目的:优化重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor, GM-CSF)单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)对肿瘤细胞人乳腺癌细胞(michigan cancer foundation-7,MCF-7)的杀伤活性检测方法。方法:在不同时间加入不同浓度的活性氧(reactive oxygen species, ROS)抑制剂/ROS清除剂，确定对试验影响最小，且能有效去除活性氧的条件。对优化后的方法进行精密度和适用性验证。分别采用优化前、后的方法对同一批号OrienX010样品进行3次肿瘤细胞杀伤活性检测，PF-07321332溶解度确定优化前、后方法是否有统计学差异。用不同代次的MCF-7细胞进行试验来确定细胞可使用代次。结果:在加入CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂前30MRTX1133价格 min左右，每孔加入50倍稀释的ROS抑制剂/ROS清除剂10μL为最佳条件。同一试验人员于同1 d 6次测定OrienX010的杀伤活性感染复数(multiplicity of infection, MOI)半数有效量(median effective dose, ED_(50))的RSD为15.1%,符合可接受标准；2名实验人员于不同日每人重复测定6次OrienX010的MOI ED_(50)的RSD为20.5%,符合可接受标准。对多批次的OrienX010进行肿瘤细胞杀伤活性检测，检测结果均符合质量标准。采用优化前、后的方法对同一批号OrienX010样品进行3次肿瘤细胞杀伤活性检测，t Stat>t双尾临界值，说明优化前、后2组数据的平均值有显著性差异。MCF-7细胞检测到plant pathologyP 39,检测结果均合格且稳定。结论:优化后的方法有效消除了ROS对肿瘤细胞杀伤活性检测的影响，该方法具有良好的精密度及适用性，可用于重组人GM-CSF单纯疱疹病毒注射液(OrienX010)的肿瘤细胞杀伤活性检测；优化前、后的方法有统计学差异；MCF-7细胞可使用到P 39。