目的 探讨转谷氨酰胺酶-2(TG2)在紫癜性肾炎(HSPN)病儿中的表Nirogacestat达及其意义。方法 选取过敏性紫癜(HSP)病儿91例作为研究对象，根据是否并发肾脏损伤，分为HSPN组(39例)和非HSPN组(NHSPN组，52例);另选取同期体检的30例健康儿童作为正常对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测各组儿童血清及尿液中TG2的水平，并对HSPN组病儿尿液TG2水平与血清TG2水平、24 h尿蛋白定量进行相关性分析；利用受试者工作特征(ROC)曲线评估尿液TG2水平对HSPN的诊断效能。结果 HSPN组、NHSPN组及对照组儿童血清TG2水平差异无显著性(P>0.05),HSPN组病儿尿液TG2水平明显低于对照组及NHSPN组(t=4.906、6.944,P<0.01);HSPN组病儿尿液TG2水平与24 hgut micobiome尿蛋白定量呈负相关(r=-0.89,P<0.05)。ROC曲线分析显示，尿液TG2水平诊断HSPN的曲线下面积为0.857,95%置信区间为0.767～0.948;HSP病儿尿液TG2诊断HSPN的最佳阈值为0.32μg/L,此时其诊断灵敏度为0.795,特异度为0.892。结论 HSPN病儿尿液TG2水平明显降低，且与24 h尿蛋selleck产品白定量呈负相关；尿液TG2可作为早期诊断和预测HSP并发肾损伤的有效指标。
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复方嗜酸乳杆菌联合四联疗法在幽门螺杆菌感染治疗中的价值
目的 观察复方嗜酸乳杆菌联合常规四联疗法在治疗幽门螺杆菌（helicobacter pylori,Hp）感染中的作用。方法 选取2021年7-12月北京市朝阳区劲松、团AM-2282供应商结湖、香河园、大屯社区卫生服务中心和北京京北医院收治的1 000例Hp感染患者作为研究对象，将团结湖和劲松社区患者纳入观察组，香河园社区、大屯社区和京北医院患者纳入对照组，每组500例。对照组采用治疗HpSalmonella infection的标准四联疗法（阿莫西林胶囊1 000 mg/次、2次/d；克拉霉素片500 mg/次、2次/d；艾普拉唑肠溶片5 mg/次、2次/d；枸橼酸铋钾片220 mg/次、2selleckchem Q-VD-Oph次/d），观察组在四联疗法的基础上加用复方嗜酸乳杆菌片1 g/次、2次/d治疗。比较两组停药1个月后Hp根除率、停药1年后Hp复发率、临床症状改善情况、用药后不良反应情况。结果 观察组总有效率为91.80%，高于对照组的86.80%，差异有统计学意义（P<0.05）；观察组总不良反应发生率为10.20%，低于对照组的21.60%，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组Hp根除率为86.40%，高于对照组的80.40%，差异有统计学意义（P<0.05）；观察组Hp复发率为1.60%，低于对照组的3.00%，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 常规四联疗法加用复方嗜酸乳杆菌治疗不仅可减轻药物不良反应、改善消化系统症状，且可提高根除率、降低复发率。
m~6A相关基因在激素性股骨头坏死中的生物信息学分析
背景：m~6A修饰与股骨头坏死的发生发展相关，但在激素性股骨头坏死中的作用尚不清楚。目的：基于GEO数据库，采用生物信息学方法分析激素性股骨头坏死中表达差异的m~6A基因及互作miRNAs，探寻其潜在发病机制。方法：在GEO数据库中检索并下载与激素性股骨头坏死相关的mRNA表达谱数据集(GSE123568)，通过R软件对数据集进行差异基因筛选及GO功能、KEGG通路富集分析。识别差异基因中的m~6A差异表达基因(m~6A-DEGs)并对其进行GO功能与KEGG通路富集分析，比较m~6A-DEGs的表达量并分析它们之间的相关性。最后通过Cytoscape构建m~6A-DEGs的PPI互作网络及筛选核心基因。