目的 观察高硒对L02细胞胰岛素信号通路PI3K-AKT-mTOR的影响。方法 在普通培养基中添加硒代蛋氨酸，使细胞寻找更多培养液中硒的终浓度分别为0.001、0.0025、0.005、0.0075、0.01、0.025、0.05、0.075和0.1μmol/L,生理盐水为对照组。利用这些高硒培养基培养L02细胞，干预48 h后，一半细胞用PBS清洗，更换为无血清培养基，饥饿4 h后用1μmol/L胰岛素刺激15 min,收集细胞进行裂解，免疫印迹法分析L02细胞裂解液中胰岛素信号通路购买Liproxstatin-1磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(AKT)-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路相关酶的表达水平。另一半细胞在干预48 h后即收集细胞上清和裂解液，免疫印迹法分析细胞裂解液中的谷胱甘肽过氧化物酶1 (glutathiImmune receptorone peroxidase 1, GPX1)和上清中的硒蛋白P(SELENOP)表达水平。结果 高硒培养环境中L02细胞内PI3K-AKT-mTOR信号通路关键酶磷酸化蛋白激酶B(Ser-473)[P-AKT-(Ser-473)]、磷酸化蛋白激酶B(Thr-308)[P-AKT-(Thr-308)]、PI3K和mTOR蛋白表达均随着硒代蛋氨酸浓度的升高而下调。硒蛋白GPX1和SELENOP随着培养基中硒含量升高而表达增强。结论 高硒培养的L02细胞内胰岛素信号通路PI3K-AKT-mTOR出现受损。