人参皂苷Rg1通过miR-144/Nrf2/ARE通路对糖尿病大鼠肝损伤的影响

目的 探究人参皂苷(G)-Rg1通过微小RNA(miR)-144/核因子E2相关因子(Nrf)2/抗氧化反应元件(ARE)通路对糖尿病(DM)大鼠肝损伤的影响。方法 将大鼠随机分成control组、模型(model)组、二甲双胍(MET)组(100 mg/kg MET)组、G-Rg1-L(10 mg/kg G-Rg1)组、G-Rg1-H(30 mg/kg G-Rg1)组、G-Rg1-H+mimics NC组、G-Rg1-H+miR-144 mimics组、G-Rg1-H+miR-144 mimics+Nrf2激活剂(Hesperin组(10 mg/kg Hesperin)各10只;除control组外,其余组通过高脂高糖饲料喂养及链脲佐菌素(STZ)腹腔注射构建DM模型,并灌胃相应剂量MET或G-Rg1,尾静脉注射相应剂量mimics NC、miR-144 mimics慢病毒液,腹腔注射相应剂量Hesperin, control组、Core functional microbiotasmodel组灌胃、尾静脉及STM2457浓度腹腔注射等剂量生理盐水,共为期8 w。血糖测试仪及全自动生化分析仪检测血糖、肝功能指标;丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测血清中二者含量;苏木素-伊红(HE)及过碘酸-雪夫(PAS)染色观察肝组织病理形态及糖原含量变化;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)及WFulvestrantestern印迹分析肝组织中miR-144、血红素加氧酶(HO)-1及Nrf2 mRNA及蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-144与Nrf2的靶向关系。结果 与control组比,model组空腹血糖(FBG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、MDA水平、肝组织病理程度、miR-144表达显著增加,SOD含量、糖原数量、HO-1及Nrf2 mRNA及蛋白表达显著减少(P<0.05);与model组比,MET组、G-Rg1-L组、G-Rg1-H组FBG、ALT、AST、MDA水平、肝组织病理程度、miR-144表达显著减少,SOD含量、糖原数量、HO-1及Nrf2 mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.05);MET组与G-Rg1-H组比较,上述指标无明显差异(P>0.05);与G-Rg1-H组比,G-Rg1-H+miR-144 mimics组FBG、ALT、AST、MDA水平、肝组织病理程度、miR-144表达显著增加,SOD含量、糖原数量、HO-1及Nrf2 mRNA及蛋白表达显著减少(P<0.05);与G-Rg1-H+miR-144 mimics组比,G-Rg1-H+miR-144 mimics+Hesperin组FBG、ALT、AST、MDA水平、肝组织病理程度、miR-144表达显著减少,SOD含量、糖原数量、HO-1及Nrf2 mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.05);双荧光素酶报告基因检测结果显示,Nrf2是miR-144的潜在靶基因。结论 G-Rg1通过抑制miR-144表达来激活Nrf2/ARE通路,改善DM大鼠的肝损伤。

基于转录组测序解析南瓜子叶黄化的分子机理

为研究南瓜叶色黄化突变的机制,挖掘黄化相关关键基因,试验以南瓜自然黄化突变体为试材,通过高通量RNA测序(RNA-seq)对苗期子叶进行转录组分析。结果表明:从检测的26 445selleck BI 10773个表达基因中鉴定出12 687个差异表达基因(DEGs),包括6 444个上调基因,6 243个下调基因;其中2 321个DEGs是转录因子编码基因。选取14个与光合色素密切相关的DEGs进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析,获悉更多发现它们的基因表达水平与转录组测序结preimplnatation genetic screening果一致。经KEGG富集分析,发现卟啉和叶绿素(Chl)生物合成、光系统Ⅰ、光系统Ⅱ、光合作用-天线蛋白、电子传递和F型ATP酶相关基因的表达显著下调。谷氨酰-tRNA还原酶、镁离子螯合酶、叶绿素a加氧酶基因异常表达,血红素代谢相关基因表达上调抑制了Chl合成;β-胡萝卜素3-羟基酶促进了类胡萝卜素生成;另外,光合作用过程受阻也反馈抑制Chl合成,Chl合成受阻和类胡萝卜素合成受促导致南瓜叶色黄化。研究结果为南瓜黄化突变的分子机制提供了新的见解,为关键基因功能分析和南瓜育种奠定了基础。

