目的 利用网络药理学预测和分子生物学验证探讨大白桩菇抗乳腺癌的活性成分及作用机制。方法 采用溶剂法提取，硅胶柱色谱等方法分离纯化，根据Imidazole ketone erastin NMR波谱数据进行结构鉴定；通过MTT法检测抗肿瘤活性；通过TCMSP和PharmMaper平台进行靶点预测；在Genecards数据库筛选疾病基因；对核心靶点进行GO和KEGG富集分析；利用iGEMDOCK软件进行分子对接；采用WesCrizotinib浓度tern blot验证大白桩菇成分绿原酸对MDA-MB-231中CHEK2和CASP3靶点的调控作用。结果 从大白桩fluid biomarkers菇分离纯化到绿原酸等13个化合物；大白桩菇乙醇提取物(200 mg·L~(-1))对MDA-MB-231的抑制率为87.35%;13个化合物主要作用在CHEK2和CASP3等21个核心靶点，通过p53和FOXO等多条信号通路发挥抗乳腺癌作用；Western blot发现绿原酸可作用于靶点CHEK2和CASP3,促进乳腺癌细胞凋亡，证明了网络药理学分析的可靠性。结论 初步阐明了大白桩菇的化学成分及潜在作用机制，为大白桩菇抗乳腺癌的进一步研究提供了参考。