因开发出新型化学抗炎Biogas residue药物难度较大、成本昂贵且近年来化学抗炎药物的更新速度越来越慢,因此,很多国内外学者将目光投降了中医药抗炎药物。“乳炎宁”方剂是本课题组经过多年临床经验以中医药配伍原则为基础,并经过不断完善配伍而成的一DS-3201纯度种治疗炎症性疾病的新型方剂。既往研究显示,本组方中的单味中草药均有一定的抗炎效果,因此研究本组方的抗炎效果以及填补先前研究的空白是非常必要的。目的:本研究以小鼠为主要试验动物,“乳炎宁”水提物为主要试验药物。通过灌胃的方式给予小鼠不同剂量浓度的“乳炎宁”水提物,探讨其抗炎活性以及抗小鼠乳腺炎作用,为其临床运用及进一步研究提供理论依据。方法:“乳炎宁”水提物按低(4 mg/g)、中(8 mg/g)、高(16 mg/g)剂量灌胃给药随即开展各试验内容(1)采用二甲苯致耳廓肿胀、醋酸致腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶致足肿胀、棉球致肉芽肿胀及检测小鼠血清细胞因子TNF-α和IL-1β含量,试验期为10 d;试验期满,分别测量各组小鼠耳廓重量、腹腔洗液D_(590 nm)值、足重量、棉球肉芽肿重量以及血清中TNF-α和IL-1β含量。(2)小鼠腹腔注射4×10~8 CFU/只的金黄色葡萄球菌,造模结束后2 h各药物处理组开始给药,每天一次,连续7 d,期间每天记录小鼠死亡情况及生存状态;试验期满,收集各组小鼠血液以及心、肝、脾、肺、肾;血清用于检测小鼠TNF-α和IL-6,各组织用HE染色法制作组织病理学切片。(3)用浓度为3%的DSS溶液饲喂7 d进行UC模型构建;造模成功后,药物处理组开始给药每天一次,连续给药10 d,期间每天观察小鼠大便性状以及生活状态;试验期满,采集各组小鼠结肠组织用于病理学观察以及结肠组织中IL-1β、IL-17、TNF-α、IFN-γ、PPARγ、GSH-Px、SOD、MPO和MDA含MG132说明书量。(4)用LPS进行小鼠乳腺炎造模,造模结束2 h后,开始给药,每天一次,连续7 d;试验期满,采集各组小鼠乳腺组织,一部分用于组织病理学观察,一部分用于检测乳腺中TNF-α、IL-1β、IL-6、MPO的含量。结果:(1)试验结果表明,“乳炎宁”水提物各剂量组对二甲苯致耳廓肿胀、醋酸致腹腔毛细血管通透性增加、角叉菜胶致足肿胀、棉球致肉芽肿胀均有极显著的抑炎作用(P<0.01)。ELISA检测结果表明,与BC组比较,RYN-M、RYN-H组血清中IL-1β含量极显著降低(P<0.01),血清中TNF-α含量在RYN-M组含量显著降低(P<0.05),在RYN-H组中极显著降低(P<0.01)。(2)试验结果表明,RYN-M、RYN-H可极显著提高模型小鼠生存率(P<0.01);对小鼠肝、肺、肾组织HE染色发现,“乳炎宁”水提物各剂量组均可以改善模型小鼠各组织的结构完整性以及炎性浸润情况;ELISA检测结果表明,“乳炎宁”水提物各剂量组均可降低模型小鼠血清中TNF-α、IL-6含量(P<0.01)。(3)试验结果表明,Model组、“乳炎宁”水提物各剂量组小鼠DAI极显著升高(P<0.01),结肠长度极显著缩短(P<0.01);且“乳炎宁”水提物各剂量组均可以改善由DSS诱导的UC小鼠模型中结肠组织的破坏程度以及炎性浸润状态;ELISA检测结果表明,与Model组比较,“乳炎宁”水提物各剂量组所检测细胞因子均有极显著的恢复趋势(P<0.01)。(4)试验结果表明,“乳炎宁”水提物各剂量组均可以改善乳腺组织结构,缓解炎性浸润现象;ELISA检测结果表明,“乳炎宁”水提物各剂量组均可以极显著降低模型小鼠的乳腺组织中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、MPO含量(P<0.01)。结论:“乳炎宁”水提物有较好的抗炎效果,且各剂量组(4 mg/g;8 mg/g;16 mg/g)对金黄色葡萄球菌感染致炎症小鼠模型、小鼠UC模型以及LPS诱导的小鼠乳腺炎模型均有正向调节作用,其中“乳炎宁”水提物高剂量组(16 mg/g)效果最好。