金匮肾气丸合桃红四物汤加减治疗气虚血瘀型老年心衰患者的效果及对心室重塑、氧化应激指标的影响

目的 探讨金匮肾气丸合桃红四物汤加减治疗气虚血瘀型老年心衰患者的效果。方法 选择2019年8月至2022年1月收治的90例气虚血瘀型老年心衰患者为研究对象,按照selleck产品随机数字表法将其分为对照组与观察组,各45例。对照组接受常规西药治疗,观察组在对照组基础上加金匮肾气Alpelisib小鼠丸合桃红四物汤加减治疗。比较两组的治疗效果。结果 观察组的治疗总有效率高于对照组(P<0.medical assistance in dying05)。治疗后,观察组的舒张期室间隔厚度(IVST)、舒张期左室后壁厚度(LVPWT)和左室质量指数(LVMI)低于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组的超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)水平高于对照组,丙二醛(MDA)水平低于对照组(P<0.05)。结论 金匮肾气丸合桃红四物汤加减治疗气虚血瘀型老年心衰患者效果满意,能够改善心室重塑功能,减轻氧化应激损伤。

粪便钙卫蛋白水平与原发性肾病综合征患儿的临床相关性分析

目的:探究粪便钙卫蛋白在原发性肾病综合征的诊断、分型或预后中的价值。方法:本研究选取2021年11月-2022年12月在我院儿科住院的确诊为原发性肾病综合征的64例患儿,分为两组,粪便钙卫蛋白水平升高组和粪便钙卫蛋白水平正常组,探究两组在一般临床资料、复发、对激素治疗效果方面的区别。结果:1.本研究Src抑制剂共纳入64例符合标准的患儿,其中男孩39例,占比达到60.94%,女孩25例,占比达39.06%,男女比例为1.6,年龄均在1-18岁之间。粪便钙卫蛋白水平升高组和粪便钙卫蛋白水平正常组在性别、年龄方面无显著差异(P>0.05)。2.粪便钙卫蛋白水平升高组,与粪便钙卫蛋白水平正常组相比,血清Ig G水平、血清白蛋白、胆固醇、24小时尿蛋白等指标在两组间差异均无统计学意义(P>0.05)。3.粪便钙卫蛋白水平升高组比正常组的复发率更高,两组间差异具有显著的统计学意义(P=0.046)。4.复发组患儿粪便钙卫蛋白水平高于未复发组,差异具有统计学意义(P=0.039)。5.激素敏感组粪便钙卫蛋白水平低于激素耐药组,差异有bio-based crops统计学意义(P=0.006)。6.当粪便钙卫蛋白水平的临界值为39.6ug/g时,对于复发预测的敏感性和特异性分别为39.6%和93.7%。7.Spearman相关显示,粪便钙卫蛋白水平和IgE水平之间并没有相关关系(r=0.130,P=0.305)结论:1.这项研究表明粪便钙卫蛋白能作为原发性肾病综合征的潜在生物标志物,粪便钙卫蛋白水平在预测患儿复发情况上有一定作用。2.粪便钙卫蛋白水平有助于区分激素敏感型肾病综合征和激素耐药型肾病综合征。3.当粪便钙卫蛋白水平的临界值为39.6ug/g时,对于复发情况预测有高特异性和低敏感性。4.粪便钙卫蛋白水平和Ig点击此处E水平之间没有相关关系。

全国部分医疗机构头孢菌素类药物常规皮试现状调查与分析

目的 了解《β内酰胺类抗菌药物皮肤试验指导原则(20Immune check point and T cell survival21年版)》(以下简称《指导原则》)发布后全国部分医疗机构头孢菌素类药物皮试情况及仍常规皮试原因,为规范皮试相关医疗行为提供针对性改进措施。方法 2022年6—8月采用全国问卷调查方式获知医疗机构头孢菌素类药物皮试管理规定、实际医疗行为情况,并按照不同地区、不同级别进行比较。结果 共30个省份205家医疗机构参与调查。51.7%医疗机构表示在使用头孢菌素类药物前不要求常规皮试,其中72.6%医疗机构是在《指导原则》发布后取消了常规皮试。要求常规皮试的医疗机构中要求部门各异。仍常规皮试原因与避免医疗纠纷、无部门推进落实、某些头孢菌素类药物说明书规定皮试、selleck HPLC医务人员认识不足等相关。不同地区、不同级别医疗机构是否Bafilomycin A1核磁常规皮试情况有显著性差异(P<0.001)。结论 《指导原则》促进医疗机构取消头孢菌素类药物常规皮试。医疗机构应提高对皮试的正确认识,并由专业组织推进落实,同时,厂家应改进药物生产工艺及说明书内容,规范头孢菌素类药物皮试相关医疗行为。

