研究背景:癫痫持续状态(Status Epilepticus,SE)是神经科常见急危重症之一,年发病率是10-41/10万人,总体死亡率可高达20%。SE的发生会导致机体产生氧化应激反应,出现细胞毒性水肿,继而导致神经元损害、血脑屏障破坏等一系列级联反应,进而出现血管源性水肿,同时细胞兴奋毒性增加,进一步恶化点击此处自发复发性癫痫(spontaneous recurrent seizures,SRS)发作。因此,及时使用抗癫痫药物终止SE发作的同时,寻找更多如何减轻脑水肿是降低SE复发率、改善预后的关键步骤。多糖包被是一层位personalized dental medicine于血管腔内侧的内皮细胞表面绒毛状结构,多糖包被损害后可出现内皮细胞活化、血细胞粘附、微血管渗漏、间质水肿。我们的前期工作基础表明,在心脏骤停后脑损伤中,多糖包被的破坏加重血脑屏障(Blood-Brain Barrier,BBB)的渗透性及脑水肿,然而具体机制尚未阐明。我们推测多糖包被在SE后脑损伤的多个病理生理环节发挥重要作用,可能是治疗的新靶点。目前多糖包被在SE后脑损伤中的作用及机制尚未有研究报道。研究目的:(1)观察小鼠SE模型是否存在多糖包被损伤;(2)肝素保护多糖包被是否减轻SE脑损伤及改善预后。研究方法:第一章:氯化锂-匹罗卡品诱导的小鼠SE模型中多糖包被损伤及其病理生理学改变将6-8周龄C57BL/6J小鼠随机分成假手术组、SE 1.5 h组、SE2h组、SE 2.5 h组,成功造模癫痫持续状态后,给予地西泮终止发作,于造模后24 h检测多糖包被,72h处死小鼠后取材,采用免疫荧光观察海马CA1区和梨状皮质区神经元存活数目、胶质细胞活化情况;血脑屏障的破坏,采用免疫组化染色观察海马CA1区和梨状皮质区IgG渗漏情况。第二章:肝素保护多糖包被减轻小鼠SE脑损伤及改善预后将6-8周龄小鼠随机分为假手术组、SE组、Heparin组。连续观察28天生存率及SRS发作情况。采用干湿重法分别比较海马区、梨状皮质区脑组织含水量,并予头颅磁共振T2和DWI检查,测ADC值了解脑水肿类型及严重程度;采用免疫荧光观察海马CA1区和梨状皮质区神经元存活数目;血脑屏障的破坏,采用免疫组化染色观察海马CA1区和梨状皮质区IgG渗漏情况,磁共振T1增强检测造影剂渗漏,伊文斯蓝染色观察海马区和梨状皮质区染料渗透情况;免疫荧光法观察海马CA1区和梨状皮质区Iba-1特异标记小胶质细胞和GFAP特异标记星形胶质细胞活化的情况;WB检测炎症因子表达及肝素酶表达情况。结果:(1)锂-匹罗卡品诱导的C57BL/6J小鼠癫痫持续状态模型可引起明显的脑内皮细胞多糖包被降解、脑水肿、神经元损伤、血脑屏障破坏和胶质细胞活化。(2)肝素能保护多糖包被,提高小鼠SE后生存率,减轻神经元损伤、血脑屏障破坏、脑水肿程度及胶质细胞的活化和炎症因子表达。结论:(1)采用锂-匹罗卡品诱导C57B L/6J小鼠癫痫持续状态模型,可引起明显的多糖包被破坏、脑水肿、神经元损伤、血脑屏障破坏和胶质细胞活化,且破坏程度随SE持续时间延长而加重。(2)肝素可以保护多糖包被,提高小鼠SE后生存率;(3)肝素可明显减轻SE后神经元损伤、血脑屏障破坏和脑水肿严重程度;(4)肝素可明显减轻SE后小胶质细胞和星形胶质细胞的活化,抑制炎症反应;(5)肝素通过抑制肝素酶保护脑内皮细胞多糖包被。