使用TargetScan,miRTarBase和miRBD数据库预测m~6A-DEGs相关的潜在miRNAs，同时使用ChIPBase及hTFtarget数据库预测7个核心基因潜在转录因子，然后分别构建m~6A-miRNA与转录因子m~6A调控网络。最后使用数据集GSE74089验证7个核MLN8237 IC50心m~6A-DEGs的表达水平。结果与结论：(1)从数据集中共筛选出2 460个差异表达的基因，其中1 455个上调，1 005个下调。(2)从数据集中筛选出了14个m~6A-DEGs，包括3个下调和11个上调基因，m~6A-DEGs在激素性股骨头坏死中的表达具有显著差异(P <0.05),Spearman分析表明它们之间具有一定相关性。(3)m~6A-DEGs的GO和KEGG富集分析主要集中在骨髓细胞分化与发育、免疫受体与细胞因子受体活性、破骨细胞分化、AMPK与白细胞介素17信号通路。(4)m~6A-DEGspiezoelectric biomaterials前7个核心基因包括YTHDF3,YTHDF1,YTHDF2,ALKBH5,METTL3,HNRNPA2B1及HNRNPC，它们在miRTarBase,miRDB和TargetScan数据库中共有44个miRNA重叠，在ChIPBase及hTFtarget数据库中共有79个重叠转录因子。(5)在GSE74089数据集中有6个核心m~6A-DEGs的表达水平与GSE123568数据集一致。(6)结果证实，根据生物信息学方法筛选的7个m~6A-DEGs可能通过调控多个miRNA、转录因子和AMPK及白细胞介素17信号通路表达，进而影响激素性股骨头坏死中骨髓细胞分化发育与破骨细胞分化，为进一步深入研RepSox临床试验究激素性股骨头坏死的发病机制和靶向治疗提供了数据支持和研究方向。
青黛通过ERK/p38 MAPK/MEK信号通路对湿热内蕴型溃疡性结肠炎大鼠抗炎修复和免疫功能的影响
目的 探讨青黛对湿热内蕴型溃疡性结肠炎大鼠抗炎修复和免疫功能的影响，并探讨其机制。方法 60只大鼠随机分为6组，分别为对照组、模型组、青黛低剂量组、青黛中剂量组、青黛高剂量组以及柳氮磺胺吡啶（SASP）组、每组10只。青黛低、中、高剂量组分别ig 0.6、1.2、2.4 g/kg青黛悬Chronic medical conditions浊液，SASP组ig 500 mg/kg柳氮磺吡啶悬浊液，对照组、模型组ig等体积生理盐水。检测各组大鼠血清白细胞介素（IL）-4、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-MCC950α)含量；流式细胞术检测外周血单个核细胞（PBMC）中CD4~+、CD8~+T淋巴细胞百分率；放射免疫法检测超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平；荧光实时定量PCR法检测蛋白激酶（ERK）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）和MEK mRNA相对表达；免疫印迹法检测ERK、p38 MAP确认细节K和MEK蛋白表达。结果 与对照组相比，模型组大鼠血清中IL-4、IL-10降低，TNF-α升高，PBMC中CD4~+、CD8~+T淋巴细胞含量降低，大鼠结肠组织中ERK、p38 MAPK mRNA和蛋白表达升高、MEK mRNA和蛋白表达降低（P<0.05）；与模型组相比，青黛低、中、高剂量组大鼠血清中IL-4、IL-10升高，TNF-α降低，PBMC中CD4~+、CD8~+T淋巴细胞升高，ERK、p38 MAPK mRNA和蛋白表达降低，MEK mRNA和蛋白表达升高（P<0.05），青黛低、中、高剂量组间比较差异存在统计学意义（P<0.05）。对照组肠组织结构完好，模型组结肠肠壁糜烂、溃疡形成，炎症明显；青黛低剂量组仍伴随较大溃疡形成及炎症浸润；青黛中剂量组肠壁轻微增厚；青黛高剂量组与SASP组肠壁结构尚完整，有极少量炎症细胞浸润。结论 青黛能够降低湿热内蕴型溃疡性结肠炎大鼠机体内炎症因子的产生，抑制炎症反应，促进免疫功能的恢复，其机制与调节ERK/p38 MAPK/MEK信号通路有关。
