NATD/FOXA2信号通路对乳腺癌转移的作用及其机制

目的：基于N-α-乙酰基转移酶D(NATD)/叉头框蛋白A2(FOXA2)信号通路探讨其对乳腺癌转移的作用机制。方法：对不同转移能力的乳腺癌细胞系（人细胞系MDA-MB-231及其对肺转移衍生物LM2、MCF10CA1h及其转移性等基因系MCF10CA1a）进行了质谱组学分析。构建NATD过表达和敲减的MDA-MB-231和LM2细胞模型，并通过尾静脉注射到小鼠体内。在不同时点使用生物发光成像测量了肺转移负担。通过高通量反相蛋白质阵列和RNA免疫沉淀测序（RIP-Seq）分析鉴定NATD靶标。对于救援实验，MDA-MB-231细胞与FOXA2和NATD过表达质粒体共转染48 h。通过Transwell测定评估细胞侵袭和迁移。分别进行免疫荧光或Western blot测定NATD和上皮-间充质转化（EMT）相关蛋白表达。结果：质谱组学分E-616452化学结构析确定NATD是受调控的蛋白质之一，并且Western blot证实了NATD蛋白在LM2和MCF10CA1a转移癌细胞中的表达高于MDA-MHerbal MedicationB-231和MCF10CA1h亲本癌细胞。NATD过表达MDA-MB-231细胞显著加剧了小鼠肺转移负担并缩短了动物的存活期；相比之下，NATD敲减LM2细胞减少了小鼠的肺定植并延长了无转移生存期。通过高通量反相蛋白质阵列和RIP-Seq分析鉴定FOXA2作为NATD靶标。在NATD过表达的MDA-MB-231细胞中，FOXA2表达明显降低。NATD过表达介导的对MDA-MB-231细胞侵袭和迁移的促进作用被FOXA2过表达逆转。此外，免疫荧光和Western blot分析显示，NATD过表达介导MDA-MB-231细胞的EMT过程，而FOXA2过表达逆转了NATD对EMT过程的诱导作用。结论：NATD通过控制FOXA2介导的EMT来促进乳腺癌转移。因此，靶向NATD/FOXA2轴可能是治CHIR-99021浓度疗乳腺癌的新策略。