基于m6A相关长链非编码RNA鉴定克罗恩病的潜在诊断生物标志物

目的 探索克罗恩病(CD)m6A相关的长链非编码RNA(LncRNA)及其与患者临床性状的相关性。方法 通过GEO数据库获取CD芯片数据,获取m6A相关的甲基化酶的表达量,通过差异分析筛选LncRNA。分析与m6A甲基化酶共表达的LncRNA,探索LncRNA与CD患者病情活动的相关性并绘制ROC曲线,对LncRNA共表达的m RNA进行Gimmune trainingO富集分析及KEGG信号通路分析。结果 共筛选出CD中m6A相关的LncRNA 7个,3个LncRNA与8个m6A甲基化酶存在相关性。其中,LncRNAGSEC与病情活动指标CDEIS呈正相关。m6A甲基化位点预测提示GSEC存在多个PD0325901小鼠高甲基化位点;ROC曲线下面积为0.805。GO富集分析显示其富集于蛋白丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶活性、Toll样受体结合等功能。Berzosertib说明书KEGG信号通路分析显示其富集于NF-κB信号通路、炎症性肠病等通路。结论 GSEC可能是CD潜在的诊断及治疗靶点。

AhR对系统性红斑狼疮B细胞异常活化及Th17/Treg失衡的影响

目的:通过检测系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)中芳烃受体(Aryl Hydrocarbon Receptor,AhR)和哺乳动物不育系20样激酶1(Mammalian sterile-20-like,MST1)的表达水平,B细胞,辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)的数量,分析其相互关系,探讨AhR对SLE疾病B细胞异常活化及Th17/Treg失衡的影响机制,为SLE的治疗和机制研究提供理论基础。方法:纳入兰州大学第一医院诊断为SLE患者30名和健康对照者12名,查阅病例收集相关临床基本资料和实验室检测指标,同时收集外周血全血。根据系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLE disease activity index 2000,SLEDAI-2K)评分标准来评估SLE患者的疾病活动度。采用流式细胞术分析参与者外周血B细胞中AhR的表达、Th17细胞和Treg细胞的表达。用蛋白印迹法检测患者和健康对照组的外周血淋巴细胞中AhR和MST1GDC-0068分子量蛋白表达水平;同时选取雌性C57BL/6J小鼠(n=6)设为Calcutta Medical College正常对照组,雌性MRL/lpr小鼠(n=18)分为三组:模型组、Vehicle组和FICZ组。通过观察小鼠肾脏病理切片、脾脏长度、脾脏重量和脾指数来鉴定小鼠模型的建立和疾病炎症程度。采用流式细胞术分析小鼠Th17细胞和Treg细胞的表达。运用蛋白印迹法检测小鼠脾脏组织中AhR和Mst1蛋白表达水平。采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR,q RT-PCR)方法来检测脾脏组织中细胞因子的表达水平。结果:1.SLE患者外周血B淋巴细胞数量(P<0.05)及其AhR的表达水平(P<0.0001)均显著高于健康对照组;2.SLE患者B细胞中AhR的表达水平与血红蛋白(r=-0.3994,P=0.0390)、补体C3(r=-0.5126,P=0.0063)和补体C4(r=-0.4036,P=0.0270)呈负相关,而与SLEDAI-2K(r=0.5614,P=0.0015)、血沉(r=0.6343,P=0.0003)、C反应蛋白(r=0.5285,P=0.0032)和淋巴细胞数量(r=0.4980,P=0.0080)呈正相关;3.高表达AhR的B细胞预测SLE累积肾损伤的ROC曲线下面积为0.815,其最佳截止水平为3.05%,其预测SLE累积肾损害的敏感性为83.3%、特异性为70.0%;4.与健康对照组相比,SLE患者外周血Th17细胞数量显著增高(P<0.01),而Treg细胞没有差异,但是Th17/Treg显著增高(P<0.01),且SLEDAI-2K与Th17细胞(r=0.5750,P=0.0051)和Th17/Treg(r=0.4421,P=0.0448)呈正相关;5.SLE患者外周血淋巴细胞中AhR和MST1的蛋白表达水平显著增高(P<0.05,P<0.01);6.与C57BL/6J相比,MRL/lpr小鼠有明显的狼疮样变化,并且脾脏中Th17细胞数量显著增高(P<0.01),Treg细胞数量显著下降(P<0.01),Th17/Treg显著性增高(P<0.01),此外,MRL/lpr小鼠中AhR和Mst1的蛋白表达水平增高,差异具有统计学意义(P<0.05);7.与Vehicle相比,FICZ组小鼠脾脏中Th17细胞明显增高(P<0.01),Treg细胞显著下降(P<0.001),Th17/Treg显著性增高(P<0.01),AhR在Th17细胞(P<0.01)以及Treg细胞(P<0.05)中表达明显增高;8.与Vehicle相比,FICZ组小鼠脾脏组织中AhR和Mst1的蛋白表达水平增高(P<0.05);9.与Vehicle相比,FIBLZ945分子式CZ组小鼠脾脏中促炎细胞因子IL-2 m RNA(P<0.05)、IL-4m RNA(P<0.05)和TNF-αm RNA(P<0.001)水平表达增高,抑炎细胞因子IL-10 m RNA(P<0.01)水平表达降低,炎症加重。结论:1.SLE患者外周血B细胞中AhR的表达水平与SLE疾病活动度相关,其可能是预测SLE合并肾损害的潜在指标;2.在SLE中,Th17/Treg失衡与疾病活动度具有相关性;3.AhR可能通过MST1诱导Th17/Treg失衡,进而参与SLE进展过程。

