霍山石斛DhuCYP75B1基因克隆、表达模式及生物信息学分析

霍山石斛作为药用石斛中上品，富含柚皮素、芹菜素、槲皮素、夏佛塔苷等类黄Essential medicine酮物质。本研究依据课题组前期的霍山石斛三种不同栽培模式转录组测序数据，筛选并克隆得到霍山石斛类黄酮生物合成途径中显著差异表达的CYP基因(DhuCYP75B1)。运用生物信息学方法对DhuCYP75B1蛋白的结构功能展开分析，结果显示DhuCYP75B1开放阅读框为1 554 bp，编码5Fulvestrant纯度17个氨基酸，终止密码子为TAA，分子量为56.70 kD，理论等电点为6.86，具有跨膜结构域，为亲水酸性蛋白，属于细胞色素P450超家族。系统进化分析表明DhuCYP75B1与兰科小兰屿蝴蝶兰亲缘关系较近，与天南星科的花烛和姜科的姜亲缘关系较远，符合植物分类学特征。此外，实时荧光定量PCR结果显示DhuCYP75B1在叶中的表达量最高，能够响应低温胁迫，并受到茉莉酸甲酯、脱落酸信号调控。本实验结果为进一步研究不同栽培模式下霍山石斛关键酶基因DhuCYP75B1的功能提供了科学依IDN-6556化学结构据。