含有酸刻蚀埃洛石纳米管/丁香精油混合负载物的PBAT/PPC复合薄膜制备及其对海鲈鱼保鲜应用研究
随着人民生活水平的提高,人们对新鲜水产品的需求越来越大,水产品养殖、加工、运输和保鲜等产业迅猛发展。但水产品本身含有丰富的蛋白质和脂肪,极其容易滋生细菌,发生水分流失和蛋白质降解,为了更好的满足水产品保鲜的需求,大多采用活性抑菌材料包装水产品,尤其是以可降解材料为基材的包装材料,具有优良的生物降解性,已经成为很多selleck合成传统塑料的替代品。因此,本课题主要以聚己二酸/对苯二甲酸丁二醇酯(poly(butylene adipate-co-terephthalate),PBAT)和聚碳酸亚丙酯(poly(propylene carbonate),PPC)为成膜基材,研究PBAT和PPC不同共混比例对PBAT/PPC复合薄膜性能的影响,筛选得综合性能较好的薄膜;再以埃洛石纳米管(HNTs)为载体,对其进行酸刻蚀处理,制备了含丁香精油或酸刻蚀埃洛石纳米管/丁香精油混合负载物的PBAT/PPC抗菌复合薄膜,并研究了它们对薄膜性能的影响;最后将薄膜应用于海鲈鱼包装,研究薄膜对海鲈鱼保鲜效果的影响。首先以PBAT为基材,研究PBAT和PPC不同共混比例对PBAT/PPC复合薄膜性能的影响。结果表明,PPC的加入提高了薄膜的亮度,使薄膜略呈红黄色趋势,扫描电镜的结果显示,各组薄膜表面光滑平整,随着PPC的加入,分散相颗粒的数量和尺寸逐渐增多、增大,截面变得粗糙。随着PPC含量的增加,薄膜抗拉强度略有下降,断裂伸长率显著降低(p<0.05),弹性模量显著升高(p<0.05),表明薄膜强度和延展性随着PPC含量的增加而逐渐降低,薄膜刚性则逐渐增强。PPC的加入提高了薄膜的气体阻隔性能,薄膜的氧气和水蒸气透过率降低,这可能是由于当气体扩散通过薄膜时,PPC材料对气体扩散的阻碍作用要大于PBAT材料,从而提高了PBAT共混薄膜的气体阻隔性。FTIR图显示随着PPC的加入,PBAT结晶区的C-O振动吸收峰和PBAT非结晶区C=O的振动吸收峰减弱,原因与PBAT基体中的氢键作用力有关,加入PPC则削弱了PBAT基体中的氢键作用力。当PPC含量达到30%时PPC打破基体原有的连续相和作用力,PPC取代了部分PBAT形成的氢键,PBAT分子间的氢键数目减少,PPC与PBAT间的氢键数目增多。在以上研究的基础上,确定PBAT/PPC(7:3)为薄膜材料,研究了含丁香精油或酸刻蚀埃洛石纳米管/丁香精油混合负载物对PBAT/PPC复合薄膜性能的影响。首先对埃洛石纳米管(HNTs)酸刻蚀处理,将丁香精油与酸刻蚀HNTs负载混合,得到了酸刻蚀埃洛石纳米管/丁香精油混合负载物。Biogenic Materials丁香精油和HNTs/丁香精油混合负载物的加入,使薄膜呈现黄绿色趋势,薄膜透明性和气体阻隔性有所下降,薄膜对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和腐败希瓦氏菌呈现良好的抗菌性。相对于添加丁香精油的薄膜,含HNTs/丁香精油的薄膜的抗拉强度和气https://www.selleck.cn/products/BAY-73-4506.html体阻隔性增加。同时,HNTs有利于促进丁香精油在薄膜中的分散,在一定程度上减缓了丁香精油的释放。因此,酸刻蚀HNTs/丁香精油混合负载物赋予PBAT/PPC薄膜良好的抗菌性,对薄膜中丁香精油具有一定的缓释效果。最后,将不含丁香精油的薄膜(PBAT/PPC)、含丁香精油的薄膜(PBAT/PPC/clove)和含酸刻蚀埃洛石纳米管/丁香精油混合负载物的薄膜(PBAT/PPC/HNTs-4M-clove)三种薄膜应用于海鲈鱼包装,研究了薄膜对海鲈鱼贮藏保鲜效果的影响。测定了指示海鲈鱼新鲜程度的各项指标,感官评价的结果表明,每组鱼肉的感官评分均有不同程度的下降,同一时期的感官评分为:PBAT/PPC
参氢补剂对越野滑雪运动员抗疲劳能力的影响