大果木姜子油调控miR-328基因抗心律失常H9c2细胞的机制研究

目的:探讨大果木姜子油通过调控miR-328基因抗心律失常H9c2细胞的可能机制。方法:慢病毒转染构建miR-328过表达H9c2细胞株,再运用生物机能实验系统构建H9c2细胞和miR-328过表达H9c2细胞心律失常模型。将H9c2细胞分为正常对照组、模型组、大果木姜子油组、PD-0332991核磁miR-328过表达组和miR-328过表达+大果木姜子油组。根据分组条件培养结束后,qPCR检测H9c2细胞中miR-328相对表达量;ELISA检测炎性因子IL-1β、IL-6、TGF-β含量;比色法检测SOD活性和MDA浓度;DCFH荧光探针检测ROS水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot检测HAutomated DNA9c2细胞L型钙通道相关蛋白表达。结果:成功构建H9c2细胞和miR-328过表达H9c2细胞心律失常模型。与正常对照组比较,模型组和miD-Lin-MC3-DMA使用方法R-328过表达组细胞TGF-β、SOD活性及CaM、CaMKⅡ、p-CaMKⅡ蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、miR-328及Ca V1.2蛋白表达和IL-1β、IL-6、MDA、ROS水平显著升高(P<0.01)。经大果木姜子油干预后,心律失常模型细胞形态改善,上述指标均被显著逆转(P<0.01)。结论:大果木姜子油可改善心律失常H9c2细胞,其作用机制可能与调控miR-328基因降低炎症因子水平、调节氧化应激、抑制细胞凋亡及调节L型钙通道相关蛋白表达有关。

