食品加工环境经常会受到微生物的侵染,致病菌形成的生物被膜对食品卫生安全造成了严重的影响,为降低抗生素用量,避免化学合成防腐剂可能给人体造成潜在的伤害,追求绿色无毒、研究和开发高效天然生物防腐剂已经成为行业内一个热门问题。本论文对阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii,C.sakazakii)进行实验探究,对不同环境营养因素下阪崎克罗诺杆菌生物被膜的形成进行分析,研究ε-聚赖氨酸(ε-polylysine,ε-PL)对阪崎克罗诺杆菌的抑菌性,并通过高通量测序转录组学分析研究其抑菌机理,并利用海藻酸钠-聚乙烯醇基础复合膜作为ε-PL的载体,开发抗菌食品安全性膜以拓宽ε-PL的适用范围。主要研究内容如下:(1)以阪崎克罗诺杆菌生物被膜形成特性为研究内容,探究营养环境对菌生物被膜形成量的影响,进而确定影响其生物被膜形成的关键因素。模拟生产混菌环境,分析混菌条件下阪崎克罗诺杆菌生物被膜的形成特性。结果表明,玻璃培养材质、TSB培养基、p H中性环境、2%微量葡萄糖浓度、200%的培养基质量浓度、微量镁离子浓度等条件下生物被膜的形成量增加,Na Cl的添加会抑制阪崎克罗诺杆菌生物被膜的形成,而起始接种量对生物被膜的形成未产生显著影响。通过药敏测试对天然抑菌剂进行筛选,得到ε-PL作为一种天然抗菌多肽,对阪崎克罗诺杆菌表现出较好的抑制和杀菌效果。(2)进一步探究ε-PL作用下阪崎克罗诺杆菌的细胞生理及生物被膜形成情况,揭示ε-PL对阪崎克罗诺杆菌的抑菌机理,研究了ε-PL作用下对阪崎克罗诺杆菌的膜壁通透性、表面疏水性及运动性等生理特性的影响,并利用透射电镜对ε-PL作用下的细菌细胞形态变化进行观察。也探究了ε-PL对生物被膜的抑制和清除作用效果。结果表明,ε-PL对阪崎克罗诺杆菌的抑菌活性具有浓度依赖性,ε-PL能够增强细胞膜壁通透性,从而达到抑菌效果。同时ε-PL能够降低阪崎克罗诺杆菌的表面疏水性和运动性,进而影响阪崎克罗诺杆菌生物被膜的形成。ε-PL对阪崎克罗诺杆菌生物被膜抑制和清除的作用效果显著,结合物理振荡,可大大提高生物被膜清除效率。为细菌耐药性和食品防腐措施研究提供理论支持。(3Alisertib溶解度)在转录组水平上研究了ε-PL对阪崎克罗诺杆菌的作用机制,结果表明,ε-PL的作用抑制了菌体蛋白翻译系统的表达、降低脂多糖的生物合成以破坏细胞膜系统的完整性。同时ε-PL能够通过影响阪崎克罗诺杆菌的氧化应激反应途径,加强物质转运途径,以抵抗ε-PL的胁迫。在生物被膜形成方面,ε-PL作用会下调群体感应信号通路,同时减少菌体胞外多糖、蛋白等胞外聚合物的生物合成,减弱生物被膜初始阶段的黏附作用,随之减弱生物被膜的形成。(4)本研究旨在开发一种食品安全性抗菌复合涂膜,用于食品包装材料。制备聚乙烯醇-海藻酸钠基础涂膜以及一系列浓度梯度的ε-PL复合涂膜,并对其抑菌活性和物GNE-140半抑制浓度理性质进行了表征。结果表明,随着ε-PL的加入使复合涂膜充分的物理交联,导致表面更加紧致。与未加入ε-PL的复合涂膜(SPP-0)相比,抗拉伸强度增加、水溶性显著减少,改善了Immune ataxias涂膜的物理性能。ε-PL复合涂膜对阪崎克罗诺杆菌抗菌率达到96.31%,具有良好的抑制作用。说明其在可食用性抗菌复合涂膜在食品防腐保鲜领域具有重要的应用价值。