表达水平高于正常肺组织细胞；(2)EGLN3表达水平与肺腺癌病理分期相关，病理分期越高，对应EGLN3表达水平越高；(3)EGLN3表达水平与肺腺癌总生存期(OS)独立预后相关，EGLN3高表达肺腺癌较EGLN3低表达肺腺癌OS、疾病特异性生存期(DSS)和无进展间隔(PFI)差；(4)基因集富集分析预测EGLN3www.selleck.cn/products/ABT-263可能参与的信点击此处号通路包括激活MYC基因、上皮细胞-间充质转化(EMT)、DNA复制、细胞周期、mTORC1通路、G2/M检查点、E2F转录过程、P53信号通路等；(5)细胞实验：EGLN3在肺腺癌细胞中表达水平高于人支气管上皮样细胞；CCK-8增殖实验、划痕实验和Transwell侵袭实验显示，EGLN3过表达促进肺腺癌细胞增殖、侵袭和迁移，EGLN3干扰表达抑制肺腺癌细胞增殖、侵袭和迁移。结论 EGLN3在肺腺癌细胞中存在高表达，提示肺腺癌预后不良，可作为肺腺癌预后的预测因素。EGLN3表达可促进肺腺癌细胞增殖、侵袭和迁移。

目的：基于自噬-凋亡互作蛋白Beclin 1，探究康艾注射液逆转人肺腺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的分子机制。方法：(1)应用Kaplan-Meier Plotter在线工具分析Beclin 1与肺癌患者生存期的关系。(2)CCK-8法检测顺铂、康艾及康艾联合顺铂对A549（顺铂敏感的亲本细胞）和A549/DDP（顺铂耐药细胞）细胞增殖活性的影响。(3)Western blot法检测自噬相关蛋白（Beclin 1、ATG7、LC3）和凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3）的表达水平。结果：(1)应用Kaplan-Meier Plotter在线工具对BECN1 mRNA表达水平和临床病理学指标分析显示，BECN1高表达组生存期显著高于BECN1低表达组，肺腺癌组织BECN1表达水平与患者预后呈显著正相关（P<0.001）。(2)A549/DDP细胞的Beclin 1蛋白表达量比A549细胞高（P<0.05）。(3)与对照组比较，顺铂上调了A549和A549/DDP细胞的Beclin 1、ATG7、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ表达（P<0.05,P<0.01,P<0.001）。在A549细胞中，顺铂干预后Bax、cleaved caspase-3表达增加（P<0.01,P<0.001）,Bcl-2表达下降（P<0.01），且Bax/Bcl-2比值上调（P<0.01）；在A549/DDP细胞中，顺铂干预后Bax、Bcl-2表达增加（P<0.05,P<0.01），但Bax/Bcl-2比值下降（P<0.05）。(4)与顺铂组比较，低、中、高浓度康艾注射液联合顺铂均能显著抑制A549/DDP细胞增殖活性（P<0.01,P<0.001），顺铂+低浓度康艾组Beclin 1表达降低（P<0.001），顺铂+中、高浓度康艾组Beclin 1表达增加（P<0.001），且顺铂+高浓度康艾组表达增加量最多（P<0.001）。(5)与顺铂组比较，低、中、高浓度康艾注射液联合顺铂均可上调ATG7(P<0.05,P<0.01)、LC3Ⅰ（P<0.01,P<0.001）、LC3Ⅱ（P<0.01,P<0.001）表达水平，且与康艾注射液的浓度升高呈正相关。Bax表达在顺IgG2 immunodeficiency铂+康艾低浓度组中降低（P<0.05），在顺铂+康艾中、高浓度组中增加（P<0.01）;Bcl-2表达在顺铂+康艾低、中浓度组中降低（P<0.05），在顺铂+高浓度康艾组中增加（P<0.05）;cleaved caspase-3表达与Bax/Bcl-2比值在顺铂+康艾低、中、高浓度组中均上调（P<0.05,P<0.01,P<0PLX4032溶解度.001），且cleBMN 673aved caspase-3表达与康艾注射液浓度升高呈正相关。结论：康艾注射液能有效改善A549/DDP细胞顺铂耐药性，其机制可能为上调Beclin 1蛋白表达水平，调控Beclin1介导下的细胞自噬与凋亡互作，从而导致A549/DDP细胞自噬性死亡与凋亡。