研究目的:竞技体育竞争日益激烈,高强度、大运动量的训练仍然是运动员提高竞技能力的首选手段。运动员在长期训练期间和比赛过程中面临的诸多伤病,往往与运动疲劳没有得到充分恢复有关。因此,寻找与开发能延缓运动性疲劳、促进身体机能快速恢复、防治组织损伤且安全、有效的非兴奋剂物质已成为国内外体育科学、医学等领域关注的焦点。人参作为公认的上品补益类药材,具有调节机体免疫功能、提高机体抗炎能力、抗中枢神经递质紊乱、调节糖代谢、减少乳酸堆积等功效。在动物实验中,人参及其活性成分的抗疲劳功能已得到充分验证,但其在人体应用中的抗氧化、抗疲劳功效尚未得到充分证明。而富氢产品作为新型的抗氧化补剂,在改善运动能力和治疗与氧化应激及炎症有关的病症方面具有显著疗效。其主要原因是氢气作为最小的气体分子,可直接通过细胞膜进入细胞器,既可以选择性地减少机体代谢过程中产生的氢氧根等强氧化物质,又不干扰机体代谢过程中的氧化还原反应,不影响信号中的活性氧等物质。通过呼吸氢气或饮用、注射含氢液体——氢水,可治疗缺血Y-27632抑制剂再灌注损伤、神经损伤、器官炎症等多种慢性氧化应激损伤。因此,人参与富氢产品具有较为显著的功能性优点,为进一步明确其增强机体运动机能、改善运动性疲劳的效果,开发设计参氢泡腾片产品。本研究通过观察冬季项目运动员补充参氢泡腾片后血液生化指标和心率的变化特点,以评价参氢泡腾片抗运动性疲劳、抗氧化应激等方面的功效。为运动饮料的研发开拓新的视角与途径,为参氢产品的应用提供可行性论证与推广依据。研究方法:26名跨界跨项越野滑雪运动员分为实验组(TG组)和对照组(CG组),TG组每天上午和下午训练课期间各饮用一次参氢泡腾水(1克/粒/350mL),CG组摄入等量维生素C水(1克/350mL),连续服用4周,记录试验期间的晨脉、安静时心率和运动后心率;在试验前(W0)和试验后(W5)对受试者的体成分进行测评,在试验前(W0)、中(W3)、后(W5)的周一进行晨起采集血液样本,分析血常规、疲劳状态、炎症反应、氧化应激等指标的变化;采用双因素重复测量方差分析,考查营养干预与测试时间两因素对体成分和血液生化等指标的影响效应。研究结果:与CG组相比,补充参氢泡腾片补剂4周之后TG组的体重、瘦体重及体脂率并无显著差异;与试验前相比,试验中的CG组和TG组的大型血小板细胞数(P-LCC)、比率(P-LCR)及血小板压积(PCT)均显著地升高(P <0.05);TG组的血小板含量(PLT)亦显著升高(P <0.05)。在试验中,TG组的白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEU)、淋巴细胞(LYM)、单核细胞(MON)、红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)明显低于CG组(P <0.05);各组的平均血小板体积(MPV)均显著高于试验前(P <0.01)。在试验后,CG组的RDW-CV、PCT、P-LCC、和P-LCR均明显高于试验前(P<0.05);TG组的红细胞分布宽度-标准偏差(RDW-SD)、RDW-CV、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、P-LCR、MPV和LYM含量均显著高于试验前(P<0.05),MCHC显著低于实验前(P<0.05);TG组的RDW-SD、RDW-CV、LYM、MON和MON%显著高于试验中(P <0.05),PLT显著低于实验中(P<0.05)。试验期间,TG组与CG组的睾酮(T)、皮质醇(Cor)、T/Cor、血尿素(BUN)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酐(Cr)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)均无显著差异(P>0.05);与试验前相比,试验中各组的ALB和MYO显著降低(P<0.05),血糖(GLU)均显Staphylococcus pseudinter- medius著升高,且实验中的CG组的GLU显著高于TG组(P<0.05);与试验中相比,试验后各组的GLU显著下降,且TG组降低效果更为显著(P<0.05);试验期间,各组CK均呈现明显的下降趋势,而各组的BUN、ALB、TP、MYO具有先下降后回升的变化趋势。