天女木兰蛋白激酶MsSnRK2A、MsSnRK2E基因克隆及其功能分析

天女木兰(Magnolia sieboldii K.Koch)是木兰科植物,落叶小乔木。具有较高的药用价值与经济价值。然而天女木兰种子萌发率低、出苗困难。脱落酸(abscisic acid,ABA)是种子休眠诱导和维持的正调控因子,主要受ABA信号传递途径的调控。SnRK2是ABA信号传导途径中Ceralasertib抑制剂的正调控因子GW-572016体内实验剂量。本研究克隆得到天女木兰种子萌发过程中鉴定到的关键基因SnRK2A、SnRK2E、SAPK10。并通过实时荧光定量PCR探究MsSnRK2A、MsSnRK2E在天女木兰不同组织及其在PEG处理下随时间的相对变化量、不同浓度脱落酸处理下种子休眠解除过程及吸胀过程的相对表达量。利用亚细胞定位及拟南芥遗传转化技术进一步验证基因功能。为进一步探讨SnRK2A、SnRK2E基因在天女木兰的种子萌发过程中的功能奠定了基础。本研究主要结果如下:1.天女木兰种子在不同浓度ABA的处理下,层积48-56 d期间,CK含水量高于其它浓度处理下含水量。随着外源ABA浓度升高,天女木兰种子发芽率降低。层积过程中内源ABA含量大体上呈先上升后下降趋势,在层积16天时达到峰值。2.成功克隆了天女木兰MsSnRK2A、MsSnRK2E、MsSAPK10基因,三个基因的开放阅读框全长分别为1068 bp、1080 bp、1083 bp,编码355、359、360个氨基酸残基;通过构建进化树,发现天女木兰的MsSnRK2A与Cm SnRK2A亲缘关系最近,MsSAPK10与Os SAPK10亲缘关系最近;亚细胞定位预测都在细胞核。3.在天女木兰不同组织中,MsSnRK2A在干种子中表达量最高,MsSnRK2E在叶中表达量最高。PEG处理下Medical sciences,根、叶中MsSnRK2A的表达量都在12 h到达峰值,茎中MsSnRK2A在6 h到达峰值;根中MsSnRK2E在6 h到达峰值,茎、叶中MsSnRK2E的表达量都在12 h时到达峰值。MsSnRK2A和MsSnRK2E基因在吸胀过程中的表达量都有先升高后降低的趋势。通过在不同浓度ABA处理下,天女木兰种子层积过程中的表达分析结果发现:在设置的浓度梯度范围内,MsSnRK2E表达量随着ABA浓度升高而降低。MsSnRK2A表达量随着ABA浓度升高而升高。4.MsSnRK2A、MsSnRK2E蛋白定位在细胞核中。为了研究MsSnRK2A、MsSnRK2E的生物学功能,利用单酶切成功构建了p RI101-MsSnRK2A-GFP、p RI101-MsSnRK2E-GFP植物表达载体,并通过花序侵染法将其转入哥伦比亚野生型拟南芥及突变体snrk2a、snrk2e进行遗传转化,获得了过表达T1代转基因植株。

不同剂量芬太尼复合丙泊酚用于宫腔镜手术的安全性和有效性

目的 研究不同剂量芬太尼复合丙泊酚用于宫腔镜手术的安全性和有效性。方法 选择2020年5月至2022年6月平顶山市妇幼保健院收治的90例接受宫腔镜手术的患者作为研究对象,并随机分为A、B、C组。其中,A组患者(N=30)采用0.15μg/kg芬太尼静脉注射;B组患者(N=30)采用0.20μg/kg芬太尼静脉注射;C组患者(N=30)采用0.25μg/kg芬太尼静脉注射;所有患者均采用2.0 mg/kg丙泊酚镇静。对三组患者的麻醉及手术情获悉更多况、血流动力学指标[心率(HR)、平均动脉压(MAP)、心脏指数(CI)]、术后不良反应、对手术满意程度和术后认知能力进行调查比较。结果 B组、C组患者的麻醉起效时间比较差异无统计学意义(P>0.05),但均显著低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。术中体动次数C组最低、B组次之、A组最多,差异有统计学意义(P<0.05)。术后意识恢复时间A组最低、B组次之、C组最高,差异有统计学意义(P<0.05)。三组患者扩宫颈(T_1),术中(T_2)与术后(T_3)时期的血流动力学各指标均显著低于麻醉前(T_0)时期,差异有统计学意义(P<0.05)。A组患者T_1,T_2、T_3时期的血流动力学各指标差异无统计学意义(P>0.05),T_1、T_2、T_3时期B组与C组患者的血流动力学各指标比较,差异有统计学意义(P<0.05)。在T_1时期,C组的HR低于A组与B组,B组与C组的MAP低于A组,B组的CI低于A组,差异有统计学意义(NSC125066临床试验P<0.05)。在T_2时期,B组与C组的HR低于A组,C组的MAP低于A组与B组,C组的CI低于A组与B组,差异有统计学意义(P<0.05)。在T_3时期,C组HR低于Disease transmission infectiousA组与B组,B组与C组的MAP低于A组,C组的CI低于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。三组患者的术后不良反应发生率与术后满意度差异无统计学意义(P>0.05)。术后1 h与术后24 h的认知能力C组最低、B组次之、A组最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 采用0.15μg/kg芬太尼复合丙泊酚用于宫腔镜手术对患者的血流动力学指标影响较小,且术后患者的意识恢复时间较短,麻醉效果较好,对认知能力影响较小,安全系数高。