背景:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种发病隐匿的神经退行性疾病,是痴呆症最主要的类型,阐明AD的发病机制并确定治疗新靶点具有重大的意义。越来越多证据表明,糖皮质激素受体(Glucocorticoid receptor,GR)在AD海马中功能失调,这可能是导致AD病理及认知损伤的关键因素。但是GR功能失调的分子机制并不清楚。亨廷顿蛋白相关蛋白1(Huntingtin-associated protein1,Hap1)是酵母双杂交Nirogacestat筛选中发现的第一个与亨廷顿蛋白相互作用的蛋白,具有神经保护作用。大量证据表明,其功能缺失与神经退行性疾病相关。AD作为常见的神经退行性疾病,Hap1在AD中的作用日益受到重视。本课题组前期结果表明,Hap1与GR存在相互作用,并且可以保护GR蛋白水平。因此提出假说:Hap1可能通过调控GR信号影响AD的学习记忆GW-572016使用方法。目的:明确Hap1通过调控GR/CREB/BDNF信号通路对AD模型小鼠APP/PS1学习记忆样行为产生影响,评估Hap1在APP/PS1小鼠学习记忆中的重要作用,为AD患者的临床治疗提供新的靶点。方法:1.利用CRISPR/Cas9基因剪切原理,针对小鼠Hap1基因,制备特异性敲低Hap1的g RNA载体,将构建的质粒包装病毒。2.通过脑立体定位注射方法,特异性敲低APP/PS1小鼠海马内Hap1表达,利用行为学检测和高尔基染色法,检测Hap1表达下调对APP/PS1小鼠学习记忆样行为以及海马树突和树突棘形态的影响。3.外源性添加Aβ_(25-35)感染N2a细胞制备AD细胞模型。特异性敲低APP/PS1小鼠海马区和AD细胞模型中的Hap1表达,用western-blot和q PCR方法检测GR,CREB,BDNF蛋白水平和RNA水平的变化。结果:动物实验:(1)特异性敲低APP/PS1小鼠海马内Hap1表达导致小鼠学习记忆样行为缺陷,海马神经元变少以及树突棘密度降低。(2)Western-blot和q PCR实验检测,AD海马中Hap1缺失导致GR、CREB、BDNF蛋白水平和RNA水平降低。细胞实验:通过质粒转染敲低AD细胞中Hap1表达后,细胞内GR、CREB、BDNF的蛋白水平和RNA水平均明显下降。结论:APP/PS1小鼠海马中Hap1降低可导致GR、CREB、BDNF表达下调,以potential bioaccessibility及海马组织中神经元减少以及树突棘密度降低,引起APP/PS1小鼠的学习记忆障碍。