与试验前相比,试验中各组的白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)均显著降低(P<0.05),试验后各组都有所回升;在试验前,TG组的IL-6和TNF-α均高于CG组,而在试验中低于CG组;且在试验中和试验后,TG组中IL-6、TNF-α的变化幅度大于CG组;试验期间,各组TNF-α和IL-6也均具有先下降后回升的变化趋势。TG组与CG组的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)无显著性差异(P>0.05),试验前、中、后三个采集点之间亦无显著性差异(P>0.05);但是在试验期间,TG组的SOD和GSH-Px均呈上升趋势,而CG组多趋于下降。TG组与CG组的晨脉拟合曲线斜率分别为-0.11和-0.06,试验前与试验后相比拟合值分别下降3.85 n/s和2.23 n/s;TG组与CG组的运动后心率拟合曲线斜率分别为-0.2和-0.01,试验前与试验后相比拟合值分别下降7 n/s和0.44n/s;TG组与CG组的安静心率拟合曲线斜率分别为-0.1和-0.11,试验前与试验后相比拟合值分别下降3.47 n/s和3.7n/s。研究结论:在训练过程中,运动员服用四周维生素C和参氢泡腾片均有促进身体机能恢复、缓解运动性疲劳的作用,而参氢泡腾片的效果更为明显。与维生素C相比,补充参氢泡腾片对运动员的MCHC含量、血小板稳态、改善红细胞老化、血液粘稠等方面有着更好的调节作用,对血细胞的数量及功能有更好的改善作用。此外,相较于维生素C补剂,参氢泡腾片可以更加明显地提高运动员机体的抗氧化能力,更大幅度地下调炎性因子,对运动员晨脉和运动后心率亦有更明显的降低作用。综上,参氢泡腾片对促进运动性疲劳的恢复和良好机能状态的保持有着更好的效果。今后的研究中可适当延长参氢服用时间,设置不同的服用BMN 673说明书剂量和剂型;同时,加大样本量,以更好地观察参氢对人体的作用效果。
替格瑞洛联合急诊PCI对急性心肌梗死的效果研究
目的 分析替格瑞洛配合急诊PCI治疗急性心肌梗死(acute myocardial infarction, AMI)的效果。方法 选取2019年5月至2021年6月河南省人民医院急诊内科收治的AMI患者84例，均予以急诊PCI治疗，随机分为研究组和对照组各42例，对照组应用氯吡格雷治疗，研究组应用替格瑞洛治疗，比较两组效果。结果 研究组总有效率95.24%,高于对照组的73.81%(P<0.05);治疗前两组肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、血清超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein, hs-CRP)水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后IL-6、TNF-α和hs-CRP水平均降低，且研究组IL-6、TNF-α和hs-CRP水平分别为(0.79±0.23)μg/L、(18.76±3.29)ng/L和(3.28±0.75)μg/L,均低于对照组(P<0.05);治疗前两组左室舒张Telaglenastat小鼠末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)以及左室射血分数(LVEF)等心功能指标比较无统计学意义(P>0.05),研究组治疗后的LVEDD(53.45±3.87)mm、LVESD(36.18±3.62)mm,均低于对照组，LVEF(48.59±4.05)高于对照组(P<0.0medical school5);治疗前两组丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、超氧化物歧化酶(SOD)等氧化应激指标比较差异无统计学意义(P>0.05),研究组治疗后MDA(4.05±0.67)mmol/mL,低于对照组，GSH-Px和SOD为(254.76±39.83)IU/L、(73.75±9.42)IU/mL,均高于对照组(P<0.05);研究组中发生不良事件2例，分别为心动过缓和出血，总发生率为4.76%,低于对照组的19.04%(P<0.05)。结论 替格瑞洛配合急诊PCI治疗能够显著增强疗效，缓解患者炎性反应及并降低氧化应激水平，促进患者获悉更多心功能恢复，且安全性良好。
