【目的】日本落叶松黄烷酮3-羟化酶（flavanone 3-hydroxylase 2,LkF3H2）基因在类黄酮生物合成过程中发挥着重要的调控功能。探究LkF3H2基因在日本落叶松中发挥的具体功能和植物类黄酮生物代谢过程。【方法】根据实验室前期转录组数据克隆日本落叶松LkF3H2基因并进行生物信息学分析及组织表达分析。随后将该基因转化烟草进行转基因烟草确认细节组织表达分析及类黄酮含量测定，以探究基因表达量与类黄酮含量之间的关系。【结果】LkF3H2基因c DNA序列长度为1 074 bp，其蛋白编码358个氨基酸，分子式C1785H2807N481O541S18，fatal infection分子量为40.24 kD，该蛋白是不稳定的亲水性蛋白且不含信号肽；同时系统进化分析得出日本落叶松LkF3H2与火炬松、辐射松、白云杉和欧洲云杉F3H亲缘关系较近并且该蛋白含有保守结构域2OG-Fe(II)oxygenase superfamily，属于2-酮戊二selleck合成酸依赖性双加氧家族。另外组织表达分析显示LkF3H2基因在一月龄日本落叶松幼苗叶中表达量最高，在一年生日本落叶松幼苗茎中表达量最高，并且在转基因烟草叶中也显示了最高的表达量。值得一提的是，转基因烟草叶中的类黄酮含量也是最高的，其次为茎和根，转基因烟草中类黄酮含量与LkF3H2基因表达量呈正相关关系。【结论】日本落叶松LkF3H2基因属于2-酮戊二酸依赖性双加氧家族并且在类黄酮生物合成过程中发挥着重要功能。