基于网络药理学研究枳实薤白桂枝汤组方对治疗冠心病的作用机制

目的:使用网络药理学和生物信息学分析等方法研究枳实薤白桂枝汤组方治疗冠心病的关键药物成分、作用靶点及其潜在的作用机制。并在体内和体外实验对该组方的疗效及其关键成分治疗冠心病的分子生物学机制进行验证。方法:1.利用Drug Bank、Genecards、OMIM、TTD及Dis Ge NET数据库获得冠心病相关基因,使用TCMSP和Swiss Target Prediction数据库获得枳实薤白桂枝汤组方的主要活性成分并预测其作用靶点。使用R语言对交集部分的靶点基因进行基因本体论(Gene Ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和疾病本体论(Disease Ontology,DO)富集分析,并对中药成分-靶点网络和交集靶点基因的蛋白互作网络进行拓扑分析,筛选出该组方的关键药物成分及其关键靶点。2.使用尾静脉注射前蛋白转化JNJ-42756493酶枯草溶菌素9(Proprotein Convertase Subtilisin/kexin Type 9,PCSK9)腺相关病毒并高脂喂养构建小鼠冠心病模型,予以枳实薤白桂枝汤组方灌胃治疗1月,治疗结束后进行主动脉大体油红O染色、血脂检测以评估枳实薤白桂枝汤的疗效,并进行荧光实时定量聚合酶链反应(Quantitative RealTime polymerase chain reaction,RT-PCR)对筛选出的关键靶点进行验证。3.利用氧化低密度脂蛋白(Oxidized low-density lipoprotein,ox LDL)干预人脐静脉内皮细胞(human umbilical Barasertib抑制剂vein endothelial cells,HUVECs)建立动脉粥样硬化功能损伤的模型,柚皮素干预后使用蛋白免疫印迹实验观察凋亡相关蛋白(Bcl-2相关X蛋白、B淋巴细胞瘤-2基因)及PI3K-Akt-Bax信号通路相关蛋白表达的情况。结果:1.通过网络药理学分析,共获得6253个冠心病基因,51个中药活性成分,827个药物靶点,得到613个交集靶点基因,拓扑分析后筛选出50个关键靶点,GO共富集到3691条,其中生物过程(Biological Process,BP)富集到3209条,细胞组分(Bioresearch Monitoring Program (BIMO)Cellular Component,CC)富集到137条,分子功能(Molecular Function,MF)…