人原代单核细胞经地塞米松刺激后的吞噬功能及转录组变化研究
背景 噬血淋巴组织细胞增多症(hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH)是由于多种原因导致的过度的全身性炎症反应和器官功能障碍，高剂量的地塞米松常用于抑制炎症，血清可溶性VSIG4(sVSIG4)可作为评估巨噬细胞活化的标志物用于诊断HLH。目的 探究地塞米松刺激人原代单核细selleck Bafilomycin A1胞高表达VSIG4后的吞噬功能及基因转录表达变化，并筛选关键表达基因和通路。方法 体外分离人外周血单个核细胞，使用磁珠分选法阳选出CD14+单核细胞，加入地塞米松刺激，使用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time Quantitative PCR,qPCR)、流式细胞术和蛋白免疫印迹(Western Blot)分别在m RNA和蛋白水平上检测VSIG4的表达，并用Western Blot检测细胞培养上清中sVSIG4的表达量，在地塞米松刺激VSIG4表达的同时检测单核细胞吞噬功能；利用RNA-seq对地塞米松刺激前后的人原代单核细胞差异基因进行测序，并进行KEGG通路富集和蛋白质互作分析，通过节点分析找到hub基因和关键信号通路。结果 体外地塞米松刺激单核细胞在m RNA和蛋白水平促进VSIG4表达上调(P<0.01)，具有剂量依赖性和时间依赖性；地塞米松刺激的单核细胞过表达VSIG4会发生胞外段剪切生成sVSIG4；地塞米松刺激的VSIG4+的单核细胞吞噬作用增强(P<0.01)。RNA-seq差异分析中，共有491个差异表达基因，其中上调159个，下调332个；PUN30119分子量KEGG通路富集显示差异基因主要集中在EB病毒感染、新冠病毒感染、补体和凝血级联反应、NOD样受体信号通路、嘧啶代谢、C型凝集素受体信号通路、吞噬小体、金黄色葡萄球菌感染、I型糖尿病、RIG-I样受体信号通路、Toll样受体信号通路等信号通路(P<0.05)population precision medicine；从PPI网络确定了20个hub基因。结论 体外地塞米松刺激人原代单核细胞可以促进VSIG4表达上调，同时生成sVSIG4,VSIG4+的单核细胞可能具有更强的吞噬功能。转录组分析提示部分炎症相关基因和信号通路可能与VSIG4的表达调控和噬血淋巴组织细胞增多症的发病机制有关。
不同浓度CBD对运动疲劳大鼠骨骼肌中氧化应激反应的影响
研究目的:运动疲劳是指机体在运动过程中不能持续在一特定水平和/或不能维持预定的运动强度。随着竞技体育技术的发展,适宜的运动疲劳也日益成为运动员成绩提高的必要过程之一;运动可提高机体的氧化应激水平,研究表明力竭运动时机体会产生过多的自由基(ROS),氧化应激水平提高,产生大量不稳定的强氧化性物质,包括O2-、过氧化氢和羟自由基(-OH)等。缓解运动疲劳、延缓运动疲劳的产生,一直是科研人员研究的热点。工业大麻是指神经致幻成瘾毒性成分THC(四氢大麻酚)含量低于0.3%的大麻,不能作毒品提取原材料;CBD(cannabidiol,大麻二酚)是工业大麻中大麻素类成分之一,是一种氧化剂和神经保护剂,同时具有一定的抗炎效果,且不具有成瘾性;研究表明,CBD对机体炎症反应和氧化应激反应具有较好的修复功能。现在关于CBD剂量对运动疲劳产生氧化应激作用机制较少。本研究探讨不同浓度CBD对运动疲劳大鼠骨骼肌中氧化应激反应的影响,明确适宜的CBD干预浓度。为大麻二酚干预运动疲劳提供科学理论依据,以期为CBD在医药、食品和保健品行业的应用提供理论支撑。研究方法:本研究选取36只SPF级雄性SD大鼠,体重为165-200g。所有动物分笼饲养,室温维持在22±4℃,光照按照自然环境给予。