基于NETs探讨三七总皂苷干预动脉粥样硬化伴急性心肌损伤的效应及机制研究

目的 探讨三七总皂苷通过调控NETs干预动脉粥样硬化伴急性心肌损伤的作用。方法 以ApoE基因敲除(ApoE~(-/-))小Canagliflozin作用鼠为研究对象,将21只8周龄ApoE~(-/-)小鼠随机分为ApoE~(-/-)组、ISO组、三七总皂苷(Panax Notoginseng Saponins,PNS组)给药组,每组7只。3组均饲喂高脂饲料模拟动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)发病过程,给药组给予PNS组200 mg·kg~(-1)·d~(-1),每只100μL腹腔注射,ApoE-/-组、ISO组每只腹腔注射0.9%生理盐水100μL,每天定点注射1次。8周后,ISO组和PNS组叠加腹腔注射异丙肾上腺素ISO(溶于0.9%生理盐水)10 mg·kg~(-1)·d~(-1),每只100μL,模拟急性心肌损伤。ISO连续造模并继续治疗5天后,处死取材。通过HE染色、油红O染色分别观察主动脉根部斑块病理形态学改变、心肌纤维化情况及脂质沉积情况;天狼星红染色评估心肌间隙胶原沉积情况;采用免疫组织化学法观察主动脉根部斑块部位中性粒细胞(Lymphocyte antigen 6 complex locus G6D,Ly6G)和髓过Fer-1氧化酶(Myeloperoxidase,MPO)以及心肌中Ly6G、瓜氨酸化组蛋白(Citrullinated histone H3,Cit-H3)的表达情况。结果 主动脉HE染Two-stage bioprocess色、油红O染色和天狼星红染色结果显示,与ApoE~(-/-)组相比,ISO组斑块面积与脂质沉积情况无显著差异(P>0.05),心肌纤维化面积和心肌间胶原纤维沉积面积显著增加(P<0.05);与ISO组相比,PNS组显著减小斑块面积、减少斑块上的脂质沉积、减少心肌纤维化面积和心肌间胶原纤维沉积(P<0.05)。免疫组织化学法结果提示,与ApoE~(-/-)组相比,ISO组斑块中MPO、Ly6G的表达无显著差异(P>0.05),心肌组织中Ly6G、Cit-H3表达明显升高(P<0.05);与ISO组相比,PNS组可以减少斑块中MPO、Ly6G的表达,并且降低心肌组织中Ly6G、Cit-H3表达(P<0.05)。结论 PNS组对动脉粥样硬化伴急性心肌损伤具有显著抑制斑块和减轻心肌损伤的综合作用,其机制可能与抑制斑块与心肌损伤部位NETs的激活有关。