虾青素对脂多糖诱导的肾小管上皮细胞铁死亡的影响

目的 探讨虾青素(AST)调节沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞(HK-2细胞)铁死亡的影响。方法 取生长较好的HK-2细胞进行分组,依次分为对照组、溶剂组(0.1%二甲基亚砜)、LPS组(1μg·mL~(-1) LPS)、AST组(1μg·mL~(-1) LPS+20μmol·L~(-1) AST)、AST+烟酰胺组(1μg·mL~(-1) LPS+20μmol L~(-1) AST+20μmol·L~(-1)烟酰胺)。用细胞计数试剂盒8(CCK-8)分析细胞活力;用流式细胞仪分析活性氧(ROS)水平;用试剂盒法检测胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、铁离子、丙二醛(MDA)含量;用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测铁死亡标志谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、非糖基化的xCT(SLC7A11)mRNA表达水平;用蛋白质印迹(Western blot)法检测SIRT1、Nrf2、GPX4、SLC7A11蛋白表达。结果 对照组、溶剂组、LPS组、AST组、AST+烟酰胺组细胞活力分别为(100.00±0.00)%、(94.27±4.44)%、(39.62±3.97)%、(69.09±6.91)%和(40.51±4.06)%,SLC7A11蛋白表达水平分别为0.95±0.10、1.02±0.11、0.26±0.03、0.88±0.09和0.45±0.05,GPX4蛋白表达水平分别为1.02±0.11、0.93±0.10、0.43±0.05、0.95±0.10和0.62±0.07,SIRT1蛋白表达水平分别为1.selleck Pidnarulex06±0.11、0.93±0.10、0.48±0.05、1.02±0.11和0.72±0.08,Nrf2蛋白表达水平分别为0.77±0.08、0.79±0.08、0.33±0.04、0.74±0.09和0.44±0.05,ROS表达水平分别为(216.33±21.64)%、(23selleckchem LXH2545.14±23.52)%、(1 899.34±189.94)%、(549.32±54.94)%和(lung viral infection1 216.23±121.63)%,MDA表达量分别为(6.63±0.67)、(6.75±0.68)、(15.82±1.59)、(9.09±0.91)和(13.96±1.40)ng·mL~(-1),铁离子含量分别为(2.74±0.28)、(3.04±0.31)、(16.72±1.68)、(8.41±0.85)和(14.26±1.43)ng·mL~(-1),LPS组上述指标与对照组比较,AST组与LPS组比较,AST+烟酰胺组与AST组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 AST可通过SIRT1/Nrf2信号通路的活化抑制铁死亡,缓解LPS诱导的HK-2细胞损伤。