在动物饲养期间,所有大鼠自由摄入食物和水。随机进行分组,每组选取6只大鼠,分组设置为:空白对照组(CK),运动椰子油组(YZ)、运动对照组(DZ)、运动50mg/kg组(50)、运动60mg/kg组(60)、运动70mg/kg组(70)。适应性训练后,构建渐增负荷游泳运动大鼠疲劳模型,共计运动9天。具体游泳方案如下:第1-2天,分别游泳30min,第3天游泳60min,第4天游泳90min,第5天游泳120min,第6天游泳150min,第7天游泳180min,第8天游泳190min,第9天200min到力竭。在运动疲劳造模结束后对灌胃组大鼠进行不同浓度CBD灌胃。在运动疲劳造模的最后一天,对运动各组大鼠运动力竭时间进行记录。抽取血液,制备血清样品,左侧腓肠肌用10%固定液固定,用作透射电镜成像;右侧腓肠肌利用液氮速冻,保存于-80℃冰箱,用于后续试验。(1)利用透射电子显微镜对不同组别大鼠骨骼肌组织超微结构进行观察。将骨骼肌组织从戊二醛固定液中取出,首先用0.1mol/L的磷酸缓冲液冲洗,再用体积分数为1%的锇酸固定,然后用0.1mol/L的磷酸缓冲液再次冲洗,之后进行脱水处理(乙醇溶液的体积分数为50%、70%、90%、100%),然后用环氧树脂将其包埋,再将其纵切制成超薄切片,待样品干燥后采用透射电镜观察线粒体的超微结构。(2)用比色法检测大鼠血清中SOD、CAT和GSH-Px酶的含量,按南京建成试剂盒说明书对各组大鼠血清中CAT、SOD、GSH-Px含量进行测定。了解不同浓度CBD对运动疲劳大鼠血清中氧化应激反应的影响。(3)运用qPCR技术对大鼠骨骼肌中氧化应激相关基因SOD、CAT和GSH-Px表达情况进行分析,将骨骼肌样本剪碎放入TRIzol溶液,按照全式金试剂盒说明书操作提取RNA。符合标准的RNA按说bioactive glass明书反转录为c DNA。使用NCBI网站设计引物,引物序列详见表2。使用两步法对c DNA产物进行扩增,退火温度设计为58℃,扩增次数为40次。GAPDH基因表达量和对照组基因表达量分别作为内对照和参考。所有样本均三次重复。采用SPSS 19.0软件对实验数据进行ANCOVA检验,生物复制三个相对量的平均值采用Students检验,95%置信水平(P<0.05)确定基因表达显著性。摸清不同浓度CBD对运动疲劳大鼠血清中氧化应激反应相关基因的表达情况。(4)用Western blot检测不同浓度CBD干预下运动疲劳大鼠骨骼肌AMPK、PGC1-α蛋白表达。通过以上研究找寻适宜的CBD浓度对运动疲劳大鼠干预较好的效果。研究结果:CBD可以帮助加速运动疲劳恢复,在不同剂量的干预中呈现量效关系。在70mg/kg的干预下,最后一次力竭运动时间高于60mg/kg(P<0.05),50mg/kg(P<0.05)。(1)不同剂量CBD对运动疲劳大鼠骨骼肌微细结构影响结果显示,经过CBD干预后,肌节完整、线粒体正常,并且70组明显好于60组与50组,在没有CBD干预的组别中GSK1349572,呈现Z线扭曲,线粒体肿胀等。(2)不同剂量CBD对运动疲劳大鼠血清氧化应激相关指标影响的结果显示,药物剂量与氧化应激水平呈反比,SOD、GSH-Px、CAT水平与药物剂量呈正比,运动疲劳使大鼠骨骼肌中SOD显著降低(P<0.05或P<0.01)。经过CBD干预后血清SOD明显升高(P<0.05或P<0.01),并且呈现剂量递增效应。CBD可改善氧化应激造成的CAT下降(P<0.05或P<0.01)。CBD可以增加血清GSH-Px表达(P<0.05)。(3)对不同剂量CBD对运动疲劳大鼠骨骼肌氧化应激相关基因表达分析显示,与血清氧化应激研究结果类似,CBD干预的组别中SOD分泌增加(P<0.05)在与50组比较中,70组呈极显著增加(P<0.01)。CBD可以显著改善氧化应激导致的GSH-Px减少,在CBD干预的组别中,GSH明显高于YZ组(P<0.05),70组呈现极显著差异(P<0.01)。CBD可以提高CAT基因表达量,在70组相比较于DZ组(P<0.01)显著提升了CAT基因表达量。同时运动导致GSH-Px显著降低(P<0.05)。(4)对不同剂量CBD对运动疲劳大鼠骨骼肌中AMPK、PGC1-α蛋白的影响检测结果,寻找更多表明在进行运动疲劳干预后,运动大鼠的AMPK、PGC1-α蛋白表达提升,而经过CBD干预后,AMPK和PGC1-α表达显著提升(P<0.05),与50组相比70组AMPK、PGC1-α蛋白表达明显升高(P<0.05),与DZ组相比70组AMPK、PGC1-α蛋白表达量呈现极显著升高(P<0.01)。研究结论:1.CBD可以保护运动疲劳大鼠骨骼肌超微结构免受损伤。2.CBD可以改善疲劳大鼠骨骼肌中氧化应激情况,并且呈现剂量递增效应。
基于麝香酮对大鼠心肌细胞凋亡的影响探讨辛温通络法治疗糖尿病心肌病的作用机制
目的 观察麝香酮调控脂肪酸合成酶(Fas)/脂肪酸合成酶配体(FasL)信号通路对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌细胞凋亡的影响，探讨陈树泉“辛温通络”理论治疗DCM的作用机制。方法 将SD大鼠分为空白组、DCM组、麝香酮低剂量组(0.68 mg/kg麝香酮)、麝香酮高剂量组(2.72 mg/kg麝香酮)、二甲双胍组(140 mg/kg二甲双胍)、麝香酮高剂量+重组人FasL蛋白(rh-FasL)组(2.72 Talazoparib价格mg/kg麝香酮+0.017 mg/kg rh-FasL),每组12只。除空白组外，其他组均采用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素方式构建DCM大鼠模型，建模成功后，给药1次/d,持续6周。末次处理结束后，检测各组大鼠空腹血糖、左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS);采用苏木素-伊红(HE)染色法、Masson染色法分别检测心肌组织病理损伤及纤维化程度routine immunization；采用分光光度法检测心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量；采用TUNEL染色法观察心肌细胞凋亡情况；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测心肌组织中裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Fas、FasL蛋白表达。结果 与空白组比较，DCM组大鼠心肌组织病理损伤严重，空腹血糖、MDA含量、心肌胶原面积分数、心肌细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、Bax、Fas、FasL蛋白表达升高，LVEF、LVFS、SOD活性降低，差异有统计学意义(P<0.05);与DCM组比较，麝香酮低剂量组、麝香酮高剂量组、二甲双胍组大鼠心肌组织病理损伤减轻，空腹血糖、MDA含量、心肌胶原面更多积分数、心肌细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、Bax、Fas、FasL蛋白表达降低，LVEF、LVFS、SOD活性升高，差异有统计学意义(P<0.05);与麝香酮低剂量组比较，麝香酮高剂量组、二甲双胍组大鼠心肌组织病理损伤减轻，空腹血糖、MDA含量、心肌胶原面积分数、心肌细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、Bax、Fas、FasL蛋白表达降低，LVEF、LVFS、SOD活性升高，差异有统计学意义(P<0.05);与麝香酮高剂量组比较，麝香酮高剂量+rh-FasL组大鼠心肌组织病理损伤加剧，空腹血糖、MDA含量、心肌胶原面积分数、心肌细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3、Bax、Fas、FasL蛋白表达升高，LVEF、LVFS、SOD活性降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 麝香酮可能通过抑制Fas/FasL通路抑制DCM大鼠氧化应激及心肌细胞凋亡。